Mga limitasyon, panganib at komplikasyon ng cell transplantation

Ang regenerative plastic na gamot ay batay sa klinikal na pagpapatupad ng mga toti- at pluripotent na katangian ng mga embryonic at progenitor stem cell, na nagpapahintulot sa in vitro at in vivo ang paglikha ng mga tinukoy na linya ng cell na muling pumupuno sa mga nasirang tissue at organo ng isang taong may sakit.

Ang tunay na posibilidad ng paggamit ng mga embryonic stem cell at stem cell ng mga tiyak na tisyu (ang tinatawag na "pang-adultong" stem cell) ng mga tao para sa mga layuning panterapeutika ay wala nang alinlangan. Gayunpaman, ang mga eksperto mula sa National and Medical Academies of the USA (Stem cells and the future regenerative medicine National Academy Press) at National Institute of Health of the USA (Stem cells at ang hinaharap na direksyon ng pananaliksik. Nat. Inst, of Health USA) ay nagrerekomenda ng mas detalyadong pag-aaral ng mga katangian ng stem cell sa mga eksperimento sa sapat na biological na mga modelo at isang layunin na pagtatasa ng lahat ng mga kahihinatnan ng stemlinic na mga cell at pagkatapos ay gumamit lamang ng stemlinic transplant.

Ito ay itinatag na ang mga stem cell ay bahagi ng mga tissue derivatives ng lahat ng tatlong layer ng mikrobyo. Ang mga stem cell ay matatagpuan sa retina, cornea, epidermis ng balat, bone marrow at peripheral na dugo, sa mga daluyan ng dugo, sapal ng ngipin, bato, gastrointestinal epithelium, pancreas at atay. Gamit ang mga modernong pamamaraan, napatunayan na ang mga neural stem cell ay naisalokal sa utak at spinal cord ng isang may sapat na gulang. Ang mga nakakagulat na data na ito ay nakakuha ng espesyal na atensyon mula sa mga siyentipiko at media, dahil ang mga neuron sa utak ay nagsilbing isang klasikong halimbawa ng isang static na populasyon ng cell na hindi naibalik. Parehong sa maaga at huli na mga panahon ng ontogenesis, ang mga neuron, astrocytes at oligodendrocytes ay nabuo sa utak ng mga hayop at tao dahil sa mga neural stem cell (Stem cells: siyentipikong pag-unlad at mga direksyon sa pananaliksik sa hinaharap. Nat. Inst, ng Health USA).

Gayunpaman, sa ilalim ng normal na mga kondisyon, ang plasticity ng mga stem cell ng mga tiyak na tisyu ay hindi nagpapakita mismo. Upang mapagtanto ang potensyal na plastik ng mga stem cell ng mga tiyak na tisyu, dapat silang ihiwalay at pagkatapos ay linangin sa media na may mga cytokine (LIF, EGF, FGF). Bukod dito, matagumpay na nabubuo ang stem cell derivatives kapag inilipat sa katawan ng isang hayop na may depress na immune system (γ-irradiation, cytostatics, busulfan, atbp.). Sa ngayon, walang nakakumbinsi na ebidensya na nakuha sa pagpapatupad ng stem cell plasticity sa mga hayop na hindi pa nalantad sa radiation o iba pang mga epekto na nagdudulot ng malalim na immunosuppression.

Sa ganitong mga kondisyon, ang mapanganib na potensyal ng mga ESC ay nagpapakita ng sarili, una sa lahat, sa panahon ng kanilang paglipat sa mga ectopic na lugar - sa panahon ng subcutaneous na iniksyon ng mga ESC sa immunodeficient na mga daga, ang mga teratocarcinoma ay nabuo sa lugar ng iniksyon. Bilang karagdagan, sa panahon ng pagbuo ng embryo ng tao, ang dalas ng mga abnormalidad ng chromosomal ay mas mataas kaysa sa embryogenesis sa mga hayop. Sa yugto ng blastocyst, 20-25% lamang ng mga embryo ng tao ang binubuo ng mga cell na may normal na karyotype, at ang napakaraming karamihan ng mga unang embryo ng tao na nakuha pagkatapos ng in vitro fertilization ay nagpapakita ng magulong chromosomal mosaicism at napakadalas na nakakaharap ng mga numerical at structural aberrations.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ]

Mga kapaki-pakinabang na epekto ng mga stem cell

Ang mga paunang resulta ng mga klinikal na pagsubok ay nagpapatunay sa kapaki-pakinabang na epekto ng mga stem cell sa pasyente, ngunit wala pa ring impormasyon tungkol sa mga pangmatagalang epekto ng cell transplantation. Ang panitikan sa una ay pinangungunahan ng mga ulat ng mga positibong resulta ng paglipat ng mga fragment ng embryonic na utak sa sakit na Parkinson, ngunit pagkatapos ay nagsimulang lumitaw ang data na tinatanggihan ang epektibong therapeutic effect ng embryonic o fetal nerve tissue na inilipat sa utak ng mga pasyente.

Noong kalagitnaan ng ika-20 siglo, unang natuklasan ang pagpapanumbalik ng hematopoiesis sa mga nakamamatay na hayop pagkatapos ng intravenous transfusion ng bone marrow cell, at noong 1969, ang American researcher na si D. Thomas ay nagsagawa ng unang bone marrow transplant sa mga tao. Ang kakulangan ng kaalaman tungkol sa mga mekanismo ng immunological incompatibility ng donor at recipient bone marrow cells sa oras na iyon ay humantong sa mataas na dami ng namamatay dahil sa madalas na pagkabigo sa transplant at ang pagbuo ng graft-versus-host reaction. Ang pagtuklas ng pangunahing histocompatibility complex, na kinabibilangan ng mga human leukocyte antigens (HbA), at ang pagpapabuti ng kanilang mga pamamaraan sa pag-type ay naging posible upang makabuluhang mapataas ang kaligtasan pagkatapos ng paglipat ng utak ng buto, na humantong sa malawakang paggamit ng paraan ng paggamot na ito sa oncohematology. Pagkalipas ng isang dekada, isinagawa ang mga unang transplant ng hematopoietic stem cells (HSCs) na nakuha mula sa peripheral blood gamit ang leukapheresis. Noong 1988, ang dugo ng pusod ay unang ginamit bilang isang mapagkukunan ng mga HSC sa France upang gamutin ang isang bata na may Fanconi anemia, at mula noong katapusan ng 2000, ang mga ulat ay lumitaw sa press tungkol sa kakayahan ng mga HSC na mag-iba sa mga cell ng iba't ibang uri ng tissue, na potensyal na mapalawak ang saklaw ng kanilang klinikal na aplikasyon. Gayunpaman, lumabas na ang materyal ng transplant, kasama ang mga HSC, ay naglalaman ng isang makabuluhang bilang ng mga non-hematopoietic cell impurities ng iba't ibang mga kalikasan at katangian. Kaugnay nito, ang mga pamamaraan para sa paglilinis ng transplant at pamantayan para sa pagtatasa ng kadalisayan ng cellular nito ay binuo. Sa partikular, ginagamit ang positibong immunoselection ng CD34+ cells, na nagbibigay-daan para sa paghihiwalay ng mga HSC gamit ang monoclonal antibodies.

