Cholera Vibrio

Ayon sa WHO, ang cholera ay isang nakakahawang sakit, kung saan ang malubhang malubhang dehydrating na pagtatae na may mga feces sa anyo ng sabaw ng bigas ay bunga ng impeksiyon sa Vibrio cholerae. Dahil sa ang katunayan na ito ay isang binibigkas kapasidad para sa malawak na pagkalat ng epidemya, matinding kurso at mataas na kabagsikan, ang kolera ay isa sa mga pinaka-mapanganib na impeksiyon.

Kolera ay isang kasaysayan ng bayan Indya, mas tiyak, ang delta ng ilog Ganges at Brahmaputra (ngayon ang East Indya at Bangladesh), kung saan ito ay umiiral dahil ang liwayway ng oras (ang epidemya ng kolera sa lugar sinusunod 500 taon BC. E.). Ang mahabang pag-iral ng isang endemic foci ng kolera ay ipinaliwanag sa pamamagitan ng maraming mga kadahilanan. Ang Cholera vibrio ay hindi maaaring magpatuloy lamang sa mahabang panahon sa tubig, ngunit din multiply sa mga ito sa ilalim ng mga kondisyon na kanais-nais - temperatura sa itaas 12 ° C, pagkakaroon ng organic na mga sangkap. Ang lahat ng mga kondisyon sa Indya ay kitang-kita: ang isang tropikal na klima (average na temperatura 25 hanggang 29 ° C), masaganang ulan at waterlogging, mataas na density ng populasyon, lalo na sa Ganges delta, ang isang malaking halaga ng mga organic na mga sangkap sa tubig, ang tuloy-tuloy na-pag-ikot ng tubig polusyon wastewater at dumi , isang mababang materyal na pamantayan ng pamumuhay at natatanging relihiyoso at relihiyosong ritwal ng populasyon.

Sa kasaysayan ng mga epidemya ng kolera, ang apat na panahon ay maaaring makilala.

Panahon ko - hanggang 1817, nang ang kolera ay puro lamang sa Silangan at Timog Asya, pangunahin sa Indya, at hindi lumampas ito.

II panahon - 1817-1926 sa pagtatatag ng malawak na pang-ekonomiya at iba pang mga relasyon sa Indya, Europa at ibang mga bansa, kolera ay inilipat na lampas sa Indya, at pagpapalawak ng mga paraan ng pang-ekonomiya at relihiyosong relasyon, 6 na sanhi pandemics na pumatay milyon-milyong mga buhay ng tao. Ang Russia ang una sa mga bansang European kung saan natagos ang cholera. Sa panahon mula 1823 hanggang 1926, nakaranas ng 57 taon ng kolera ang Russia. Sa panahong ito mahigit 5.6 milyong katao ang nagkaroon ng kolera at 2.14 milyong katao ang namatay ("40%").

III panahon - mula 1926 hanggang 1961. Nagbalik si Cholera sa kanyang pangunahing endemic center, at isang panahon ng kamag-anak na kasaganaan ang dumating. Ito tila na sa pag-unlad ng modernong sistema ng inuming tubig paggamot, pag-alis at pagdidisimpekta ng wastewater at pag-unlad ng mga espesyal na hakbang kolera, kabilang ang kuwarentenas, ang mundo ay protektado mula sa panghihimasok sa isa pang kolera.

Ang panahon ng IV ay nagsimula noong 1961 at patuloy hanggang sa araw na ito. Ang ikapitong pandemic ay hindi nagsimula sa Indya, ngunit sa Indonesia, mabilis na lumubog ang Pilipinas, Tsina, mga bansa ng Indochina, at iba pang mga bansa ng Asya, Aprika at Europa. Mga Tampok na kasama sa pandemic na ito ay tumutulong ito, una, dahil sa isang espesyal na variant ng Vibrio cholerae - V. Cholerae eltor, na hanggang 1961 ay hindi opisyal na kinikilala ang kausatiba ahente ng kolera; Pangalawa, sa mga termino ng tagal, lumalampas ito sa lahat ng nakaraang pandemic; ikatlo, ito ay nangyayari sa anyo ng dalawang waves, ang unang ng kung saan tumagal hanggang 1990, at ang pangalawa ay nagsimula noong 1991 at kumalat sa maraming mga bansa sa Timog at Hilagang Amerika, kabilang ang Estados Unidos, na hindi alam kolera epidemya since 1866 Since 1961 Noong 1996, 3,943,239 ang mga tao ay may sakit sa kolera sa 146 na bansa.

Ang kausatiba ahente ng kolera, Vibrio cholerae ay natuklasan sa 1883 sa panahon ng ika-limang pandemic R. Koch, ngunit sa unang pagkakataon cholerae sa mga sakit ng mga pasyente na may pagtatae ay napansin sa 1854 sa pamamagitan ng F. Pacyna.

V. Cholerae ay kabilang sa pamilya Vibrionaceae, na kinabibilangan ng ilang genera (Vibrio, Aeromonas, Plesiomonas, Photobacterium). Ang genus Vibrio mula noong 1985 ay may higit sa 25 species, kung saan ang pinaka-mahalaga para sa mga taong magkaroon ng isang V. Cholerae, V. Parahaemolyticus, V. Alginolyticus, V. Vulnificus at V. Fluvialis.

