Immunophenotyping ng hemoblastoses

Ang makabuluhang pag-unlad sa hematological na pananaliksik sa mga nakaraang taon ay nauugnay sa paggamit ng mga modernong immunological na pamamaraan at automated na paraan ng pagsusuri at pag-uuri ng peripheral blood at bone marrow cells - flow cytometers. Ang mga tradisyonal na morphological at cytochemical na pag-aaral ng mga cell substrate ng sakit (dugo, red bone marrow, lymph node, spleen, atbp.) Sa maraming mga kaso, lalo na sa mga lymphoproliferative na sakit, ay hindi nagpapahintulot sa amin na kilalanin ang buong iba't ibang mga variant sa mga morphologically na katulad na mga form at itatag ang pinagmulan ng pinagmulan ng pathological clone. Ang mga problemang ito ay malulutas lamang sa pamamagitan ng pag-aaral ng mga katangian ng immunological ng mga selula. Ang bawat yugto ng pagkita ng kaibhan ng mga selula ng hematopoietic ay tumutugma sa sarili nitong hanay ng mga antigens, na ayon sa internasyonal na pag-uuri ay tinatawag na pagkita ng kaibhan at nahahati sa mga kumpol ng pagkita ng kaibhan, itinalagang CD.

Sa mga neoplastic na pagbabago, ang isang bloke ng pagkita ng kaibhan ay maaaring mangyari sa anumang yugto ng normal na pag-unlad ng cell, na nagreresulta sa pagbuo ng isang clone ng mga pathological cell na tumutukoy sa substrate ng sakit at may parehong mga katangian ng immunological (o phenotypic). Sa pamamagitan ng pagsasagawa ng mga pag-aaral ng mga marker na ito sa mga cell, posible na matukoy kung anong anyo at variant ng sakit ang tumutugma sa kanila, iyon ay, batay sa immunological phenotype ng mga cell, upang magsagawa ng differential diagnostics, na pinakamahirap sa mga lymphoproliferative na sakit, dahil ang pangunahing cell ng pathological substrate ng sakit ay morphologically halos magkaparehong mga cell.

Binibigyang-daan ng phenotyping ang paggamit ng mga monoclonal antibodies na mag-type ng blast at mature na mga selula ng dugo ng myelo-, mono-, lymphocytic series sa pamamagitan ng pagkakaroon ng differentiation antigens (receptors) sa cell wall. Ang seksyon na "Pagsusuri ng immune status ng katawan" ay bahagyang naglalarawan ng mga katangian at diagnostic na halaga ng pag-aaral ng mga cellular marker; sa ibaba ay isang maikling paglalarawan ng mga antigen marker ng mga cell na may kaugnayan sa diagnosis ng hemoblastoses. Ang mga sumusunod na antigens (marker) ay maaaring makita sa mga lamad ng mga selula ng dugo at pulang buto sa utak.