[ 8 ], [ 9 ], [ 10 ], [ 11 ], [ 12 ]

Mga komplikasyon ng stem cell therapy

Ang mga komplikasyon sa paglipat ng utak ng buto ay kadalasang hematological at nauugnay sa isang mahabang panahon ng iatrogenic pancytopenia. Ang mga nakakahawang komplikasyon, anemia at pagdurugo ay madalas na nabubuo. Sa pagsasaalang-alang na ito, napakahalaga na piliin ang pinakamainam na paraan ng pagkolekta, pagproseso at pag-iimbak ng utak ng buto para sa maximum na pangangalaga ng mga stem cell, na magsisiguro ng mabilis at matatag na pagpapanumbalik ng hematopoiesis. Kapag naglalarawan ng isang transplant, ang mga sumusunod na parameter ay kasalukuyang karaniwang tinatasa: ang bilang ng mga mononuclear at/o nucleated na mga cell, mga unit na bumubuo ng kolonya at ang nilalaman ng mga cell na positibo sa CD34. Sa kasamaang palad, ang mga tagapagpahiwatig na ito ay nagbibigay lamang ng isang hindi direktang pagtatasa ng tunay na kapasidad ng hematopoietic ng populasyon ng stem cell ng transplant. Ngayon, walang ganap na tumpak na mga parameter para sa pagtukoy ng kasapatan ng isang transplant para sa pangmatagalang pagpapanumbalik ng hematopoiesis sa mga pasyente, kahit na may autologous bone marrow transplantation. Ang pagbuo ng pangkalahatang pamantayan ay napakahirap dahil sa kakulangan ng mahigpit na pamantayan para sa pagproseso, cryopreservation at pagsubok ng transplant. Bilang karagdagan, kinakailangang isaalang-alang ang buong iba't ibang mga kadahilanan na nakakaimpluwensya sa mga parameter ng matagumpay na pagpapanumbalik ng hematopoiesis sa bawat indibidwal na pasyente. Sa autologous bone marrow transplantation, ang pinakamahalaga sa mga ito ay ang bilang ng mga nakaraang kurso sa chemotherapy, ang mga katangian ng conditioning regimen, ang panahon ng sakit kung saan nakolekta ang bone marrow, at ang mga scheme para sa paggamit ng colony-stimulating factors sa post-transplant period. Bilang karagdagan, hindi dapat kalimutan na ang chemotherapy bago ang koleksyon ng transplant ay maaaring magkaroon ng negatibong epekto sa bone marrow stem cell.

Ang insidente ng malubhang nakakalason na komplikasyon ay tumataas nang malaki sa panahon ng allogeneic bone marrow transplantation. Kaugnay nito, ang mga istatistika ng data sa allogeneic bone marrow transplantation sa thalassemia ay interesado. Ang mga ulat ng European Bone Marrow Transplantation Group ay nagrehistro ng humigit-kumulang 800 bone marrow transplantation sa mga pasyenteng may thalassemia major. Ang allogeneic transplantation sa thalassemia ay ginagawa sa karamihan ng mga kaso mula sa magkakatulad na kapatid na HLA, na nauugnay sa mga malubhang komplikasyon at mataas na dami ng namamatay sa panahon ng paglipat ng materyal na stem cell mula sa bahagyang magkatugma na nauugnay o magkatugma na hindi nauugnay na mga donor. Upang mabawasan ang panganib ng nakamamatay na nakakahawang komplikasyon, ang mga pasyente ay inilalagay sa mga nakahiwalay na aseptic box na may laminar air flow at tumatanggap ng low- o abacterial diet. Para sa bacterial decontamination ng bituka, ang mga non-resorbable form ng antibiotics at antifungal na gamot ay inireseta sa bawat os. Para sa prophylaxis, ang amphotericin B ay ibinibigay sa intravenously. Ang pag-iwas sa mga sistematikong impeksyon ay pinalakas ng amikacin at ceftazidime, na inireseta sa araw bago ang paglipat, patuloy na paggamot hanggang sa maalis ang pasyente. Ang lahat ng mga produkto ng dugo ay ini-irradiated sa isang dosis ng 30 Gy bago pagsasalin ng dugo. Ang nutrisyon ng parenteral sa panahon ng paglipat ay isang kinakailangang kondisyon at nagsisimula kaagad pagkatapos ng paghihigpit sa paggamit ng pagkain sa natural na paraan.

Ang ilang mga komplikasyon ay nauugnay sa mataas na toxicity ng mga immunosuppressive na gamot, na kadalasang nagiging sanhi ng pagduduwal, pagsusuka at mucositis, pinsala sa bato at interstitial pneumonia. Ang isa sa pinakamatinding komplikasyon ng chemotherapy ay ang veno-occlusive disease ng atay, na humahantong sa kamatayan sa maagang post-transplant period. Ang mga kadahilanan ng peligro para sa trombosis ng mga ugat ng portal system ng atay ay kinabibilangan ng edad ng mga pasyente, ang pagkakaroon ng hepatitis at fibrosis ng atay, pati na rin ang immunosuppressive therapy pagkatapos ng paglipat ng utak ng buto. Ang sakit na Veno-occlusive ay lalong mapanganib sa thalassemia, na sinamahan ng hemosiderosis ng atay, hepatitis at fibrosis - madalas na kasama ng transfusion therapy. Ang trombosis ng mga ugat ng portal system ng atay ay bubuo 1-2 linggo pagkatapos ng paglipat at nailalarawan sa pamamagitan ng isang mabilis na pagtaas sa nilalaman ng bilirubin at aktibidad ng transaminase sa dugo, pag-unlad ng hepatomegaly, ascites, encephalopathy at sakit sa itaas na tiyan. Histologically, ang autopsy material ay nagpapakita ng endothelial damage, subendothelial hemorrhages, pinsala sa centrilobular hepatocytes, thrombotic obstruction ng venule at central veins ng atay. Ang mga kaso ng fatal cardiac arrest na nauugnay sa mga nakakalason na epekto ng cytostatics ay inilarawan sa mga pasyente na may thalassemia.

Sa panahon ng pre-transplant, ang cyclophosphamide at busulfan ay kadalasang nagdudulot ng toxic-hemorrhagic cystitis na may mga pathological na pagbabago sa uroepithelial cells. Ang paggamit ng cyclosporine A sa bone marrow transplantation ay madalas na sinamahan ng nephro- at neurotoxicity, hypertension syndrome, fluid retention sa katawan, at hepatocyte cytolysis. Ang sekswal at reproductive dysfunction ay mas madalas na sinusunod sa mga kababaihan. Sa maliliit na bata, ang pag-unlad ng pubertal ay karaniwang hindi apektado pagkatapos ng paglipat, ngunit sa mas matatandang mga bata, ang patolohiya ng pag-unlad ng sekswal na globo ay maaaring maging napakaseryoso - hanggang sa sterility. Ang mga komplikasyon na direktang nauugnay sa transplant mismo ay kinabibilangan ng pagtanggi sa mga allogeneic bone marrow cells, hindi pagkakatugma ng ABO, talamak at talamak na anyo ng sakit na graft-versus-host.