[1], [2], [3], [4], [5], [6],

Mga pangunahing tampok ng genus Vibrio

Maikling hindi bumubuo ng spores at capsules, hindi tuwid o tuwid na Gram-negatibong bacillus na may isang lapad ng 0.5 microns, 1.5-3.0 microns ang haba), mobile (V. Cholerae - monotrih, sa ilang mga species, dalawa at higit pang mga polar flagellum) ; maayos at mabilis na lumalaki sa ordinaryong media, hemoorganotrofy, mangasim carbohydrates upang makabuo acids na walang gas (asukal fermented sa pamamagitan ng paraan EMBDEN-Meyerhof). Oksidazopolozhitelny anyo indole, bawasan ang nitrates sa nitrites (V. Cholerae nitrozoindolovuyu ay nagbibigay ng isang positibong reaksyon) ay digested gulaman, madalas na magbigay ng isang positibong reaksyon Voges-Proskauer (m. E. Form atsetilmetilkarbinol), urease ay hindi bumubuo ng H2S, ay lysine decarboxylase at Ornithine, ngunit walang arginine dihydrolase. Isang katangian tampok ay ang sensitivity ng genus Vibrio pinaka strains ng mga bakterya sa isang drug 0/129 (2,4-diamino-6,7-diazopropilpteridin), samantalang ang mga kinatawan ng mga pamilya Enterobacteriaceae at Pseudomonadaceae sa drug resistant. Vibrios - aerobic at pakultatibo anaerobes, ang mga pinakamabuting kalagayan temperatura para sa paglago ng 18-37 C, PH 8,6-9,0 (paglaki sa pH range 6,0-9,6), ang ilang mga species (halophiles) ay hindi lumago sa kawalan ng NaCl. G + C nilalaman sa DNA ay 40-50 Mol% (para sa V. Cholerae kumulang 47 mol%). Para sa pagkita ng kaibhan sa loob Vibrionaceae pamilya ng morphologically katulad na genera Aeromonas at Plesiomonas, pati na rin upang matukoy ito mula sa Enterobacteriaceae family ginagamit biochemical mga pagsubok.

Mula sa family Pseudomonadaceae Vibrio cholerae nailalarawan sa na nangangasim asukal tanging paraan EMBDEN-Meyerhof (nang walang paglahok ng O2), habang ang unang kumonsumo ng asukal lamang sa presensya ng O2. Ang pagkakaiba sa pagitan ng mga ito ay madaling inihayag sa Hugh-Leifson medium. Ang medium ay naglalaman ng nutrient agar, glucose at indicator. Ang paghahasik ay ginagawa sa dalawang haligi na may daluyan ng Hugh-Leifson, ang isa sa kanila ay puno ng petrolyo jelly (upang lumikha ng mga kondisyon ng anaerobic). Sa kaso ng paglago ng Vibrio cholerae kapaligiran mga pagbabago ng kulay sa parehong tubes sa kaso ng ang paglago ng Pseudomonas - lamang sa vitro walang baselina (aerobic mga kondisyon na paglago).

Ang Cholera vibrio ay napaka hindi mapagpanggap sa nutrient media. Ang reproduces ay maayos at mabilis sa isang 1% alkalina (pH 8.6-9.0) peptone water (PV) na naglalaman ng 0.5-1.0% NaCl, overtaking ang paglago ng iba pang mga bakterya. Upang sugpuin ang paglago ng protina sa 1% PV inirerekomendang magdagdag ng potassium tellurite (sa huling pagbabanto 1: 100,000). 1% PV ay ang pinakamahusay na pagpayaman daluyan para sa cholera vibrio. Sa panahon ng paglago nito ay bumubuo matapos 6-8 h sa ibabaw MF soft madaling madurog kulay-abo film na ay madaling nasira sa pamamagitan ng alog at bumaba sa ibaba sa anyo ng mga natuklap, MF moderately nalilito. Ang iba't ibang seleksyon ng media ay iminungkahi para sa paghihiwalay ng kolera vibrio: alkalina agar, apdo sa asin agar, alkaline albumin, alkaline agar na may dugo, lactose-sucrose at iba pang media. Ang pinakamahusay na daluyan ay TCBS (thiosulfate citrate-bromothymol sucrose agar) at ang mga pagbabago nito. Gayunpaman, ang pinaka-karaniwang ginagamit na alkaline MPA, kung saan ang cholera vibrio ay bumubuo ng makinis na salamin-transparent na may isang mala-bluish na kulay discoid colonies ng viscous consistency.

Kapag ang planting sa isang ulos sa haligi ng gelatin, ang vibrio ay nangyayari pagkatapos ng 2 araw. Sa temperatura ng 22 - 23 C ay nagiging sanhi ng likido mula sa ibabaw sa anyo ng isang bubble, pagkatapos hugis ng funnel at, sa wakas, layered.

Sa gatas cholerae multiply mabilis, na nagiging sanhi ng pamumuo ng 24-48 oras, at pagkatapos ay dumating peptonization ng gatas at pagkatapos ng 3-4 na araw cholerae namatay dahil sa isang shift ng gatas ph sa acid side.

B. Heiberg sa kakayahang mag-ferment ng mannose, sucrose at arabinose ay ibinahagi ang lahat ng vibrios (cholera at cholera-like) sa isang bilang ng mga grupo, ang bilang na ngayon ay 8.

Ang Cholera vibrio ay kabilang sa unang grupo ng Heyberg.

Vibrio, katulad sa morphological, pangkultura at biochemical katangian ng kolera, na tinatawag na at tinatawag sa iba't ibang mga paraan: paraholernymi, kolera, vibrios Nag (nonagglutinating Vibrio); Ang mga vibrio ay hindi kabilang sa grupong O1. Ang huli pangalan ay mas tumpak na nagbibigay diin sa kanilang kaugnayan sa cholera vibrio. Tulad nang nakalagay A. Gardner at K. Venkat-Raman, kolera Vibrio kolera at H nagbabahagi ng isang karaniwang antigen ngunit naiiba sa O-antigens. Tungkol sa antigen kolera at kolera-tulad ng Vibrio sa ngayon ipamahagi 139 O serogroups, ngunit ang kanilang mga numero iningatan lumalaki. Ang Cholera Vibrio ay kabilang sa grupong O1. Ito ay may isang pangkalahatang A-antigen at dalawang uri-tiyak antigen - B at C, kasama na may tatlong serotypes ng V. Cholerae - serotype Ogawa (AB), serotype Inaba (AU) at serotype Gikoshima (ABC). Ang cholera vibrio sa disosiation stage ay may isang OR antigen. Kaugnay nito, para sa pagtukoy ng paggamit V. Cholerae O-suwero, OR-type ang mga tiyak na suwero at suwero Inaba at Ogawa.

