Confocal microscopy

Ang confocal microscopy ay kasalukuyang itinuturing na isa sa mga pinaka-promising na pamamaraan para sa in vivo skin imaging, kaya naman ang interes dito ay hindi pangkaraniwang mataas sa parehong mga clinician at kinatawan ng mga institute ng pananaliksik.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ]

Mga Kakayahang Confocal Microscopy

Sa dermatology, ang confocal laser microscopy ay ginagamit para sa:

• pag-aaral ng pagtagos ng mga compound sa balat (mga landas ng pagtagos, kinetics, pamamahagi sa balat);
• pagmamasid sa paggana ng mga glandula (pagpapasiya ng aktibo at passive na estado);
• pag-aaral ng microcirculatory bed (kabilang ang real time);
• diagnostic ng neoplasms.

Nang hindi tinatalakay ang mga pakinabang at disadvantages ng nabanggit na mga uri ng confocal microscopy, napapansin namin na sa mga nakaraang taon, ang fluorescence laser confocal microscopy ay naging lalong popular.

[ 5 ], [ 6 ], [ 7 ]

Confocal microscopy para sa pagsusuri sa balat

Ang confocal microscope ay nagbibigay ng dalawang napakahalagang pagkakataon - ang pag-aaral ng mga tisyu sa antas ng cellular sa isang estado ng physiological vital na aktibidad at ang pagpapakita ng mga resulta ng pag-aaral (ibig sabihin, cellular activity) sa apat na dimensyon - taas, lapad, lalim at oras. Para sa kalidad ng imahe at lalim ng pag-aaral, ang pinakamahalagang papel ay ginagampanan ng kakayahan ng tissue na magpadala ng liwanag, sa madaling salita, ang transparency nito. Ang paraan ng confocal microscopy ay contactless, ang light beam ay hindi nagdudulot ng anumang pinsala o kakulangan sa ginhawa sa pasyenteng sinusuri o sa eksperimentong hayop.

Ang confocal scanning laser microscopy (CSLM) ay ginagamit upang suriin ang balat. Ang pamamaraan ay nagpapahintulot sa isa na makita ang epidermis at ang papillary layer ng dermis na may resolusyon na malapit sa histological. Ang lahat ng mga resulta ng pagsusuri ay ipinapakita sa monitor at nai-save bilang isang pakete ng mga file ng imahe (bilang isang microfilm (sa dynamics) o microphotographs).

Mayroong dalawang uri ng pamamaraan:

• reflective (reflectance CSLM) - batay sa katotohanan na ang iba't ibang intracellular at intercellular na istruktura ay may iba't ibang mga refractive index ng liwanag, na nagpapahintulot sa pagkuha ng isang contrast na imahe.
• fluorescence (fluorescence CSLM) - gumagamit ng laser light na tumatagos sa balat at nagpapasigla sa mga exo- o endochromophores dito, na bilang tugon ay nagsisimulang maglabas ng mga photon (ie fluoresce).

Ang lateral na resolusyon ay ang pinakamababang distansya sa pagitan ng mga puntong matatagpuan sa isang pahalang na eroplano, ibig sabihin, isang eroplanong parallel sa ibabaw ng balat. Ang axial resolution ay ang pinakamababang distansya sa pagitan ng mga puntong matatagpuan sa isang eroplanong patayo sa ibabaw ng balat.

[ 8 ], [ 9 ], [ 10 ], [ 11 ], [ 12 ], [ 13 ], [ 14 ]

Kasaysayan ng confocal microscopy

Ang ideya ng paglikha ng isang mikroskopyo na may kakayahang magpakita ng isang seksyon ng buhay na tisyu sa antas ng cellular ay aktibong binuo 130 taon na ang nakakaraan. Ang pangunahing elemento ng modernong mikroskopyo ay idinisenyo sa pagtatapos ng ika-19 na siglo at isang umiikot na disk na may maliliit na butas na nakaayos sa isang spiral. Ang disk na ito ay naimbento noong 1883 ng isang Aleman na estudyante na si Paul Nipkow, kung saan pinangalanan ito - ang Nipkow disk (o Nipkow disk). Ang pag-imbento ay batay sa kakayahan ng liwanag, na dumadaan sa maliliit na butas sa disk at isang magnifying lens, upang tumagos nang malalim sa tissue at maipaliwanag ang isang cell fragment sa layo mula sa ibabaw. Kapag mabilis na umiikot ang disk, ang mga fragment ay bumubuo ng isang larawan. Sa pamamagitan ng paglipat ng istraktura palayo o mas malapit sa bagay, posibleng pag-iba-iba ang lalim ng optical section ng tissue na pinag-aaralan.

Sa pagdating lamang ng mga video recorder noong 1980s at mga computer na may kakayahang magproseso ng mga imahe noong unang bahagi ng 1990s naging posible na lumikha at epektibong gumamit ng mga modernong mikroskopyo na ginagamit ngayon.