Sa mga pasyente na may ABO-incompatible bone marrow transplantation, ang host-versus-ABO donor isoagglutinin ay ginawa sa loob ng 330-605 araw pagkatapos ng transplantation, na maaaring humantong sa matagal na hemolysis at kapansin-pansing tumaas ang pangangailangan para sa pagsasalin ng dugo. Ang komplikasyon na ito ay pinipigilan sa pamamagitan ng pagsasalin lamang ng uri 0 pulang selula ng dugo. Pagkatapos ng paglipat, ang ilang mga pasyente ay nakakaranas ng autoimmune neutropenia, thrombocytopenia, o pancytopenia, na nangangailangan ng splenectomy upang maitama.

Sa 35-40% ng mga tatanggap, ang talamak na graft-versus-host na sakit ay nabubuo sa loob ng 100 araw pagkatapos ng allogeneic HLA-identical bone marrow transplantation. Ang antas ng pagkakasangkot sa balat, atay, at bituka ay nag-iiba-iba mula sa pantal, pagtatae, at katamtamang hyperbilirubinemia hanggang sa pag-desquamation ng balat, pagbara ng bituka, at talamak na pagkabigo sa atay. Sa mga pasyenteng may thalassemia, ang saklaw ng grade I acute graft-versus-host disease pagkatapos ng bone marrow transplantation ay 75%, at grade II at mas mataas ay 11-53%. Ang talamak na graft-versus-host na sakit bilang isang systemic multiple organ syndrome ay karaniwang nabubuo sa loob ng 100-500 araw pagkatapos ng allogeneic bone marrow transplantation sa 30-50% ng mga pasyente. Ang balat, oral cavity, atay, mata, esophagus, at upper respiratory tract ay apektado. Ginagawa ang pagkakaiba sa pagitan ng isang limitadong anyo ng talamak na sakit na graft-versus-host, kapag ang balat at/o atay ay apektado, at isang malawakang anyo, kapag ang mga pangkalahatang sugat sa balat ay pinagsama sa talamak na agresibong hepatitis, mga sugat sa mata, mga glandula ng salivary, o anumang iba pang organ. Ang kamatayan ay kadalasang sanhi ng mga nakakahawang komplikasyon na nagreresulta mula sa matinding immunodeficiency. Sa thalassemia, ang isang banayad na anyo ng talamak na graft-versus-host na sakit ay nangyayari sa 12%, isang katamtamang anyo sa 3%, at isang malubhang anyo sa 0.9% ng mga tumatanggap ng allogeneic HLA-compatible na bone marrow. Ang isang malubhang komplikasyon ng paglipat ng utak ng buto ay ang pagtanggi sa graft, na bubuo 50-130 araw pagkatapos ng operasyon. Ang dalas ng pagtanggi ay depende sa conditioning regimen. Sa partikular, sa mga pasyente na may thalassemia na tumanggap lamang ng methotrexate sa panahon ng paghahanda, ang pagtanggi sa bone marrow transplant ay naobserbahan sa 26% ng mga kaso, na may kumbinasyon ng methotrexate na may cyclosporine A - sa 9% ng mga kaso, at sa pangangasiwa lamang ng cyclosporine A - sa 8% ng mga kaso (Gaziev et al., 1995).

Ang mga nakakahawang komplikasyon pagkatapos ng paglipat ng utak ng buto ay sanhi ng mga virus, bakterya at fungi. Ang kanilang pag-unlad ay nauugnay sa malalim na neutropenia na sapilitan ng mga gamot na chemotherapy sa panahon ng pagkondisyon, pinsala sa mga mucous barrier ng cytostatics at ang graft-versus-host reaction. Depende sa oras ng pag-unlad, tatlong yugto ng mga nakakahawang komplikasyon ay nakikilala. Sa unang yugto (bumubuo sa unang buwan pagkatapos ng paglipat), nangingibabaw ang pinsala sa mga mucous barrier at neutropenia, kadalasang sinasamahan ng mga impeksyon sa viral (herpes, Epstein-Barr virus, cytomegalovirus, Varicella zoster), pati na rin ang mga impeksyon na dulot ng gram-positive at gram-negative bacteria, Candida fungi, aspergilli. Sa unang bahagi ng post-transplantation period (ang ikalawa at ikatlong buwan pagkatapos ng transplantation), ang pinakamalubhang impeksyon ay cytomegalovirus, na kadalasang humahantong sa pagkamatay ng mga pasyente sa ikalawang yugto ng mga nakakahawang komplikasyon. Sa thalassemia, ang impeksyon ng cytomegalovirus pagkatapos ng paglipat ng utak ng buto ay bubuo sa 1.7-4.4% ng mga tatanggap. Ang ikatlong yugto ay sinusunod sa huling panahon ng post-transplant (tatlong buwan pagkatapos ng operasyon) at nailalarawan sa pamamagitan ng malubhang pinagsamang immunodeficiency. Ang mga impeksyong dulot ng Varicella zoster, streptococcus, Pneumocystis carinii, Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae, at hepatotropic virus ay karaniwan sa panahong ito. Sa thalassemia, ang dami ng namamatay sa mga pasyente pagkatapos ng bone marrow transplant ay nauugnay sa bacterial at fungal sepsis, idiopathic interstitial at cytomegalovirus pneumonia, acute respiratory distress syndrome, acute heart failure, cardiac tamponade, cerebral hemorrhage, veno-occlusive liver disease, at acute graft-versus-host disease.

Sa kasalukuyan, ang ilang mga tagumpay ay nakamit sa pagbuo ng mga pamamaraan para sa paghihiwalay ng mga purong populasyon ng hematopoietic stem cell mula sa bone marrow. Ang pamamaraan para sa pagkuha ng dugo ng pangsanggol mula sa umbilical cord ay napabuti, at ang mga pamamaraan para sa paghihiwalay ng mga hematopoietic na selula mula sa dugo ng kurdon ay nilikha. May mga ulat sa siyentipikong press na ang mga hematopoietic stem cell ay may kakayahang dumami kapag nilinang sa media na may mga cytokine. Kapag gumagamit ng espesyal na idinisenyong bioreactors para sa pagpapalawak ng hematopoietic stem cells, ang biomass ng hematopoietic stem cells na nakahiwalay sa bone marrow, peripheral o umbilical cord blood ay tumataas nang malaki. Ang posibilidad ng pagpapalawak ng hematopoietic stem cells ay isang mahalagang hakbang patungo sa klinikal na pag-unlad ng cell transplantation.