Noong 1992-1993 taon. Sa Bangladesh, India, China, Malaysia at iba pang mga bansa, isang pangunahing epidemya ng kolera ang nagsimula, ang causative agent na kung saan ay isang bago, hindi kilalang serovar ng species Vibrio cholerae. Ito ay naiiba sa V. Cholerae O1 sa mga antigenikong karatula: mayroon itong antigen 0139 at isang polysaccharide capsule at hindi agglutinated ng anumang iba pang mga O-sera. Ang lahat ng iba pang mga morphological at biological properties, kabilang ang kakayahang maging sanhi ng kolera, ibig sabihin, synthesize exotoxin-cholerogen, ay katulad ng sa V. Cholerae O1. Dahil dito, lumitaw ang isang bagong cholera causative agent, V. Cholerae 0139, tila dahil sa isang mutasyon na nagbago ng O-antigen, at tinawag na V. Cholerae 0139 bengal.

Ang tanong ng kaugnayan ng tinatawag na cholera-like vibrios sa V. Cholerae ay hindi malinaw sa loob ng mahabang panahon. Gayunman, ang paghahambing ng V. Cholerae at ang kolera (-NAG Vibrio) ay higit sa 70 mga tampok nagsiwalat pagkakapareho ng 90% at ang antas ng DNA homology aral V. Cholerae at Vibrio-NAG ay 70-100%. Samakatuwid, ang kolera Vibrio ay pinagsama sa isang view mula Vibrio cholerae, na kung saan ay naiiba na higit sa lahat sa kanilang mga O-antigens, at samakatuwid ay ang mga ito ay tinatawag na vibrios hindi 01-group - V. Cholerae 01 ang isang pop.

Uri ng V. Cholerae ay nahahati sa 4 biotype: V. Cholerae, V. Eltor, V. Proteyus at V. Albensis. Sa maraming taon, ang tanong ng likas na katangian ng vibrio El Tor ay tinalakay. Cholerae na ito ay ihiwalay noong 1906 sa pamamagitan ng F. Gotshlihom kuwarentenas station El Tor mula sa bangkay ng isang pilgrim na namatay mula sa iti. Tinukoy ni F. Gottshlich ang ilan sa mga strain na ito. Para sa lahat ng ari-arian, hindi nila mag-iba mula kolera at agglutinated kolera O suwero. Ngunit tulad ng sa gitna ng mga pilgrims sa Panahon ng kolera ay hindi doon, ngunit isang mahabang carrier kolera ay naisip malamang na hindi, ang mga posibleng etiologic papel na ginagampanan ng V. Eltor kolera mahabang nanatiling kontrobersyal. Bukod cholerae El Tor, hindi tulad ng V. Cholerae, siya ay nagkaroon ng isang hemolytic aktibidad. Gayunman, noong 1937 ito cholerae maging sanhi ng mga pangunahing at malubhang epidemya ng kolera sa isla ng Sulawesi (Indonesia) sa dami ng namamatay na labis sa 60%. Sa wakas, noong 1961, siya ay responsable para sa ika-7 pandemic, at sa 1962, ang tanong ng kanyang likas na katangian kolera ay sa wakas nalutas. Ang mga pagkakaiba sa pagitan ng V. Cholerae at V. Eltor ay tumutukoy lamang sa ilang mga tampok. Para sa lahat ng iba pang mga ari-arian, V. Eltor ay hindi sa panimula ay naiiba mula sa V. Cholerae. Higit pa rito, ngayon natagpuan na biotype V. Proteyus (V.finklerpriori) ay may kasamang ang buong vibrios group kaysa 01 na banda (ngayon at 0139) ay tinukoy dati-NAG vibrios. Biotype V. Albensis ay nakuhang muli mula sa ilog Elbe at may kakayahang phosphorescence, ngunit nawala ito, siya ay hindi naiiba mula V. Proteyus. Kaugnay ng mga data na ito ay ngayon uri ng Vibrio cholerae ay nahahati sa 4 biotype: V. Cholerae 01 cholerae, V. Cholerae eltor, V. Cholerae 0139 bengal at V. Cholerae non 01. Ang unang tatlong mga pag-aari ng dalawang serovar 01 at 0139. Last biovar may kasamang dating biotype V. Proteyus at V. Albensis at ipinapahayag ng maraming iba pang mga serovars cholerae na hindi agglutinate 01- at 0139-sera, t. E., NAG vibrios.

Mga kadahilanan ng pathogenicity ng cholera vibrio

[7], [8], [9], [10], [11], [12],

Chemotaxis ng cholera vibrio

Sa tulong ng mga pag-aari na ito, ang vibrio ay nakikipag-ugnayan sa mga epithelial cell. Sa mutants ng Vibrio cholerae (pagkawala ng kakayahan upang chemotaxis) malaking galit ay lubos na nabawasan sa mutants Mob (pagkawala ng kadaliang mapakilos) o mawala ganap o makabuluhang nabawasan.

Ang mga kadahilanan ng adhesion at colonization, kung saan ang vibrio ay sumusunod sa microvilli at colonizes ang mucosa ng maliit na bituka. Ang mga kadahilanan ng adhesion ay kinabibilangan ng mucinase, natutunaw na haemagglutinin / protease, neuraminidase, atbp. Itinataguyod ang adhesion at kolonisasyon, habang sinisira ang mga sangkap na bumubuo sa uhog. Ang natutunaw na hemagglutinin / protease ay nagtataguyod ng paghihiwalay ng mga vibrios mula sa mga receptors ng mga epithelial cells at ang kanilang pagtakas mula sa bituka sa panlabas na kapaligiran, na nagbibigay sa kanila ng epidemic spread. Pinapatibay ng neuraminidase ang bono ng cholerogen sa mga epithelial cells at pinapadali ang pagpasok ng mga toxin sa mga selula, na pinapataas ang kalubhaan ng pagtatae.

Ang cholera toxin ay isang cholerogen.

Ang tinatawag na bagong toxins na maaaring maging sanhi ng pagtatae, ngunit walang genetic at immunological relationship sa cholerogen.

Dermoneyrotic at hemorrhagic factors. Ang likas na katangian ng mga nakakalason na kadahilanan at ang kanilang papel sa pathogenesis ng kolera ay hindi nauunawaan.

[13], [14], [15], [16], [17], [18]

Cholera Vibrio Endotoxins

Ang Lipopolysaccharides V. Cholerae ay may isang malakas na endotoxic na ari-arian at nagiging sanhi ng isang pangkalahatang pagkalasing ng katawan.

