Confocal mikroskopya

Ang confocal microscopy ay itinuturing na isa sa mga pinaka-promising pamamaraan ng imaging sa balat sa vivo, at samakatuwid interes sa mga ito sa parehong mga clinicians at sa mga kinatawan ng mga siyentipikong pananaliksik institutes ay hindi karaniwang mataas.

[1], [2], [3], [4]

Mga kakayahan ng confocal microscopy

Sa dermatology, confocal laser microscopy ay ginagamit para sa:

• pag-aralan ang pagtagos ng mga compounds sa balat (pagtagos pathways, kinetics, pamamahagi sa balat);
• pagmamasid ng mga glandula (kahulugan ng aktibo at pasibo estado);
• pag-aaral ng microcirculatory bed (kasama sa real time);
• diyagnosis ng neoplasms.

Nang walang tinatalakay ang mga merito at demerits ng mga iba't ibang uri ng confocal microscopy, tandaan namin na sa kamakailan-lamang na taon, ang pag-iilaw laser confocal mikroskopya ay nakakuha ng pagtaas ng katanyagan.

[5], [6], [7],

Confocal microscopy para sa pagsusuri ng balat

Confocal mikroskopya ay nagbibigay ng dalawang napakahalaga pagkakataon - pag-aaral ng tisiyu sa cellular antas sa isang estado ng physiological buhay at demonstrasyon ng mga resulta ng pananaliksik (ibig sabihin, ang cellular aktibidad ..) Sa apat na sukat - taas, lapad, lalim at oras. Para sa kalidad ng imahe at lalim ng pag-aaral, ang pinakamahalagang papel ay nilalaro sa pamamagitan ng kakayahan ng tisyu na magpadala ng liwanag, sa ibang salita, ang transparency nito. Ang paraan ng confocal microscopy ay di-contact, ang ray ng liwanag ay hindi nagiging sanhi ng anumang pinsala o kakulangan sa ginhawa sa pasyente o pang-eksperimentong hayop.

Upang pag-aralan ang balat, ginagamit ang confocal scan laser microscopy (CSLM). Ang pamamaraan ay nagbibigay-daan sa iyo upang makita ang epidermis at papillary dermis layer na may isang resolution na malapit sa histological. Ang lahat ng mga resulta ng survey ay ipinapakita sa monitor at mai-save bilang isang pakete ng mga file ng imahe (sa anyo ng isang microfilm (sa dynamics) o microphotographs).

Mayroong dalawang uri ng pamamaraan:

• Reflective (reflectance CSLM) - ay batay sa katotohanan na ang iba't ibang mga intracellular at intercellular na mga istraktura ay may iba't ibang indeks ng repraksyon ng liwanag, na nagpapahintulot upang makakuha ng isang kaibahan na imahe.
• Fluorescent (pag-ilaw CSLM) - ay gumagamit ng isang laser ilaw penetrates ang balat at stimulating ito o exo endohromofory tumugon magsimulang naglalabas ng photons (ie fluoresce ..).

Ang lateral resolution ay ang pinakamaliit na distansya sa pagitan ng mga punto na matatagpuan sa pahalang na eroplano, i.e. Isang eroplanong parallel sa ibabaw ng balat. Ang ehe ng resolusyon ay ang pinakamaliit na distansya sa pagitan ng mga punto na matatagpuan sa isang patag na patayo sa ibabaw ng balat.

[8], [9], [10], [11], [12], [13], [14], [15]

Ang kasaysayan ng confocal microscopy

Ang ideya ng paglikha ng isang mikroskopyo na may kakayahan sa antas ng cellular upang ipakita ang intravital cut ng living tissue ay aktibong binuo 130 taon na ang nakakaraan. Ang pangunahing elemento ng mga modernong microscopes ay dinisenyo sa dulo ng siglo XIX at isang umiikot na disk na may pinakamaliit na butas na matatagpuan sa espirituwal. Ang disc na ito ay naimbento noong 1883 ng isang mag-aaral na Aleman na si Paul Nipkov, sa karangalan kung saan natanggap niya ang kanyang pangalan - ang Nipkov disk (o nipkov disk). Ang imbensyon ay batay sa kakayahan ng ilaw, na dumadaan sa pinakamaliit na mga butas sa disk at ang magnifying lens, upang tumagos sa kalaliman ng tissue at maipaliwanag ang fragment ng cell sa layo mula sa ibabaw. Kapag mabilis na umiikot ang disc, ang mga fragment ay idinagdag sa pangkalahatang larawan. Sa pamamagitan ng pag-alis o pagtatantya sa istraktura sa bagay, ang lalim ng optical seksyon ng tissue na sinusuri ay maaaring iba-iba.

Sa pagdating ng VTRs noong dekada 1980 at mga computer na may kakayahang magproseso ng mga imahe, noong maagang bahagi ng 1990s nagkaroon ng tunay na pagkakataon na lumikha at epektibong magamit ang mga modernong microscope na ginagamit sa ating panahon.