Gayunpaman, bago ang in vitro propagation ng hematopoietic stem cells, kinakailangan na ihiwalay ang isang homogenous na populasyon ng hematopoietic stem cells. Ito ay kadalasang nakakamit gamit ang mga marker na nagbibigay-daan sa selective labeling ng hematopoietic stem cells na may monoclonal antibodies na covalently linked sa isang fluorescent o magnetic label at ang kanilang paghihiwalay gamit ang isang naaangkop na cell sorter. Kasabay nito, ang isyu ng mga phenotypic na katangian ng hematopoietic stem cell ay hindi pa nalutas sa wakas. Itinuturing ni A. Petrenko, V. Grishchenko (2003) ang mga cell na may CD34, AC133, at Thyl antigens sa kanilang ibabaw at walang CD38, HLA-DR, o iba pang mga differentiation marker (mga cell na may CD34+Liir phenotype) bilang mga kandidato para sa hematopoietic stem cell. Kasama sa mga marker ng Lineage (Lin) ang glycophorin A (GPA), CD3, CD4, CD8, CD10, CD14, CD16, CD19, CD20 (Muench, 2001). Ang mga cell na may CD34+CD45RalüW CD71low phenotype, gayundin ang CD34+Thyl+CD38low/c-kit/low phenotype, ay itinuturing na promising para sa transplantation.

Ang isyu ng bilang ng mga hematopoietic stem cell na sapat para sa epektibong paglipat ay nananatiling problema. Sa kasalukuyan, ang mga pinagmumulan ng hematopoietic stem cell ay bone marrow, peripheral at cord blood, at embryonic liver. Ang pagpapalawak ng mga hematopoietic stem cell ay nakakamit sa pamamagitan ng pag-culture sa kanila sa pagkakaroon ng mga endothelial cells at hematopoietic growth factor. Sa iba't ibang mga protocol, ang myeloproteins, SCF, erythropoietin, insulin-like growth factor, corticosteroids, at estrogens ay ginagamit upang himukin ang paglaganap ng HSC. Kapag gumagamit ng mga kumbinasyon ng mga cytokine sa vitro, posible na makamit ang isang makabuluhang pagtaas sa pool ng HSC na may tugatog sa kanilang output sa pagtatapos ng ikalawang linggo ng paglilinang.

Ayon sa kaugalian, ang cord blood hematopoietic stem cell transplantation ay pangunahing ginagamit para sa hemoblastoses. Gayunpaman, ang pinakamababang dosis ng mga hematopoietic na selula na kinakailangan para sa matagumpay na paglipat ng selula ng dugo ng kurdon ay 3.7 x 10 ⁷ mga nucleated na selula sa bawat 1 kg ng timbang ng katawan ng tatanggap. Ang paggamit ng mas maliit na bilang ng cord blood hematopoietic stem cell ay makabuluhang nagpapataas ng panganib ng graft failure at pagbabalik ng sakit. Samakatuwid, ang cord blood hematopoietic stem cell transplantation ay pangunahing ginagamit upang gamutin ang mga hemoblastoses sa mga bata.

Sa kasamaang palad, wala pa ring mga pamantayan para sa pagkuha o standardized na mga protocol para sa klinikal na paggamit ng cord blood hematopoietic cells. Alinsunod dito, ang mga cord blood stem cell mismo ay hindi legal na kinikilalang pinagmumulan ng mga hematopoietic cell para sa paglipat. Bilang karagdagan, walang mga etikal o legal na pamantayan na namamahala sa mga aktibidad at organisasyon ng mga cord blood banks, na umiiral sa ibang bansa. Samantala, para sa ligtas na paglipat, ang lahat ng mga sample ng dugo ng kurdon ay dapat na maingat na subaybayan. Bago kumuha ng dugo mula sa isang buntis, dapat makuha ang kanyang pahintulot. Ang bawat buntis ay dapat suriin para sa HBsAg carriage, ang pagkakaroon ng mga antibodies sa hepatitis C, HIV at syphilis virus. Ang bawat sample ng dugo ng kurdon ay dapat na masuri bilang pamantayan para sa bilang ng mga nucleated na selula, CD34+ at kapasidad na bumubuo ng kolonya. Bilang karagdagan, ang pag-type ng HbA, ang pagpapasiya ng pangkat ng dugo ng ABO at ang pag-aari nito sa pamamagitan ng Rh factor ay isinasagawa. Ang mga kinakailangang pamamaraan ng pagsusuri ay bacteriological culture para sa sterility, serological testing para sa HIV-1 at HIV-2 na impeksyon, HBsAg, viral hepatitis C, cytomegalovirus infection, HTLY-1 at HTLY-II, syphilis at toxoplasmosis. Bilang karagdagan, ang polymerase chain reaction ay ginagawa upang makita ang mga impeksyon ng cytomegalovirus at HIV. Tila ipinapayong dagdagan ang mga protocol ng pagsubok na may pagsusuri ng cord blood GSC upang matukoy ang mga genetic na sakit gaya ng a-thalassemia, sickle cell anemia, kakulangan sa adenosine deaminase, agammaglobulinemia ni Bruton, mga sakit na Hurler at Ponter.

Ang susunod na yugto ng paghahanda para sa paglipat ay ang tanong ng pagpapanatili ng mga hematopoietic stem cell. Ang pinaka-mapanganib na mga pamamaraan para sa posibilidad na mabuhay ng mga cell sa panahon ng kanilang paghahanda ay nagyeyelo at lasaw. Kapag nagyeyelong mga selula ng hematopoietic, ang isang makabuluhang bahagi ng mga ito ay maaaring sirain dahil sa pagbuo ng kristal. Ang mga espesyal na sangkap - cryoprotectors - ay ginagamit upang bawasan ang porsyento ng pagkamatay ng cell. Kadalasan, ang DMSO ay ginagamit bilang isang cryoprotector sa panghuling konsentrasyon na 10%. Gayunpaman, ang DMSO sa naturang konsentrasyon ay nailalarawan sa pamamagitan ng isang direktang cytotoxic effect, na nagpapakita ng sarili kahit na sa ilalim ng mga kondisyon ng minimal na pagkakalantad. Ang pagbawas sa cytotoxic effect ay nakamit sa pamamagitan ng mahigpit na pagpapanatili ng zero temperature ng exposure mode, pati na rin ang pagsunod sa mga regulasyon para sa pagproseso ng materyal sa panahon at pagkatapos ng defrosting (bilis ng lahat ng manipulasyon, paggamit ng maramihang mga pamamaraan ng paghuhugas). Ang mga konsentrasyon ng DMSO na mas mababa sa 5% ay hindi dapat gamitin, dahil nagiging sanhi ito ng napakalaking pagkamatay ng mga hematopoietic na selula sa panahon ng pagyeyelo.

Ang pagkakaroon ng mga erythrocyte impurities sa suspension mixture ng hematopoietic stem cells ay lumilikha ng panganib na magkaroon ng incompatibility reaction para sa erythrocyte antigens. Kasabay nito, kapag ang mga erythrocytes ay tinanggal, ang pagkawala ng mga hematopoietic na selula ay tumataas nang malaki. Kaugnay nito, iminungkahi ang isang paraan ng unfractionated isolation ng hematopoietic stem cells. Sa kasong ito, ang isang 10% DMSO solution at constant-rate cooling (GS/min) hanggang -80°C ay ginagamit upang protektahan ang mga nucleated na cell mula sa mga nakakapinsalang epekto ng mababang temperatura, pagkatapos nito ang cell suspension ay nagyelo sa likidong nitrogen. Ito ay pinaniniwalaan na ang cryopreservation na paraan na ito ay nagreresulta sa bahagyang lysis ng mga erythrocytes, kaya ang mga sample ng dugo ay hindi nangangailangan ng fractionation. Bago ang paglipat, ang cell suspension ay defrosted, hugasan mula sa libreng hemoglobin at DMSO sa isang solusyon ng albumin ng tao o sa serum ng dugo. Ang pag-iingat ng mga hematopoietic precursors gamit ang pamamaraang ito ay talagang mas mataas kaysa pagkatapos ng fractionation ng umbilical cord blood, ngunit ang panganib ng mga komplikasyon ng transfusion dahil sa pagsasalin ng ABO-incompatible erythrocytes ay nananatili.