• Ang CD2 ay isang monomeric transmembrane glycoprotein. Ito ay naroroon sa ibabaw ng lahat ng T-lymphocytes na nagpapalipat-lipat sa dugo at sa ilang NK-lymphocytes. Ang CD2 ay kasangkot sa proseso ng alternatibong pag-activate ng T-lymphocytes. Ang pagtuklas ng CD2 gamit ang monoclonal antibodies sa klinikal na kasanayan ay ginagamit para sa phenotyping acute T-cell leukemia, lymphomas, talamak na nagpapasiklab at mga kondisyon ng immunodeficiency.
• Ang CD3 ay isang protina complex na nauugnay sa antigen-specific T-cell receptor, ito ang pangunahing functional marker ng T-lymphocytes. Pinapadali nito ang paglipat ng signal ng activation mula sa lamad patungo sa cell cytoplasm. Ang pagpapasiya ng CD3 ay ipinahiwatig para sa diagnosis ng talamak na T-cell leukemia, lymphomas (CD3 ay hindi ipinahayag sa non-T-cell lymphoid neoplasms) at mga sakit na immunodeficiency.
• Ang CD4 ay isang transmembrane glycoprotein na ipinahayag ng isang subpopulasyon ng T-helpers (inducers), na bumubuo ng 45% ng peripheral blood lymphocytes. Sa mga unang yugto ng pag-unlad ng lymphocyte sa thymus, ang CD4 antigens, pati na rin ang CD8, ay ipinahayag ng lahat ng cortical lymphocytes. Ang mga medullary thymocytes, na ang phenotype ay katulad ng mga mature na CD4+ T-cells ng peripheral blood (T-helpers), ay nagpapahayag na ng CD4 o CD8 receptors. Sa peripheral blood, hanggang 5% ng mga cell ang nagdadala ng parehong CD4 at CD8 marker. Ang menor de edad na pagpapahayag ng CD4 ay posible sa ilang mga cell ng monocytic series. Ang CD4 ay ipinahayag sa karamihan ng mga kaso ng T-cell lymphomas, kabilang ang mycosis fungoides, pati na rin sa HTLV-associated T-cell leukemia (HTLV - human T-lymphotropic virus).
• Ang CD5 ay isang single-chain glycoprotein na naroroon sa lahat ng mature na T lymphocytes at karamihan sa mga thymocytes, at mahinang ipinahayag ng B lymphocytes. Ang CD5 ay nakita sa mga neoplastic na selula ng B-cell na talamak na lymphocytic leukemia at centrocytic lymphoma. Sa iba pang mga uri ng malignant lymphoid disease - follicular lymphoma, hairy cell leukemia, large cell lymphoma - CD5 ay hindi ipinahayag.
• Ang CD7 ay isang single-chain protein, ang pinakamaagang marker ng T-cell differentiation. Ito ay ipinahayag ng mga pro-T-lymphocytes bago pa man ang kanilang paglipat sa thymus. Ang CD7 ay napansin sa karamihan ng mga selula ng NK, ang mahinang pagpapahayag ay nabanggit sa mga monocytes. Ang B-lymphocytes at granulocytes ay hindi naglalaman ng antigen na ito. Ang pagpapasiya ng CD7 ay ginagamit upang masuri ang mga lymphoma, T-cell lymphoblastic leukemia ng pagkabata.
• Ang CD8 ay isang protina na binubuo ng dalawang polypeptide chain na naka-link ng disulfide bridges. Ito ay ipinahayag ng isang subpopulasyon ng cytotoxic at suppressor T lymphocytes, na bumubuo sa 20-35% ng peripheral blood lymphocytes. Ang antigen na ito ay ipinahayag din ng NK lymphocytes, cortical thymocytes, 30% ng medullary thymocytes, at isang subpopulasyon ng red bone marrow cells. Ang CD8 ay pinag-aralan upang mabilang ang nilalaman ng mga T suppressor (tingnan ang seksyong "Suppressor T lymphocytes sa dugo" sa itaas).