Ang pinaka-mahalaga sa mga ito kadahilanan ng pathogenic ng Vibrio cholerae - choleragen exotoxin (CTX AB), na nagiging sanhi ng ang pathogenesis ng sakit na ito. Ang lason Molekyul ay binubuo ng dalawang mga fragment - A at B. Fragment A ay binubuo ng dalawang peptides - A1 at A2, ito ay may mga tiyak na ari-arian ng kolera lason at endows ito sa katangian superantigen. Ang Fragment B ay binubuo ng 5 identical subunits. Ito ay gumaganap ng dalawang function: 1) recognition receptors (monosialogangliozid) enterocyte at nagbubuklod sa mga ito; 2) bumuo ng isang hydrophobic intramembranous channel para sa pagpasa ng subunit A. Peptide A2 ay nagsisilbi upang panagutin ang mga fragment A at B. Sa katunayan ang pag-andar ng peptide nakakalason Aj (ADP-riboziltransferaza). Nakikipag-ugnayan ito sa NAD, nagiging sanhi ng hydrolysis nito; nabuo sa ADP-ribose binds sa regulasyon subunit ng adenylyl cyclase. Ito ay humantong sa pagsugpo ng hydrolysis ng GTP. Ang resultang complex ng GTP + adenylate cyclase nagiging sanhi ng haydrolisis ng ATP sa kampo ng bituin. (Ang isa pang paraan kampo akumulasyon - pagpigil choleric enzyme hydrolyzing kampo hanggang 5-AMP). Manipestasyon Tungkulin gene ctxAB, coding para sa synthesis exotoxin, ito ay depende sa pag-andar ng iba pang mga gene pathogenicity, sa partikular tcp gene (pag-encode ang synthesis ng lason-controlled pilus adhesion - TKPA) regulatoryong gene toxR, toxS at toxT, gene hap (natutunaw gemagglyutenin / protease) at pei (neuraminidase). Samakatuwid, ang genetic control ng pathogenicity ng V. Cholerae ay kumplikado.

Tulad nito, may dalawang pulo ng pathogenicity sa chromosome ng V. Cholerae. Isa sa mga ito ay ang genome ng filamentary, moderate converting phage STXf, at ang iba pa ay ang genome ng filiform, moderate convert phage VPIcp. Ang bawat isa sa mga pathogenetic na isla ay naglalaman ng cassettes ng mga genes ng nasabing prophase, na tumutukoy sa pathogenicity ng causative agent ng kolera. Ang prophage CTXf ay nagdadala ng CTX genes, genes ng bagong toxins zot and ace, ang ser gene (ang synthesis ng adhesin), ang ortU gene (synthesis ng isang produkto na may hindi kilalang function). Kasama sa parehong gene cassette ang pei gene at ang phage region ng RS2, na mga code para sa pagtitiklop, pati na rin ang pagsasama ng prophage sa chromosomes. Ang mga genes zot, alas at ortU ay kinakailangan para sa pagbuo ng phage virions maliban sa prophage mula sa causative agent chromosome.

Prophage gene VPIcp nagdadala ng TCP (pili naka-encode na mga produkto (protina TKPA)), gene toxT, toxR, act (isang karagdagang kadahilanan ng kolonisasyon gene kadaliang mapakilos (integrase at transposase)). Ang transcription ng mga gene ng virulence ay kinokontrol ng tatlong gene ng regulator: toxR, toxS, at toxT. Ang mga gene ay coordinately sa antas ng transcription baguhin ang mga aktibidad ng higit sa 20 malaking galit gene, kabilang ang mga gene ctxAB, TCP et al. Ang pangunahing-regulator gene ay ang toxR gene. Ang pinsala o pagkawala nito ay humantong sa pag-uumpisa o pagbawas sa produksyon ng CTX at TCHA cholera toxin sa pamamagitan ng higit sa 100 beses. Marahil, sa ganitong paraan, ang pinagsama-samang pagpapahayag ng mga gene ng virulence sa mga isla ng pathogenicity nabuo sa pamamagitan ng moderate-convert phages at sa iba pang mga species ng bakterya ay regulated. Ito ay itinatag na sa V. Cholerae eltor kromosoma mayroong isa pang prophage K139, ngunit ang kanyang genome ay hindi maayos na pinag-aralan.

Ang hap gene ay naisalokal sa kromosoma. Kaya, ang virulence (pathogenicity) at epidemic na kakayahan ng V. Cholerae ay tinutukoy ng 4 genes: ctxAB, tcp, toxR at hap.

Upang matukoy ang kakayahan ng V. Cholerae upang makabuo ng isang cholerogen, maaaring gamitin ang iba't ibang mga pamamaraan.

Biological test sa rabbits. (. Ang edad ng hindi hihigit sa 2 linggo) sa intramuscular Vibrio cholerae rabbits sanggol na pasusuhin, sila bumuo ng tipikal na kolera syndrome: pagtatae, dehydration at kamatayan ng kuneho.

Direktang pag-detect ng lason sa pamamagitan ng PCR IPM o passive immune tugon ng haemolysis (choleragen GMJ binds sa erythrocytes, sila pagdaragdag antitoksiko antibodies at mapupunan Lyse). Gayunpaman, ang pag-detect lamang ng kakayahang makagawa ng lason ay hindi sapat upang matukoy ang panganib ng epidemya ng naturang mga strain. Para sa ito ay kinakailangan upang kilalanin ang pag-iral ng hap gene, at sa gayon ito ay pinaka-maaasahang pag-iibahin ang epidemya strains at toxigenic V. Cholerae serogroups 01 at 0139 sa pamamagitan ng PCR paggamit ng mga tiyak primers para sa pagtuklas ng lahat ng 4 mga gene pathogenicity: ctxAB, TCP, toxR at suwerte.

Ang kakayahan ng V. Cholerae, hindi na kabilang sa serogroups 01 o 0139, upang maging sanhi ng kalat-kalat o grupo diarrheal sakit sa mga tao ay maaaring nauugnay alinman sa ang presensya ng enterotoxins type LT o ST, stimulating adenylate o guanylate cyclase system, ayon sa pagkakabanggit, o sa pagkakaroon ng mga gene lamang ctxAB, ngunit kakulangan ng gap ng gap.

Sa panahon ng ikapitong pandemic inilalaan V. Cholerae strains na may iba't ibang grado ng malaking galit: choleric (lason), bahagyang choleric (malovirulentnye) at neholerogennye (nonvirulent). Neholerogennye V. Cholerae, bilang isang panuntunan, eksibit haemolytic aktibidad na hindi lysed pamamagitan ng phage kolera diagnostic HDF (5) at hindi maging sanhi ng sakit ng tao.

Para sa phage pagta-type V. Cholerae 01 (kabilang ang El Tor) S. Mukherjee ay inaalok phages set, na kung saan ay pagkatapos ay sa Russia ay pupunan sa pamamagitan ng iba pang mga phages. Isang set ng mga phages (1-7) ay nagbibigay-daan sa iyo upang piliin sa gitna V. Cholerae 0116 mga uri phage. Upang makilala at toxigenic V. Cholerae El Tor nontoxigenic sa halip na ang CCF-3, 4-HDF at HDF-5 ay ngayon sa Russia inaalok phage CTX * (lysed toxigenic Vibrio El Tor) at CTX "(lysed nontoxigenic cholerae El Tor).

[19], [20], [21],

Paglaban ng cholera pathogens

Ang vibrating ng cholera ay nakataguyod ng maayos sa mababang temperatura; sa yelo panatilihin ang posibilidad na mabuhay hanggang sa 1 buwan; sa dagat ng tubig - hanggang sa 47 araw, sa ilog. - mula sa 3-5 araw upang ilang mga linggo, pinakuluang mineral water na naka-imbak ng higit sa 1 taon sa lupa - mula sa 8 araw sa 3 buwan, sa sariwang feces. - hanggang 3 araw, sa lutong pagkain nakataguyod makalipas ang 2-5 araw, hilaw na gulay - 2-4 araw sa prutas - 1-2 araw sa gatas at mga produkto ng gatas - 5 araw (kanin, noodles, karne, cereal, atbp.); kapag naka-imbak sa malamig, ang kaligtasan ng buhay ay nadagdagan ng 1-3 araw; sa lino laundry na kontaminado sa excrements, naka-imbak ng hanggang sa 2 araw, at sa wet materyal - isang linggo. Cholera vibrios sa 80 ° C mamatay pagkatapos ng 5 minuto, sa 100 ° C - agad; lubos na sensitibo sa mga acids; sa ilalim ng impluwensiya ng chloramine at iba pang mga disinfectants mamatay pagkatapos ng 5-15 minuto. Ang mga ito ay sensitibo sa drying at direktang liwanag ng araw, ngunit well nakapreserba para sa isang mahabang panahon at kahit na ilaganap sa bukas na tubig at wastewater mayaman sa organic na mga sangkap pagkakaroon ng isang alkalina ph at temperatura sa itaas 10 sa 12 ° C. Lubos na sensitibo sa murang luntian: isang dosis ng aktibong klorin na 0.3-0.4 mg / l ng tubig sa loob ng 30 minuto ay nagiging sanhi ng maaasahang pagdidisimpekta mula sa cholera vibrio.

Pathogenic para sa human vibrios, hindi nauugnay sa species Vibrio Cholerae

Ang genus Vibrio ay nagbibigay ng higit sa 25 species, ng V. Cholerae na bukod sa hindi bababa sa ang mga sumusunod na walong kakayahang magdulot ng sakit sa mga tao: V. Rarahaemolyticus, V. Alginolyticus, V. Vulnificus, V. Fluvialis, V. Fumissii, V. Mimicus, V damsela at V. Hollisae. Ang lahat ng mga vibrios ay mga naninirahan sa mga dagat at mga baybayin. Ang impeksiyon ay nangyayari sa pamamagitan ng alinman sa paliligo o pagkain ng pagkain ng marine origin. Tulad nito, ang cholera at non-cholera vibrios ay maaaring maging sanhi ng hindi lamang gastroenteritis, kundi pati na rin ang sugat na mga impeksiyon. Kakayahan na ito ay matatagpuan sa V. Cholerae 01- at 01 groups, mula sa V. Parahaemolyticus, V. Alginolyticus, V. Mimicus, V. Damsela at V. Vulnificus. Ang mga ito ay nagiging sanhi ng mga proseso ng pamamaga sa malambot na tisyu kapag nasira ang mga ito ng shell ng mga hayop sa dagat o sa direktang pakikipag-ugnayan sa nahawahan na tubig sa dagat.

Ang mga nakalista na pathogenic non-cholerae vibrios, V. Parahaemolyticus, V. Alginolyticus, V. Vulnificus at V. Fluvialis ay pinakadakilang praktikal na interes.

V. Parahaemolyticus - paragemolitichesky cholerae - ay unang ihiwalay sa Japan noong 1950 sa panahon ng isang malaking pag-aalsa ng pagkalason sa pagkain na sanhi ng pagkonsumo ng sardinas poluvysushennyh (dami ng namamatay rate ay 7.5%). Pathogen-aari sa genus Vibrio ay itinakda R. Sakazaki sa 1963. Siya na hinati sa strains aral sa pamamagitan ng 2 uri ng hayop: V. Parahaemolyticus at V. Alginolyticus. Ang parehong mga species ay matatagpuan sa coastal dagat ng tubig at ang mga naninirahan, ang mga ito ay halophiles (Griyego hals - asin); hindi tulad ng maginoo vibrios, halophilic mga hindi lumalaki sa media nang walang NaCl at magparami ng mabuti sa mataas na concentrations ng mga ito. Ang mga species na kabilang sa mga halophilic vibrios ay tinutukoy ng kanilang kakayahang mag-ferment sucrose, form acetylmethyl carbinol, dumami sa 10% NaCl na may PV. Ang lahat ng mga palatandaan na ito ay likas sa species V. Alginolyticus, ngunit wala sa V. Parahaemolyticus.

Paragemolitichesky cholerae ay may tatlong uri ng mga antigens: thermolabile flagellar H antigens matatag sa init T matibag kapag pinainit sa 120 ° C para sa 2 h at O-antigens Ibabaw ng K-antigens ay nawasak sa pamamagitan ng heating. Sariwang kultura V. Parahaemolyticus magkaroon ng isang maayos na natukoy na K-antigens na protektahan ang buhay mula sa Vibrio aglutinasyon homologo O-sera. Ang mga H-antigens sa lahat ng mga strains ay pareho, ngunit ang mga antigens ng H monotrich ay naiiba sa mga peritrichs H antigens. Sa O-antigen ng V. Parahaemolyticus ay nahahati sa 14 serogroups. Sa loob ng serogroups vibrios ay nahahati sa serotypes ng K-antigens, ang kabuuang bilang ng mga na kung saan ay 61. Antigenic scheme V. Parahaemolyticus idinisenyo lamang na patungkol sa kanyang mga strains secreted mula sa mga tao.

Ang pathogenicity ng V. Parahaemolyticus ay may kaugnayan sa kakayahang i-synthesize ang hemolysin, na may isang enterotoxic na ari-arian. Ang huli ay ipinahayag gamit ang Kanagawa. Ang kakanyahan nito ay nakasalalay sa katunayan na ang pathogenic para sa tao V. Parahaemolyticus sanhi ng malinaw na hemolysis sa dugo agar na naglalaman ng 7% NaCl. Sa blood agar na naglalaman ng mas mababa sa 5% NaCl, ang hemolysis ay nagiging sanhi ng maraming mga strain ng V. Parahaemolyticus, at sa dugo agar na may 7% NaCl lamang strains na may enteropathogenic properties. Ang paragemolytic vibrio ay matatagpuan sa mga baybayin ng Hapon, Caspian, Black at iba pang mga dagat. Ito ay nagdudulot ng mga sakit na nakukuha sa pagkain at mga sakit na tulad ng dysentery. Nangyayari ang impeksiyon kapag kumakain ng mga raw na hilaw o semi-hilaw na mga produktong marine na nahawaan ng V-parahaemolyticus (isda ng dagat, mga talaba, crustacean, atbp.).

Kabilang sa itaas walong mga uri ng mga di-kolera Vibrio pinaka-pathogenic para sa mga tao ay V. Vulnificus, na kung saan ay unang inilarawan noong 1976 bilang Beneckea vulnificus, at pagkatapos ay sa 1980, reclassified bilang Vibrio vulnificus. Madalas itong matatagpuan sa dagat at ng mga naninirahan nito at ang sanhi ng iba't ibang sakit ng tao. Ang mga strain ng V. Vulnificus ng marine at clinical origin ay hindi naiiba sa isa't isa alinman sa phenotypically o genetically.

Ang mabilis na mga impeksiyon na dulot ng V. Vulnificus ay mabilis na naunlad at humantong sa pagbuo ng mga tumor na sinusundan ng nekrosis ng tisyu, sinamahan ng lagnat, panginginig, kung minsan ay malubhang sakit, sa ilang mga kaso ay nangangailangan ng pagputol.

Ang V. Vulnificus ay may kakayahang makagawa ng exotoxin. Sa mga eksperimento ng hayop, natagpuan na ang causative agent ay nagiging sanhi ng matinding pinsala sa lokal na pag-unlad ng edema at tissue necrosis na sinundan ng isang nakamamatay na kinalabasan. Ang papel na ginagampanan ng exotoxin sa pathogenesis ng sakit ay pinag-aralan.

Bilang karagdagan sa mga impeksyon sa sugat, ang V. Vulnificus ay maaaring maging sanhi ng pneumonia sa mga tao na nalunod at endometritis sa mga kababaihan pagkatapos na nasa seawater. Ang pinaka-malubhang uri ng impeksiyon na dulot ng V. Vulnificus ay ang pangunahing septicemia na nauugnay sa pagkonsumo ng mga raw oysters (marahil ay iba pang mga hayop sa dagat). Ang sakit na ito ay mabilis na nagreresulta: ang pasyente ay may karamdaman, lagnat, panginginig at pagpapatirapa, pagkatapos ay malubhang hypotension, na siyang pangunahing sanhi ng kamatayan (lethality na halos 50%).

V. Fluvialis sa unang pagkakataon bilang ang kausatiba ahente ng malubhang kabag ay inilarawan sa 1981. Ito ay nabibilang sa isang subgroup ng mga non-kolera Vibrio pathogens na mayroon arginindi hydrolase, ngunit netornitin- at lysine decarboxylase (V. Fluvialis, V. Furnissii, V. Damsela, t. E. Phenotypically katulad sa Aeromonas). V. Fluvialis - frequent kausatiba ahente ng malubhang kabag, na kung saan ay sinamahan ng marahas na pagsusuka, pagtatae, sakit ng tiyan, lagnat at malakas o moderate dehydration. Ang pangunahing kadahilanan ng pathogenicity ay enterotoxin.

Epidemiology of cholera

Ang pangunahing pinagkukunan ng impeksyon ay isang tao lamang - isang pasyente na may kolera o isang vibrio carrier, pati na rin ang kontaminadong tubig. Walang mga hayop sa kalikasan ang may kolera. Ang paraan ng impeksiyon ay fecal-oral. Mga paraan ng impeksyon: a) pangunahing - sa pamamagitan ng tubig na ginagamit para sa pag-inom, pagligo at mga pangangailangan sa sambahayan; b) contact-household at c) sa pamamagitan ng pagkain. Ang lahat ng mga pangunahing epidemya at mga pandemiko ng kolera ay nauugnay sa tubig. Ang mga vibrio ng Cholera ay may mga mekanismo na nakakapag-agpang na tinitiyak ang pagkakaroon ng kanilang mga populasyon sa parehong katawan ng tao at sa ilang mga ecosystem ng mga bukas na katawan ng tubig. Labis-labis pagtatae, na kung saan ay sanhi ng Vibrio cholerae, na nagreresulta sa magbunot ng bituka hugas sa pamamagitan ng karibal bakterya at nag-aambag sa ang malawak na pagpapakalat ng pathogen sa kapaligiran, lalo na sa wastewater at sa malawak na karagatan, kung saan sila ay dumped. Ang isang tao na may kolera pathogen extracts sa mga malalaking numero - mula sa 100 million upang i 1 bilyon para sa 1 ml feces vibriocarrier 000 allocates 100-100 vibrios sa 1 ML infecting dosis ay tungkol sa 1 milyong vibrios. Ang tagal ng paglalaan ng cholera vibrio sa malusog na carrier ay 7-23 araw at 7-10 araw sa mga pasyente na nakuhang muli. Ang mas mahabang paglalabas ay napakabihirang.

Ang kakaibang uri ng kolera ay na pagkatapos nito, bilang isang patakaran, walang pangmatagalang carrier at walang matatag na endemic foci ang nabuo. Gayunpaman, tulad ng nabanggit sa itaas, na may kaugnayan sa contamination ng mga bukas na tubig wastewater naglalaman ng isang malaking halaga ng organic na mga sangkap, detergents at table asin, hindi lamang survives long sa tag-araw Vibrio cholerae sa mga ito, ngunit kahit na multiplies.

Ang isang mahalagang epidemiological significance ay ang katunayan na ang 01-grupo vibrios cholera, parehong non-nakakalason at toxigenic, ay maaaring magpumilit sa iba't ibang aquatic ecosystem para sa isang mahabang panahon sa anyo ng mga hindi nakabuo form. Sa tulong ng isang reaksyon ng polimerase sa kadena na may mga negatibong pag-aaral ng bacteriological sa isang bilang ng mga endemic na teritoryo ng CIS, ang mga vct-gen ng mga nonculturable form ng V. Chokrae ay natagpuan sa iba't ibang mga reservoir.

Endemic foci ng Vibrio cholerae El Tor ay Indonesia, ang paraan out ng mga ito salarin ikapitong pandemic ay naka-link, ay pinaniniwalaan na ang pagpapalawak ng pang-ekonomiyang mga relasyon sa Indonesia sa labas ng mundo pagkatapos ng pagkuha ng kanyang pagsasarili, at sa tagal at kidlat-mabilis na pag-unlad ng pandemic, lalo na sa kanyang ikalawang alon, isang mapag-aalinlanganan impluwensiya ay kulang sa kaligtasan sa kolera at iba't ibang panlipunan na pag-aalsa sa mga bansa ng Asya, Aprika at Amerika.

Sa kaganapan ng sakit na kolera natupad complex anti kaganapan, kabilang ang mga nangungunang at disidido ay aktibo maagang pagkakatuklas at paghihiwalay (ospital, paggamot) sa mga pasyente na may talamak at hindi tipiko hugis at malusog na vibriocarrier; ang mga panukala ay ginagawa upang pigilan ang mga posibleng paraan ng pagkalat ng impeksiyon; ang espesyal na pansin ay binabayaran sa supply ng tubig (chlorination ng inuming tubig), pagsunod sa sanitary at hygienic na rehimen sa mga negosyo ng pagkain, mga institusyon ng mga bata, mga pampublikong lugar; Isinasagawa ang mahigpit na kontrol, kabilang ang bacteriological, para sa bukas na reservoir, ang pagbabakuna ng populasyon ay isinasagawa, atbp.

[22], [23], [24], [25], [26],

Mga sintomas ng kolera

Ang incubation period para kolera ay nag-iiba mula sa isang ilang oras hanggang 6 na araw, higit sa lahat -. 2-3 araw. Sa sandaling sa lumen ng maliit na bituka, Vibrio cholerae sa gastos ng kadaliang mapakilos at chemotaxis mucosal ipinadala sa mga uhog. Upang tumagos therethrough vibrios makabuo ng isang bilang ng mga enzymes: neuraminidase, mucinases, proteases, lecithinase, na sirain ang mga sangkap na nakapaloob sa uhog at mapadali ang pagsulong ng vibrios sa epithelial cell. Sa pamamagitan ng pagdirikit vibrios i-attach sa glycocalyx epithelium at ankylosing magsisimulang upang ilaganap mabilis colonizing sa microvilli ng maliit na bituka (tingnan. Col. Inc., Fig. 101.2) at sabay-sabay bumuo ng isang malaking halaga ng lason, exotoxin. Molecules magbigkis sa lason na monosialogangliozidom Gni! At membrano ng selula, kung saan sila i-activate adenylate cyclase system, at naipon kampo nagiging sanhi hypersecretion ng tuluy-tuloy cations at anions, Na, HCO, KL, Cl mula enterocytes, na hahantong sa Cholera pagtatae, dehydration at desalting organismo. May tatlong mga uri ng sakit:

• isang marahas, matinding dehydrating diarrheal disease na humahantong sa pagkamatay ng pasyente sa ilang oras;
• mas malubhang kurso, o pagtatae nang hindi pag-aalis ng tubig;
• asymptomatic course ng sakit (vibrio-dala).

Sa malalang kolera mga pasyente ay may pagtatae, dumi ng tao ay nagiging mas madalas, ang stool ay nagiging mas masagana, pagkuha ng matubig na, mawawala fecal amoy at hitsura ng congee (maputik na likidong lumulutang sa loob nito mga labi ng uhog at epithelial cells). Pagkatapos, ang masuspindi na pagsusuka ay idinagdag, una sa mga nilalaman ng bituka, at pagkatapos ay ang suka ay nagiging isang sabaw na sabaw. Ang temperatura ng pasyente ay bumaba sa ibaba ng pamantayan, ang balat ay nagiging syanotic, kulubot at malamig - ang cholera algid. Bilang isang resulta, dehydration nangyayari pampalapot ng dugo, bubuo sayanosis, oxygen gutom, kapansin-pansing apektado bato function na, may mga pangingisay, ang mga pasyente loses malay at kamatayan ay nangyayari. Ang mortalidad mula sa kolera sa panahon ng ikapitong pandemic ay iba-iba mula sa 1.5% sa mga bansa na binuo hanggang 50% sa mga umuunlad na bansa.

Ang post-infectious immunity ay malakas, matagal, paulit-ulit na sakit ay bihira. Ang kaligtasan sa sakit ay antitoxic at antimicrobial, dahil sa mga antibodies (antitoxins nanatili pa kaysa antimicrobial antibodies), immune memory cells at phagocytes.

Mga diagnostic ng laboratoryo ng kolera

Ang pangunahing at pangwakas na pamamaraan para sa pag-diagnose ng kolera ay bacteriological. Ang mga materyales para sa pananaliksik mula sa pasyente ay kinabibilangan ng mga paggalaw ng bituka at suka; sa vibrio-dala, siyasatin ang excrement; sa mga taong namatay mula sa kolera, isang ligated na bahagi ng maliit na bituka at ang gallbladder ay kinuha para sa pagsusuri; Mula sa mga bagay ng kapaligiran, ang tubig mula sa bukas na mga reservoir at dumi sa alkantarilya ay madalas na sinisiyasat.

