Bitamina A sa dugo

Mga halaga Reference (normal) mga antas ng bitamina A (retinol) sa suwero ng dugo: mga bata 1-6 taon - 0.7-1.5 mol / L, 7-12 - 0,91-1,71 mmol / l, 13 -19 taon - 0,91-2,51 μmol / l; sa mga matatanda ito ay 1.05-2.09 μmol / l.

Bitamina A ay may kinalaman sa liposoluble at umiiral sa dalawang anyo - ang aktwal na bitamina A o retinol (matatagpuan lamang sa mga produkto ng hayop) at pro-bitamina A, na kilala bilang karotina (inihanda mula sa hayop o halaman pinanggalingan), na maaaring ma-convert sa retinol sa pader ang lagay ng pagtunaw. Humigit-kumulang 50-90% ng retinol papasok na pagkain ay hinihigop sa maliit na bituka at transported sa chylomicrons nauugnay sa complex sa atay, kung saan ito ay naka-imbak sa anyo ng retinol palmitate. Kung kinakailangan, ito ay inilabas sa daloy ng dugo sa anyo ng retinol, na kasama ng bitamina A-nagbubuklod na protina. Sa suwero, ang bitamina A-nagbubuklod na protina + retinol complex binds sa transthyretin. Mula sa suwero, retinol ay nakukuha ng mga target cells, tulad ng retinal photoreceptors at epithelium.

Kapag ang katawan ng bitamina A sa isang halaga na lalampas sa mga kinakailangan (180-430 micrograms retinol bawat araw depende sa edad, kasarian at physiological kondisyon), ang labis sa atay ay idineposito bumubuo ng depot ng bitamina. Sa isang pinababang paggamit ng retinol mula sa pagkain, ang mga tindahan ng atay ay inilabas sa daloy ng dugo, na nagpapanatili ng serum retinol concentration sa isang normal na antas (sa itaas 0.7 μmol / L). Ang iba pang mga biologically active forms ng bitamina A (retina at retinoic acid) ay nasa dugo sa napakababang konsentrasyon (sa ibaba 0.35 μmol / L); sa esters ng retinol accounts para sa humigit-kumulang 5% ng kabuuang bitamina A (0.1-0.1 μmol / l).

Ang bitamina A ay may mahalagang papel sa mga proseso ng pagbabawas ng oksihenasyon. Retinol nagpapalaganap ng pagbuo ng glycogen sa atay at kalamnan, nagpapabuti ng dugo kolesterol ay kasangkot sa pagbubuo ng mga steroid at hormones sex. Ito ay kinakailangan para sa paglago at pagbuo ng buto skeleton resynthesis ng rhodopsin, at nag-aambag din sa normal na paggana ng ang mauhog lamad at epithelium ng ang takip na balat, na pumipigil sa kanyang metaplasiya, hyperkeratosis at labis sloughing. Tumutulong ang bitamina A na palakasin ang buhok, ngipin at mga gilagid. Sa mga nakaraang taon, ito ay nagpapakita ng iba't-ibang papel na ginagampanan ng bitamina A sa pag-iwas ng kanser at ang regulasyon ng kaligtasan sa sakit (mahalaga para sa pagkumpleto ng phagocytosis, taasan ang synthesis ng Ig, stimulates ang produksyon ng killer T cells, stimulates ang T-helper type II et al.). Bitamina A - isang aktibong antioxidant, pangunahin na kumikilos sa pagkakaroon ng bitamina E; pinoprotektahan nito ang bitamina C mula sa oksihenasyon. Ang kakulangan ng bitamina A ay itinuturing na isang panganib na kadahilanan para sa malignant neoplasms. Sa mga pang-eksperimentong pag-aaral ay ipinapakita na ang pagtaas sa nilalaman ng bitamina A sa diyeta ay nagdaragdag ng median na tagal ng buhay sa pamamagitan ng 17.5%. Ang zinc ay isang mahalagang cofactor ng metabolismo ng bitamina A (kinakailangan para sa synthesis ng bitamina A-nagbubuklod na protina).

Ang average na pang araw-araw na kinakailangan para sa retinol matanda (20-50 taon) ay 1.2 mg (4.000 IU, 1 IU ay katumbas ng 0.3 micrograms ng retinol) para sa mga buntis na kababaihan - 1.5 mg (5000 IU) para sa pagpapasuso - 1, 8 mg (6000 IU), para sa mga taong mahigit sa 60 taon - 2.5 mg (10,000 IU). Hindi bababa sa isang ikatlong ng pang-araw-araw na kinakailangan ng retinol ay dapat maihatid sa katawan sa yari na form; ang natitira ay maaaring masustansya ng paggamit ng mga carotenoids, kung saan ang retinol ay bumubuo sa katawan. Dapat tandaan na ang humigit-kumulang 30% ng retinol sa pagkain ay nawasak ng kanilang paggamot sa init. Ang aktibidad ng retinol ay 2 beses na mas mataas kaysa sa karotina, bilang karagdagan, ang huli ay 30-40% lamang na hinihigop sa bituka. Samakatuwid, sa pagtatasa ng pag-inom ng pandiyeta, itinuturing na 1 mg ng retinol ang humigit-kumulang na tumutugma sa 6 mg ng karotenoids.

Pagpapasiya ng retinol (bitamina A) at carotenoids sa suwero ayon kay Bessey sa pagbabago ng LA Anisimova

Prinsipyo ng pamamaraan

Ang pagpapasiya ng bitamina A at carotenoids ay batay sa kanilang hydrolysis sa alkaline solution na alkohol, na sinusundan ng pagkuha ng isang pinaghalong organic solvents.

Mga Reagent

• 11 M solusyon ng potassium hydroxide (KOH).
• 96% ethyl alcohol.
• 1 M solusyon ng potassium hydroxide (KOH) sa 96% ethyl alcohol: 1 dami ng 11 M KOH solusyon ay halo-halong may 10 volume na 96% ethyl alcohol. Ang reagent ay inihanda sa araw ng pag-aaral. Kung ang pag-dye ay nangyayari sa panahon ng paghahalo, ang alkohol ay dapat na malinis sa pamamagitan ng paglilinis bago magamit.
• Xylol, hp.
• Oktan, h.ch.
• Xylene-oktano timpla: inihanda sa pamamagitan ng paghahalo ng pantay na volume ng xylene at oktano.

Isinasagawa ang mga pagsisiyasat sa isang spectrophotometer.

Ang kurso ng pagpapasiya ng bitamina A

Dugo na kinuha mula sa daliri (tungkol sa 1 ML) ay ipinakilala sa tatak na centrifuge at inilagay sa isang tasang salamin na may maligamgam na tubig (temperatura 40-45 ° C) sa loob ng 20-30 minuto. Upang paghiwalayin ang suwero, ang isang dugo clot ay maingat na sugat sa paligid ng gilid ng tubo na may manipis na salamin baras at centrifuged sa 3000 rpm para sa 10 minuto.

Piliin ang 0.12 ml ng serum at ilipat ito sa isang aglutinasyon tube, pagkatapos ay idagdag ang 0.12 ML ng isang 1 M alkohol potasa haydroksayd solusyon. Ang mga nilalaman ay inalog nang lubusan.

Ang mga tubes ng pagsubok na may probes ay inilalagay sa isang paliguan ng tubig para sa 20 minuto sa isang temperatura ng 60 ° C para sa hydrolysis.

Ang mga sample ay cooled at 0.12 ML ng isang xylene-oktano pinaghalong ay idinagdag sa kanila, liglig na masigla para sa 10-15 segundo. Cool muli at centrifuge.

Maingat na alisin ang tuktok na layer na naglalaman ng bitamina A at carotenoids na may Pasteur pipette na may goma at ilipat ito sa microcuvettes.

Ang mga halimbawa ay spectrophotometric sa isang wavelength ng 328 nm - upang matukoy ang bitamina A, at sa isang haba ng daluyong ng 460 nm - upang matukoy ang mga carotenoids.

Pagkatapos spectrophotometry ang aral sample ay sumailalim sa ultraviolet radiation para sa pagkawasak ng bitamina A. Para sa layuning ito, sa layo ng 15-20 cm mula sa kuwarts microcuvettes itakda (bactericidal) lamp upang ang pag-iilaw nakalantad na bahagi ng kubet, puno ng likido; ang oras ng pag-iilaw ay 45-60 minuto.

Ang mga sample ay paulit-ulit na spectrophotometric sa isang wavelength ng 328 nm. Ang nilalaman ng bitamina A ay tinutukoy mula sa pagkakaiba sa mga halaga ng pagkalipol (optical density), isinasaalang-alang ang koepisyent (factor) 637, na kinakalkula ng Bessey para sa bitamina A.

Ang pagkalkula ay isinasagawa ayon sa pormula:

X = 637 × (E328 (1) - E328 (2)),

Kung saan ang X ay ang bitamina A na nilalaman, μg / dL; 637 ay ang koepisyent na kinakalkula ni Bessey para sa pagpapasiya ng bitamina A; E328 (1) - ang optical density ng solusyon bago ang pag-iilaw; Ang E328 (2) ay ang optical density ng solusyon pagkatapos ng pag-iilaw.

Ang koepisyent sa paglilipat ng konsentrasyon ng bitamina A mula sa μg / dL sa μmol / l ay 0.035.

Ang nilalaman ng karotenoids ay kinakalkula ng formula:

X = 480-E480,

Kung saan ang X ay ang nilalaman ng carotenoids, μg / dL; 480 ay ang koepisyent na kinakalkula ng Bessey upang matukoy ang mga carotenoids; Ang E480 ay ang optical density ng solusyon sa pagsubok.

Tandaan:

Ayon Bessey, sa pananaliksik ay maaaring tumagal ng isang mas malaki o mas maliit na dami ng mga suwero, ngunit nito ratio sa dami ng alak na solusyon ay dapat na pare-pareho para sa anumang mga pagbabago sa ang lakas ng tunog (halaga) octanoic-xylene halo.

Ang pamantayan sa nilalaman ng bitamina A sa suwero ng dugo ay: sa mga bagong silang at mga sanggol - 160-270 μg / l; sa mga matatanda, 1.05-2.45 μmol / l (300-700 μg / l). Ang nilalaman ng karotenoids sa suwero ng adult ay 800-2300 μg / l.