• Ang CD10 ay isang endopeptidase na nauugnay sa cell membrane. Ang CD10 ay ipinahayag ng mga batang anyo ng B lymphocytes at isang subpopulasyon ng cortical lymphocytes. Ang CD10 ay ipinahayag ng lahat ng mga cell.
• Ang CD11c ay ipinahayag sa cell membrane ng mga macrophage, monocytes, granulocytes, NK cells at hairy cell leukemia cells.
• Ang CD13 ay isang glycoprotein na ipinahayag ng mga cell ng myelomonocytic lineage (progenitor cells, neutrophils, basophils, eosinophils, monocytes, at myeloid leukemia cells). Wala ito sa T at B lymphocytes, erythrocytes, at platelets.
• Ang CD14 ay isang surface membrane glycoprotein. Ito ay pangunahing ipinahayag ng mga monocytes at macrophage. Ang CD14 ay nakita sa higit sa 95% ng mga monocytes sa peripheral blood at bone marrow. Ang malakas na pagpapahayag ng CD14 ay sinusunod sa talamak na myeloblastic leukemia. Ang antigen na ito ay hindi ipinahayag sa talamak at talamak na lymphoblastic leukemia.
• Ang CD15 ay isang oligosaccharide. Ito ay kasangkot sa phagocytosis at chemotaxis. Ang antigen na ito ay naroroon sa ibabaw ng mature granulocytes at Berezovsky-Sternberg cells. Ang pagpapahayag ng CD15 antigen ay nakita sa sakit na Hodgkin. Sa non-Hodgkin's lymphomas, ang CD15 ay hindi nakikita sa karamihan ng mga kaso.
• Ang CD16 ay ipinahayag sa ibabaw ng granulocytes, monocytes, macrophage at NK cells. Ang lahat ng mga lymphocytes na nagpapahayag ng antigen na ito ay may kapasidad para sa cellular cytotoxicity na umaasa sa antibody. Ang CD16 ay tinutukoy sa panahon ng pag-type ng mga talamak na myelocytic leukemias, upang makilala ang mga NK cells.
• Ang CD19 ay isang glycoprotein na nasa lahat ng peripheral B lymphocytes at lahat ng B-cell precursors. Wala ito sa mga selula ng plasma. Ito ang pinakamaagang marker ng B cells at gumaganap ng mahalagang papel sa pag-regulate ng B-cell activation at proliferation. Ang CD19 ay ipinahayag sa lahat ng neoplastic cells ng acute leukemia ng B-cell na pinagmulan at naroroon din sa ilang mga anyo ng acute monoblastic leukemia.
• Ang CD20 ay isang nonglycosylated protein. Sa ontogenesis ng B-lymphocytes, ang CD20 antigen ay lilitaw pagkatapos ng CD19 sa yugto ng pre-B-cell na pagkita ng kaibahan ng mga lymphocytes. Wala ito sa lamad ng plasma ng mga selula ng plasma. Ito ay ipinahayag sa LAHAT, B-cell chronic lymphocytic leukemia, hairy cell leukemia, Burkitt's lymphoma at napakabihirang sa acute monoblastic leukemia.
• Ang CD21 ay isang glycoprotein na nasa malalaking halaga sa B-lymphocytes sa mga lymphoid organ at sa maliit na halaga sa mga B-cell sa peripheral na dugo. Ang CD21 ay isang receptor para sa Epstein-Barr virus.
• Ang CD22 ay isang protina na binubuo ng dalawang polypeptide chain. Ito ay ipinahayag sa lamad ng karamihan sa mga B lymphocytes, kabilang ang mga precursor cell (prolymphocytes). Ang antigen ay hindi ipinahayag sa B lymphocytes (plasma cells) pagkatapos ng kanilang pag-activate. Ang pinaka-binibigkas na expression ng CD22 ay nakita sa mga cell sa hairy cell leukemia, mahina - sa myeloid leukemia at non-T-cell ALL.
• Ang CD23 ay isang glycoprotein na ipinahayag sa mas mataas na lawak ng activated peripheral blood B lymphocytes. Ang CD23 ay namamagitan sa IgE-dependent cytotoxicity at phagocytosis ng macrophage at eosinophils.
• Ang CD25 ay isang single-chain glycoprotein na kinilala bilang isang low-affinity receptor para sa IL-2. Ang receptor na ito ay ipinahayag sa activated T lymphocytes at, sa isang mas mababang density, sa activated B cells. Sa paligid ng dugo ng malulusog na indibidwal, ang antigen ay naroroon sa higit sa 5% ng mga lymphoid cells.
• Ang CD29 ay isang fibronectin receptor. Ito ay malawak na ipinamamahagi sa mga tisyu at ipinahayag ng mga leukocytes. Ginagamit ang pagtuklas ng CD29 sa mga peripheral blood cell upang mag-type ng subpopulasyon ng mga T cells na may CD4+CD29+ phenotype, na tinatawag na type 2 helpers (Th2). Ang mga cell na ito ay nakikilahok sa humoral immune response sa pamamagitan ng paggawa ng mga lymphokines.
• Ang CD33 ay isang transmembrane glycoprotein. Ito ay naroroon sa ibabaw ng mga selula ng myeloid at monocytic series. Ito ay matatagpuan sa ibabaw ng mga monocytes at, sa isang mas mababang lawak, granulocytes sa peripheral blood. Humigit-kumulang 30% ng mga red bone marrow cell ang nagpapahayag ng CD33, kabilang ang mga myeloblast, promyelocytes, at myelocytes. Ang antigen ay wala sa mga lamad ng pluripotent stem cells. Ang pagpapasiya ng CD33 ay ginagamit upang makilala ang mga selula sa leukemias na myeloid na pinagmulan. Ang mga selula ng leukemia na pinagmulan ng lymphoid at erythroid ay hindi nagpapahayag ng CD33.
• Ang CD34 ay isang phosphoglycoprotein na ipinahayag ng hematopoietic progenitor cells, kabilang ang mga monopotent stem cell. Ang pinaka-binibigkas na pagpapahayag ng Ag ay sinusunod sa maagang mga ninuno; habang tumatanda ang mga selula, bumababa ang ekspresyon ng marker. Ang CD34 ay matatagpuan din sa mga endothelial cells. Ang pagpapasiya ng CD34 ay ginagamit upang makilala ang mga selula sa talamak na myeloblastic at lymphoblastic leukemias. Sa talamak na lymphocytic leukemias at lymphomas, ang CD34 antigen expression ay hindi nakita.