Ang pagtatatag ng isang sistema ng pagbabangko para sa pag-iimbak ng HLA-tested at typed HSC samples ay maaaring malutas ang mga problema sa itaas. Gayunpaman, nangangailangan ito ng pagbuo ng mga etikal at legal na pamantayan, na kasalukuyang tinatalakay lamang. Bago lumikha ng isang network ng pagbabangko, kinakailangan na magpatibay ng isang bilang ng mga regulasyon at dokumento sa standardisasyon ng mga pamamaraan para sa koleksyon, fractionation, pagsubok at pag-type, pati na rin ang cryopreservation ng HSC. Ang isang ipinag-uutos na kondisyon para sa epektibong operasyon ng mga bangko ng HSC ay ang organisasyon ng isang computer base para sa pakikipag-ugnayan sa mga rehistro ng World Marrow Donor Association (WMDA) at ng National Marrow Donor Program ng United States (NMDP).

Bilang karagdagan, kinakailangan na i-optimize at i-standardize ang mga pamamaraan ng pagpapalawak ng in vitro HSC, pangunahin ang cord blood hematopoietic cells. Ang pagpapalawak ng cord blood HSC ay kinakailangan upang madagdagan ang bilang ng mga potensyal na tatanggap na tugma sa HLA system. Dahil sa maliit na dami ng dugo ng kurdon, ang bilang ng mga HSC na nakapaloob dito ay kadalasang hindi nakakasiguro ng bone marrow repopulation sa mga pasyenteng nasa hustong gulang. Kasabay nito, upang maisagawa ang hindi nauugnay na mga transplant, kinakailangan na magkaroon ng access sa isang sapat na bilang ng mga nai-type na sample ng HSC (mula 10,000 hanggang 1,500,000 bawat tatanggap).

Ang paglipat ng mga hematopoietic stem cell ay hindi nag-aalis ng mga komplikasyon na kasama ng bone marrow transplantation. Ipinapakita ng pagsusuri na sa cord blood stem cell transplantation, ang malalang anyo ng talamak na graft-versus-host na sakit ay nabubuo sa 23% ng mga tatanggap, at mga talamak na anyo sa 25% ng mga tatanggap. Sa mga oncohematological na pasyente, ang mga relapses ng talamak na leukemia sa unang taon pagkatapos ng cord blood stem cell transplantation ay sinusunod sa 26% ng mga kaso.

Sa mga nagdaang taon, ang mga pamamaraan ng paglipat ng mga peripheral hematopoietic stem cell ay masinsinang umuunlad. Ang nilalaman ng HSC sa peripheral blood ay napakaliit (1 HSC bawat 100,000 na selula ng dugo) na ang kanilang paghihiwalay nang walang espesyal na paghahanda ay walang saysay. Samakatuwid, ang donor ay unang binibigyan ng kurso ng pagpapasigla ng gamot sa pagpapalabas ng mga hematopoietic na selula ng utak ng buto sa dugo. Para sa layuning ito, ang mga gamot na malayo sa hindi nakakapinsala tulad ng cyclophosphamide at granulocyte colony-stimulating factor ay ginagamit. Ngunit kahit na pagkatapos ng pamamaraan ng pagpapakilos ng HSC sa peripheral blood, ang nilalaman ng CD34+ cells sa loob nito ay hindi lalampas sa 1.6%.

Para sa pagpapakilos ng mga hematopoietic stem cell sa klinika, ang S-SEC ay kadalasang ginagamit, na kung saan ay nailalarawan sa pamamagitan ng medyo mahusay na pagpapaubaya, maliban sa halos natural na paglitaw ng sakit sa buto. Dapat pansinin na ang paggamit ng mga modernong separator ng dugo ay nagbibigay-daan para sa epektibong paghihiwalay ng mga hematopoietic stem cell. Gayunpaman, sa ilalim ng normal na kondisyon ng hematopoiesis, hindi bababa sa 6 na pamamaraan ang dapat gawin upang makakuha ng sapat na bilang ng mga hematopoietic stem cell na maihahambing sa kapasidad ng repopulation sa bone marrow suspension. Ang bawat naturang pamamaraan ay nangangailangan ng 10-12 litro ng dugo upang maiproseso sa separator, na maaaring magdulot ng thrombocytopenia at leukopenia. Ang pamamaraan ng paghihiwalay ay nagsasangkot ng pagpapakilala ng isang anticoagulant (sodium citrate) sa donor, na hindi nagbubukod, gayunpaman, ang contact activation ng mga platelet sa panahon ng extracorporeal centrifugation. Ang mga salik na ito ay lumilikha ng mga kondisyon para sa pagbuo ng mga nakakahawang komplikasyon at hemorrhagic. Ang isa pang kawalan ng pamamaraan ay ang makabuluhang pagkakaiba-iba ng tugon ng pagpapakilos, na nangangailangan ng pagsubaybay sa nilalaman ng mga HSC sa peripheral na dugo ng mga donor, na kinakailangan upang matukoy ang kanilang pinakamataas na antas.

Ang autogenous na paglipat ng mga hematopoietic stem cell, hindi katulad ng allogeneic transplantation, ay ganap na nag-aalis ng pagbuo ng reaksyon ng pagtanggi. Gayunpaman, ang isang makabuluhang kawalan ng autotransplantation ng mga hematopoietic stem cell, na naglilimita sa hanay ng mga indikasyon para sa pagpapatupad nito, ay ang mataas na posibilidad ng reinfusion ng leukemic clone cells na may transplant. Bilang karagdagan, ang kawalan ng immune-mediated na "graft versus tumor" na epekto ay makabuluhang pinatataas ang dalas ng mga relapses ng malignant na sakit sa dugo. Samakatuwid, ang tanging radikal na paraan ng pag-aalis ng neoplastic clonal hematopoiesis at pagpapanumbalik ng normal na polyclonal hematopoiesis sa myelodysplastic syndromes ay nananatiling intensive polychemotherapy na may paglipat ng allogeneic hematopoiesis.

Ngunit kahit na sa kasong ito, ang paggamot para sa karamihan ng mga hemoblastoses ay naglalayon lamang sa pagtaas ng oras ng kaligtasan ng mga pasyente at pagpapabuti ng kanilang kalidad ng buhay. Ayon sa maraming malalaking pag-aaral, ang pangmatagalang relapse-free survival pagkatapos ng allotransplantation ng HSCs ay nakamit sa 40% ng mga oncohematological na pasyente. Kapag gumagamit ng mga stem cell ng isang HLA-compatible na kapatid, ang pinakamahusay na mga resulta ay sinusunod sa mga batang pasyente na may maikling kasaysayan ng sakit, isang blast cell count na hanggang 10% at paborableng cytogenetics. Sa kasamaang palad, ang dami ng namamatay na nauugnay sa pamamaraan ng allotransplantation ng HSC sa mga pasyente na may myelodysplastic na sakit ay nananatiling mataas (sa karamihan ng mga ulat - mga 40%). Ang mga resulta ng 10-taong trabaho ng National Bone Marrow Donor Program sa USA (510 mga pasyente, median na edad - 38 taon) ay nagpapahiwatig na ang relapse-free survival sa loob ng dalawang taon ay 29% na may medyo mababang posibilidad ng relapse (14%). Gayunpaman, ang dami ng namamatay na nauugnay sa pamamaraan ng allotransplantation ng HSC mula sa isang hindi nauugnay na donor ay napakataas at umabot sa 54% sa loob ng dalawang taong panahon. Ang mga katulad na resulta ay nakuha sa isang pag-aaral sa Europa (118 na mga pasyente, median na edad - 24 na taon, dalawang taon na walang pagbabalik sa buhay - 28%, relapse - 35%, mortalidad - 58%).

Sa panahon ng masinsinang mga kurso sa chemotherapy na may kasunod na pagpapanumbalik ng hematopoiesis na may mga allogeneic hematopoietic na selula, madalas na nangyayari ang mga komplikasyon ng immunohematological at transfusion. Ang mga ito ay higit sa lahat dahil sa katotohanan na ang mga pangkat ng dugo ng tao ay minana nang nakapag-iisa sa mga molekula ng MHC. Samakatuwid, kahit na ang donor at recipient ay magkatugma para sa pangunahing HLA antigens, ang kanilang mga erythrocytes ay maaaring may iba't ibang phenotypes. Ang isang pagkakaiba ay ginawa sa pagitan ng "pangunahing" incompatibility, kapag ang tatanggap ay may dati nang mga antibodies sa erythrocyte antigens ng donor, at "minor" na hindi pagkakatugma, kapag ang donor ay may mga antibodies sa erythrocyte antigens ng tatanggap. Ang mga kaso ng kumbinasyon ng "major" at "minor" na hindi pagkakatugma ay posible.

Ang mga resulta ng isang paghahambing na pagsusuri ng klinikal na pagiging epektibo ng allotransplantation ng bone marrow at cord blood hematopoietic stem cells sa hemoblastoses ay nagpapahiwatig na sa mga bata pagkatapos ng allotransplantation ng cord blood hematopoietic stem cells, ang panganib na magkaroon ng graft-versus-host reaction ay makabuluhang nabawasan, ngunit ang isang mas mahabang panahon ng pagbawi ng bilang ng mga neutrophil at mga platelet na sinusunod pagkatapos ng isang araw ay mas mataas. mortalidad.

Ang pag-aaral ng mga sanhi ng maagang pagkamatay ay naging posible upang linawin ang mga kontraindikasyon sa allogeneic HSC transplantation, kung saan ang pinakamahalaga ay:

• ang pagkakaroon ng mga positibong pagsusuri para sa impeksyon ng cytomegalovirus sa tatanggap o donor (nang walang pang-iwas na paggamot);
• talamak na sakit sa radiation;
• ang pagkakaroon o kahit na hinala ng pagkakaroon ng mycotic infection sa isang pasyente (nang hindi nagsasagawa ng systemic early prophylaxis na may mga fungicidal na gamot);
• hemoblastoses, kung saan ang mga pasyente ay nakatanggap ng pangmatagalang paggamot na may cytostatics (dahil sa mataas na posibilidad ng biglaang pag-aresto sa puso at maramihang organ failure);
• paglipat mula sa HLA-non-identical donor (nang walang prophylaxis ng talamak na graft-versus-host na reaksyon sa cyclosporine A);
• talamak na viral hepatitis C (dahil sa mataas na panganib na magkaroon ng veno-occlusive na sakit sa atay).

Kaya, ang paglipat ng HSC ay maaaring magdulot ng malubhang komplikasyon, na kadalasang humahantong sa kamatayan. Sa maagang (hanggang 100 araw pagkatapos ng paglipat), kabilang dito ang mga nakakahawang komplikasyon, talamak na graft-versus-host disease, graft rejection (pagkabigo ng donor HSCs), veno-occlusive liver disease, pati na rin ang tissue damage na dulot ng toxicity ng conditioning regimen, na kung saan ay nailalarawan sa pamamagitan ng mataas na remodeling rate (skin, invasculartest endothelium). Kabilang sa mga komplikasyon ng huling panahon pagkatapos ng transplantasyon ay ang talamak na sakit na graft-versus-host, mga pagbabalik ng pinag-uugatang sakit, pagpapahinto ng paglaki sa mga bata, dysfunction ng reproductive system at thyroid gland, at pinsala sa mata.

Kamakailan lamang, may kaugnayan sa mga publikasyon sa plasticity ng bone marrow cells, ang ideya ng paggamit ng HSCs upang gamutin ang mga atake sa puso at iba pang mga sakit ay lumitaw. Bagaman sinusuportahan ng ilang mga eksperimento sa hayop ang posibilidad na ito, ang mga konklusyon tungkol sa plasticity ng mga selula ng bone marrow ay kailangang kumpirmahin. Ang sitwasyong ito ay dapat isaalang-alang ng mga mananaliksik na naniniwala na ang mga inilipat na selula ng utak ng buto ng tao ay madaling mabago sa kalamnan ng kalansay, myocardial o mga selula ng CNS. Ang hypothesis na ang mga HSC ay isang natural na cellular source ng pagbabagong-buhay ng mga organ na ito ay nangangailangan ng seryosong ebidensya.

Sa partikular, ang mga unang resulta ng isang bukas na randomized na pag-aaral ni V. Belenkov (2003) ay nai-publish. Ang layunin nito ay pag-aralan ang epekto ng C-SvK (ibig sabihin, pagpapakilos ng mga autologous HSC sa dugo) sa klinikal, hemodynamic, at neurohumoral na katayuan ng mga pasyente na may katamtaman hanggang malubhang talamak na pagpalya ng puso, pati na rin suriin ang kaligtasan nito laban sa background ng karaniwang therapy (angiotensin-converting enzyme inhibitors, beta-blockers, diuretics, cardiac glycosides). Sa unang publikasyon ng mga resulta ng pag-aaral, napansin ng mga may-akda ng programa na ang tanging argumento na pabor sa O-SvK ay ang mga resulta ng paggamot sa isang pasyente, na nagpakita ng hindi mapag-aalinlanganang pagpapabuti sa lahat ng mga klinikal at hemodynamic na mga parameter laban sa background ng therapy sa gamot na ito. Gayunpaman, ang teorya ng pagpapakilos ng HSC sa daloy ng dugo na may kasunod na pagbabagong-buhay ng myocardial sa post-infarction zone ay hindi nakumpirma - kahit na sa isang pasyente na may positibong klinikal na dinamika, ang stress echocardiography na may dobutamine ay hindi nagpahayag ng hitsura ng mga zone ng mabubuhay na myocardium sa lugar ng peklat.

Dapat tandaan na sa kasalukuyan ay malinaw na walang sapat na data upang magrekomenda ng kapalit na cell therapy para sa malawakang pagpapatupad sa pang-araw-araw na klinikal na kasanayan. Ang mahusay na dinisenyo at mataas na kalidad na mga klinikal na pag-aaral ay kinakailangan upang matukoy ang pagiging epektibo ng iba't ibang mga opsyon para sa regenerative cell therapy, bumuo ng mga indikasyon at contraindications para dito, pati na rin ang mga patnubay para sa pinagsamang paggamit ng regenerative-plastic therapy at tradisyonal na surgical o konserbatibong paggamot. Wala pa ring sagot sa tanong kung aling partikular na populasyon ng mga selula ng utak ng buto (stem hematopoietic o stromal) ang maaaring magbunga ng mga neuron at cardiomyocytes, at hindi rin malinaw kung anong mga kondisyon ang nag-aambag dito sa vivo.

Ang trabaho sa mga lugar na ito ay isinasagawa sa maraming bansa. Sa buod ng symposium sa talamak na pagkabigo sa atay ng National Institutes of Health ng USA, kabilang sa mga promising na pamamaraan ng paggamot, kasama ang paglipat ng atay, ang paglipat ng xeno- o allogeneic hepatocytes at extracorporeal na koneksyon ng mga bioreactor na may mga selula ng atay ay nabanggit. Mayroong direktang katibayan na ang mga dayuhang aktibong aktibong hepatocyte lamang ang makakapagbigay ng epektibong suporta sa atay ng tatanggap. Para sa klinikal na paggamit ng mga nakahiwalay na hepatocytes, kinakailangan na lumikha ng isang cell bank, na makabuluhang bawasan ang oras sa pagitan ng paghihiwalay ng mga cell at ang kanilang paggamit. Ang pinaka-katanggap-tanggap na paraan para sa paglikha ng isang bangko ng mga nakahiwalay na hepatocytes ay cryopreservation ng mga selula ng atay sa likidong nitrogen. Kapag gumagamit ng naturang mga cell sa klinika sa mga pasyente na may talamak at talamak na pagkabigo sa atay, ang isang medyo mataas na therapeutic effect ay ipinahayag.

Sa kabila ng optimistiko at nakapagpapatibay na mga resulta ng paglipat ng selula ng atay sa mga eksperimento at klinikal na kasanayan, marami pa ring mga problema na malayong malutas. Kabilang dito ang isang limitadong bilang ng mga organo na angkop para sa pagkuha ng mga nakahiwalay na hepatocytes, hindi sapat na epektibong mga pamamaraan para sa kanilang paghihiwalay, ang kawalan ng mga standardized na pamamaraan para sa pagpapanatili ng mga selula ng atay, hindi malinaw na mga ideya tungkol sa mga mekanismo ng paglaki at paglaganap ng regulasyon ng mga transplanted na selula, ang kawalan ng sapat na mga pamamaraan para sa pagtatasa ng engraftment o pagtanggi ng allogeneic hepatocytes. Kasama rin dito ang pagkakaroon ng transplant immunity kapag gumagamit ng allogeneic at xenogeneic cells, kahit na mas mababa kaysa sa orthotopic liver transplantation, ngunit nangangailangan ng paggamit ng mga immunosuppressant, encapsulation ng mga nakahiwalay na hepatocytes o ang kanilang espesyal na paggamot sa mga enzymes. Ang paglipat ng hepatocyte ay kadalasang humahantong sa isang immune conflict sa pagitan ng tatanggap at ng donor sa anyo ng reaksyon ng pagtanggi, na nangangailangan ng paggamit ng mga cytostatics. Ang isang solusyon sa problemang ito ay maaaring ang paggamit ng polymeric microporous carrier upang ihiwalay ang mga selula ng atay, na magpapahusay sa kanilang kaligtasan, dahil epektibong pinoprotektahan ng capsule membrane ang mga hepatocyte sa kabila ng pagbabakuna sa host.

Gayunpaman, sa talamak na pagkabigo sa atay, ang naturang paglipat ng hepatocyte ay hindi epektibo dahil sa medyo mahabang oras na kinakailangan para sa mga selula ng atay na ma-engraft sa isang bagong kapaligiran at maabot ang yugto ng pinakamainam na paggana. Ang isang potensyal na limitasyon ay ang pagtatago ng apdo sa panahon ng ectopic na paglipat ng mga nakahiwalay na hepatocytes, at kapag gumagamit ng mga bioreactor, isang makabuluhang hadlang sa pisyolohikal ay ang hindi pagkakatugma ng mga species sa pagitan ng mga protina ng tao at ang mga protina na ginawa ng mga xenogenic hepatocytes.

May mga ulat sa literatura na ang lokal na paglipat ng bone marrow stromal stem cells ay nagpapadali sa epektibong pagwawasto ng mga depekto sa buto, at ang pagpapanumbalik ng bone tissue sa kasong ito ay nagpapatuloy nang mas masinsinan kaysa sa kusang reparative regeneration. Maraming mga preclinical na pag-aaral sa mga eksperimentong modelo ang nakakumbinsi na nagpapakita ng posibilidad ng paggamit ng bone marrow stromal cell transplants sa orthopedics, bagaman kailangan ang karagdagang trabaho upang ma-optimize ang mga pamamaraang ito, kahit na sa pinakasimpleng mga kaso. Sa partikular, ang pinakamainam na mga kondisyon para sa pagpapalawak ng mga osteogenic stromal cells ex vivo ay hindi pa natagpuan, at ang istraktura at komposisyon ng kanilang perpektong carrier (matrix) ay nananatiling hindi nabuo. Ang pinakamababang bilang ng mga cell na kinakailangan para sa volumetric bone regeneration ay hindi pa natukoy.

Napatunayan na ang mga mesenchymal stem cell ay nagpapakita ng transgermal plasticity, ibig sabihin, ang kakayahang mag-iba sa mga uri ng cell na phenotypical na hindi nauugnay sa mga cell ng orihinal na linya. Sa ilalim ng pinakamainam na kondisyon ng paglilinang, ang polyclonal bone marrow stromal stem cell lines ay maaaring makatiis ng higit sa 50 divisions in vitro, na ginagawang posible na makakuha ng bilyun-bilyong stromal cells mula sa 1 ml ng bone marrow aspirate. Gayunpaman, ang populasyon ng mga mesenchymal stem cell ay heterogenous, na ipinapakita ng parehong pagkakaiba-iba sa mga laki ng kolonya, iba't ibang mga rate ng kanilang pagbuo, at pagkakaiba-iba ng morphological ng mga uri ng cell, mula sa fibroblast-like spindle-shaped hanggang sa malalaking flat cell. Ang phenotypic heterogeneity ay naobserbahan pagkatapos lamang ng 3 linggo ng stromal stem cell cultivation: ang ilang mga kolonya ay bumubuo ng mga nodule ng bone tissue, ang iba ay bumubuo ng mga kumpol ng adipocytes, at ang iba, mas bihira, ay bumubuo ng mga isla ng cartilage tissue.

Ang paglipat ng embryonic nervous tissue ay unang ginamit upang gamutin ang mga degenerative na sakit ng central nervous system. Sa mga nagdaang taon, ang mga cellular na elemento ng neurospheres na nakuha mula sa neural stem cells ay inilipat sa halip na embryonic brain tissue (Poltavtseva, 2001). Ang mga neurosphere ay naglalaman ng mga nakatuong precursor ng mga neuron at neuroglia, na nagbibigay ng pag-asa para sa pagpapanumbalik ng mga nawawalang function ng utak pagkatapos ng kanilang paglipat. Pagkatapos ng paglipat ng mga dispersed neurosphere cells sa striatum na rehiyon ng utak ng daga, ang kanilang paglaganap at pagkita ng kaibhan sa mga dopaminergic neuron ay nabanggit, na nag-alis ng motor asymmetry sa mga daga na may eksperimentong hemiparkinsonism. Gayunpaman, sa ilang mga kaso, ang mga tumor ay nabuo mula sa mga selula ng neurosphere, na humantong sa pagkamatay ng mga hayop (Bjorklund, 2002).

Sa klinika, ang maingat na pag-aaral ng dalawang grupo ng mga pasyente, kung saan hindi alam ng mga pasyente o ng mga doktor na nagmamasid sa kanila (double-blind na pag-aaral), na ang isang grupo ng mga pasyente ay inilipat na may embryonic tissue na may mga neuron na gumagawa ng dopamine, at ang pangalawang grupo ng mga pasyente ay sumailalim sa isang sham operation, ay nagbigay ng hindi inaasahang resulta. Ang mga pasyente na na-transplant na may embryonic nerve tissue ay hindi nakadama ng mas mahusay kaysa sa mga pasyente sa control group. Bilang karagdagan, 5 sa 33 mga pasyente ay bumuo ng patuloy na dyskinesia 2 taon pagkatapos ng paglipat ng embryonic nerve tissue, na wala sa mga pasyente sa control group (Stem cells: siyentipikong pag-unlad at mga direksyon sa pananaliksik sa hinaharap. Nat. Inst, ng Health. USA). Ang isa sa mga hindi nalutas na problema ng klinikal na pananaliksik ng mga neural stem cell ng utak ay nananatiling pagsusuri ng mga tunay na prospect at mga limitasyon ng paglipat ng kanilang mga derivatives para sa pagwawasto ng mga karamdaman sa CNS. Posible na ang neuronogenesis sa hippocampus na sapilitan ng matagal na aktibidad ng pag-agaw, na humahantong sa istruktura at functional na muling pag-aayos nito, ay maaaring maging isang kadahilanan sa progresibong pag-unlad ng epilepsy. Ang konklusyon na ito ay nararapat na espesyal na pansin, dahil ito ay tumutukoy sa mga posibleng negatibong kahihinatnan ng pagbuo ng mga bagong neuron sa mature na utak at ang pagbuo ng mga aberrant na synaptic na koneksyon sa pamamagitan ng mga ito.

Hindi dapat kalimutan na ang paglilinang sa media na may mga cytokine (mitogens) ay nagdudulot ng mga katangian ng mga stem cell na mas malapit sa mga selula ng tumor, dahil ang mga katulad na pagbabago sa regulasyon ng mga siklo ng cell ay nangyayari sa kanila, na tinutukoy ang kakayahan para sa walang limitasyong paghahati. Walang ingat ang paglipat ng mga maagang derivatives ng mga embryonic stem cell sa isang tao, dahil sa kasong ito ang banta ng pagbuo ng mga malignant neoplasms ay napakataas. Ito ay mas ligtas na gamitin ang kanilang mas nakatuon na progeny, iyon ay, precursor cells ng differentiated lines. Gayunpaman, sa kasalukuyan, ang isang maaasahang pamamaraan para sa pagkuha ng mga matatag na linya ng mga selula ng tao na naiiba sa nais na direksyon ay hindi pa nabuo.

Ang paggamit ng mga teknolohiya ng molecular biology para sa pagwawasto ng namamana na patolohiya at mga sakit ng tao sa pamamagitan ng pagbabago ng mga stem cell ay may malaking interes sa praktikal na gamot. Ang mga tampok ng stem cell genome ay ginagawang posible na bumuo ng mga natatanging pamamaraan ng paglipat upang itama ang mga genetic na sakit. Gayunpaman, mayroong ilang mga limitasyon sa lugar na ito na kailangang malampasan bago ang praktikal na aplikasyon ng stem cell genetic engineering. Una sa lahat, ito ay kinakailangan upang i-optimize ang proseso ng ex vivo stem cell genome modification. Alam na ang pangmatagalang (3-4 na linggo) na paglaganap ng mga stem cell ay nagpapababa ng kanilang paglipat, kaya maraming mga siklo ng paglipat ay kinakailangan upang makamit ang isang mataas na antas ng kanilang genetic modification. Gayunpaman, ang pangunahing problema ay nauugnay sa tagal ng therapeutic gene expression. Hanggang ngayon, sa walang pag-aaral ay lumampas sa apat na buwan ang panahon ng epektibong pagpapahayag pagkatapos ng paglipat ng mga binagong selula. Sa 100% ng mga kaso, sa paglipas ng panahon, bumababa ang pagpapahayag ng mga inilipat na gene dahil sa hindi aktibo ng mga promotor at/o pagkamatay ng mga cell na may binagong genome.

Ang isang mahalagang isyu ay ang gastos ng paggamit ng mga teknolohiya ng cell sa medisina. Halimbawa, ang tinantyang taunang pangangailangan na tustusan lamang ang mga medikal na gastos ng isang bone marrow transplant unit na idinisenyo upang magsagawa ng 50 transplant bawat taon ay humigit-kumulang US$900,000.

Ang pagbuo ng mga teknolohiya ng cell sa klinikal na gamot ay isang masalimuot at multi-stage na proseso na nagsasangkot ng nakabubuo na kooperasyon sa pagitan ng multidisciplinary na pang-agham at klinikal na sentro at ng internasyonal na komunidad. Kasabay nito, ang mga isyu ng siyentipikong organisasyon ng pananaliksik sa larangan ng cell therapy ay nangangailangan ng espesyal na pansin. Ang pinakamahalaga sa kanila ay ang pagbuo ng mga protocol ng klinikal na pananaliksik, kontrol sa pagiging maaasahan ng klinikal na data, ang pagbuo ng isang pambansang rehistro ng mga pag-aaral, pagsasama sa mga internasyonal na programa ng multicenter na klinikal na pag-aaral at ang pagpapatupad ng mga resulta sa klinikal na kasanayan.

Sa pagtatapos ng pagpapakilala sa mga problema ng cell transplantology, nais kong ipahayag ang pag-asa na ang pag-iisa ng mga pagsisikap ng nangungunang mga espesyalista sa Ukraine mula sa iba't ibang larangan ng agham ay magsisiguro ng makabuluhang pag-unlad sa eksperimental at klinikal na pananaliksik at gagawing posible sa mga darating na taon upang makahanap ng mga epektibong paraan upang magbigay ng tulong sa mga taong may malubhang karamdaman na nangangailangan ng organ, tissue at cell transplant.

[ 13 ], [ 14 ], [ 15 ], [ 16 ], [ 17 ], [ 18 ]