Kapag nagsasagawa ng isang bacteriological study, dapat sundin ang sumusunod na tatlong kondisyon:

• sa lalong madaling panahon upang maghasik ng materyal mula sa pasyente (ang cholera vibrio ay nagpapatuloy sa excrement sa maikling panahon);
• Ang mga pinggan kung saan ang materyal ay kinuha ay hindi dapat ma-desimpeksyon sa mga kemikal at hindi dapat maglaman ng mga bakas nito, yamang ang cholera vibrio ay masyadong sensitibo sa kanila;
• Ibukod ang posibilidad ng kontaminasyon at kontaminasyon ng iba.

Paghihiwalay ng ang kultura ay isinasagawa sa ilalim ng scheme: seeding sa PX at sa parehong oras sa alkalina IPA o anumang electoral kapaligiran (pinakamahusay TCBS). Pagkatapos ng 6 na oras nasubukan film nabuo sa MF, at kung kinakailangan, gawin ang ikalawang subculture MF (pagbabakuna ng Vibrio cholerae sa kasong ito ay nadagdagan ng 10%). Gamit ang PX huwag reseeding sa alkalina IPA. Kahina-hinalang mga kolonya (malasalamin transparent) subcultured upang makakuha ng isang dalisay na kultura, na kung saan ay kinilala sa pamamagitan ng morphological, kultural, biochemical mga katangian, kadaliang mapakilos, at sa wakas ay tipiruyut na may diagnostic aglutinasyon sera O-, O-, Inaba at Ogawa at phages (HDF). Iba't ibang mga variant ng mabilis na diagnostic pinakamahusay sa kanila ay luminescence-serum paraan. Pinapayagan nito sa tiktikan Vibrio cholerae direkta sa materyal (o pagkatapos ng paunang rearing sa dalawang tubes na may 1% MF, isa sa kung saan ay nagdagdag ng Vibrio phage) para sa 1.5-2 oras. Para sa mabilis na pag-detect sa Vibrio cholerae Nizhegorodskiy IEM isang kit papel indicator disc, na binubuo ng 13 biochemical mga pagsubok (oxidase, indole, urease, lactose, asukal, sucrose, mannose, arabinose, mannitol, inositol, arginine, ornithine, lysine), na nagpapahintulot sa pag-iibahin kasapi ng genus Vibrio panganganak Aeromon bilang, Plesiomonas, Pseudomonas, Comamonas, at mula sa pamilya Enterobacteriaceae. Para sa mabilis na pag-detect sa Vibrio cholerae sa tae at pangkapaligiran na mga bagay ay maaaring magamit sa mga TPHA antibody diagnosticum. Upang makilala Vibrio cholerae uncultivable anyo lamang ng isang paraan ng polymerase chain reaction ay ginagamit sa kapaligiran mga bagay.

Sa mga kaso kung saan ang V. Cholerae ay hindi Ol-grupo, dapat silang ma-type sa naaangkop na agglutinating sera ng iba pang mga serogroups. Ang paghihiwalay mula sa isang pasyente na may pagtatae (kabilang ang cholera-like) V. Cholerae hindi ng Ol-grupo ay nangangailangan ng parehong mga anti-epidemic na hakbang tulad sa kaso ng V. Cholerae Ol group. Kung kinakailangan, ang mga gene na ito sa tulong ng PCR ay matukoy ang pagkakaroon ng mga pathogenicity gen ctxAB, tcp, toxR at hap.

Ang serological diagnosis ng kolera ay may pantulong na karakter. Vibriocidal antibody titer pagpapasiya o antitoxins (antibodies sa choleric natutukoy sa pamamagitan ng enzyme immunoassay o immunofluorescent diskarte) - Sa layuning ito, aglutinasyon, ngunit sa halip ay maaaring gamitin.

Laboratory diagnostics ng non-cholera pathogenic vibrios

Ang pangunahing pamamaraan para sa pag-diagnose na sakit na sanhi ng pathogenic non-kolera vibrios ay bacteriological gamit mapamili media tulad ng TCBS, MacConkey et al. Na kabilang nakahiwalay na kultura ng genus Vibrio ay natutukoy batay sa mga pangunahing tampok ng ang mga bakterya ng genus na ito.

Paggamot ng kolera

Ang paggamot ng mga pasyente na may kolera ay dapat na buuin lalo na sa rehydration at pagpapanumbalik ng normal na metabolismo ng tubig-asin. Upang magawa ito, inirerekumenda na gamitin ang mga solusyon sa asin, halimbawa ng mga sumusunod na komposisyon: NaCl - 3.5; NaHC03 - 2.5; KC1 - 1.5 at glucose - 20.0 g bawat 1 litro ng tubig. Ang ganitong pathogenetically aral na paggamot sa kumbinasyon ng nakapangangatwiran antibyotiko therapy ay nagbibigay-daan upang bawasan ang dami ng namamatay sa kaso ng kolera hanggang sa 1% o mas mababa.

Tiyak na pag-iwas sa kolera

Upang lumikha ng artipisyal na kaligtasan sa sakit, iminungkahi ang pagbabakuna laban sa kolera, kabilang ang pinatay na mga strain ng Inaba at Ogawa; choleragen-toxoid para subcutaneous administration at enteral kemikal bivalent bakuna na binubuo ng tetanus toxoid antigen at somatic serotype Inaba at Ogawa, tulad ng cross-proteksyon ay hindi nabuo. Gayunpaman, ang tagal ng postvaccinal na kaligtasan sa sakit ay hindi hihigit sa 6-8 na buwan, kaya ang mga pagbabakuna ay isinasagawa lamang sa mga pahiwatig ng epidemya. Ang kolera sumiklab ay di-napatutunayang magandang antibyotiko, tetracycline sa partikular, Vibrio cholerae na exhibits mataas na sensitivity. Para sa parehong layunin, iba pang mabisang antibiotics laban sa V. Cholerae ay maaaring gamitin.