• Ang CD41a ay ipinahayag ng mga platelet at megakaryocytes. Ang mga monoclonal antibodies upang makita ang CD41a ay ginagamit upang masuri ang megakaryoblastic leukemia. Sa thrombasthenia ni Glanzmann, ang pagpapahayag ng antigen na ito ay wala o makabuluhang pinigilan.
• Ang CD42b ay isang lamad glycoprotein na binubuo ng dalawang polypeptide chain. Ang marker ay nakita sa ibabaw ng mga platelet at megakaryocytes. Sa klinikal na kasanayan, ang pagtuklas ng CD42b ay ginagamit upang masuri ang thrombocytopathy - Bernard-Soulier syndrome.
• Ang CD45RA ay kabilang sa klase ng transmembrane glycoproteins. Ito ay isang karaniwang leukocyte antigen. Ito ay ipinahayag sa cell lamad ng B lymphocytes, sa isang mas mababang lawak T lymphocytes at sa mature medullary thymocytes. Ang marker ay hindi ipinahayag ng granulocytes.
• Ang CD45RO ay isang low-molecular isoform ng CD45RA, isang karaniwang leukocyte antigen. Nakikita ito sa mga T cells (memory T lymphocytes), isang subpopulasyon ng B lymphocytes, monocytes, at macrophage. Ang mga monoclonal antibodies sa CD45RO ay nakikipag-ugnayan sa karamihan ng mga thymocytes, isang subpopulasyon ng mga nagpapahingang CD4+ at CD8+ T lymphocytes, at mga mature activated T cells. Ang mga cell ng myelomonocytic na pinagmulan, granulocytes, at monocytes ay nagdadala din ng antigen na ito. Ito ay nakita sa centroblastic at immunoblastic lymphomas.
• Ang CD46 ay isang O-glycosylated dimer. Ito ay malawak na ipinamamahagi sa mga tisyu at ipinahayag ng T at B lymphocytes, monocytes, granulocytes, NK cells, platelets, endothelial cells, fibroblasts, ngunit wala sa ibabaw ng mga pulang selula ng dugo. Nagbibigay ang CD46 ng proteksyon sa tissue mula sa complement.
• Ang CD61 ay isang platelet antigen. Ito ay ipinahayag sa mga platelet ng peripheral blood at red bone marrow, pati na rin sa megakaryocytes at megakaryoblasts. Ang pagpapasiya nito ay ginagamit bilang isang marker sa talamak na megakaryoblastic leukemia. Ang ekspresyon ng antigen ay wala o pinigilan sa mga pasyente na may Glanzmann's thrombasthenia.
• Ang CD95, na tinatawag ding Fas o APO-1, ay isang transmembrane glycoprotein, isang miyembro ng tumor necrosis factor receptor na pamilya. Ito ay ipinahayag sa makabuluhang halaga sa T lymphocytes (CD4+ at CD8+) sa peripheral blood at, sa mas mababang lawak, sa B lymphocytes at NK cells. Ang antigen na ito ay ipinahayag din sa granulocytes, monocytes, tissue cells, at neoplastic cells. Ang pagbubuklod ng CD95 sa Fas ligand (CD95L) ay nagpapahiwatig ng apoptosis sa mga cell.
• Ang CD95L, o Fas ligand, ay isang lamad na protina na kabilang sa tumor necrosis factor receptor na pamilya. Ang antigen na ito ay ipinahayag ng mga cytotoxic T lymphocytes, NK cells, at kadalasang tumor cells; ito ang pangunahing inducer ng apoptosis sa mga selula.
• Ang HLA-DR ay isang monomorphic determinant ng class II molecules ng human major histocompatibility complex (HLA). Ang marker ay ipinahayag sa Langerhans cells, dendritic cells ng lymphoid organs, ilang uri ng macrophage, B lymphocytes, activated T cells at thymic epithelial cells. Ang pag-aaral ng marker na ito ay ginagamit para sa quantitative determination ng activated T lymphocytes na may CD3+ HLA-DR+ phenotype.

Gamit ang ibang seleksyon ng mga monoclonal antibodies sa mga marker, posible na lumikha ng isang phenotypic na larawan ng mga cell na katangian ng isang naibigay na anyo ng leukemia.

Bilang karagdagan sa paggamit ng mga immunophenotyping na pamamaraan para sa mga diagnostic at differential diagnostics ng hemoblastoses, ang kanilang paggamit sa proseso ng paggamot upang masuri ang estado ng pagpapatawad at ang natitirang populasyon ng mga leukemic cell ay napatunayang napakahalaga. Alam ang phenotypic na "portrait" ng mga blast cell sa panahon ng diagnosis, ginagawang posible ng mga marker na ito na makita ang mga cell ng leukemic clone sa panahon ng remission, at sa pamamagitan ng pagtaas ng kanilang bilang - upang mahulaan ang pag-unlad ng isang pagbabalik sa dati (1-4 na buwan) ang hitsura ng mga klinikal at morphological na mga palatandaan nito.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ]