Medikal na dalubhasa ng artikulo
Mga bagong publikasyon
Polymerase chain reaction (PCR) sa pagsusuri ng mga nakakahawang sakit
Huling nasuri: 05.07.2025
Ang lahat ng nilalaman ng iLive ay medikal na nasuri o naka-check ang katotohanan upang masiguro ang mas tumpak na katumpakan hangga't maaari.
Mayroon kaming mahigpit na mga panuntunan sa pag-uukulan at nag-uugnay lamang sa mga kagalang-galang na mga site ng media, mga institusyong pang-akademikong pananaliksik at, hangga't maaari, ang mga pag-aaral ng medikal na pag-aaral. Tandaan na ang mga numero sa panaklong ([1], [2], atbp) ay maaaring i-click na mga link sa mga pag-aaral na ito.
Kung sa tingin mo na ang alinman sa aming nilalaman ay hindi tumpak, hindi napapanahon, o kung hindi pinag-uusapan, mangyaring piliin ito at pindutin ang Ctrl + Enter.
Ang PCR ay isa sa mga pamamaraan ng diagnostic ng DNA na nagbibigay-daan sa pagtaas ng bilang ng mga kopya ng nakitang seksyon ng genome (DNA) ng bakterya o mga virus ng milyun-milyong beses gamit ang enzyme DNA polymerase. Ang nasubok na seksyon ng nucleic acid na partikular sa isang partikular na genome ay pinarami (pinalakas) nang maraming beses, na nagpapahintulot na ito ay makilala. Una, ang molekula ng DNA ng bakterya o mga virus ay nahahati sa dalawang chain sa pamamagitan ng pag-init, pagkatapos ay sa pagkakaroon ng synthesized DNA primers (ang nucleotide sequence ay tiyak sa genome na tinutukoy), sila ay nagbubuklod sa mga pantulong na seksyon ng DNA, at ang pangalawang kadena ng nucleic acid ay na-synthesize pagkatapos ng bawat primer sa pagkakaroon ng thermostable DNA polymerase. Dalawang molekula ng DNA ang nakuha. Ang proseso ay paulit-ulit nang maraming beses. Ang isang molekula ng DNA, ibig sabihin, isang bacterium o particle ng virus, ay sapat na para sa mga diagnostic. Ang pagpapakilala ng karagdagang yugto sa reaksyon - DNA synthesis sa isang RNA molecule gamit ang enzyme reverse transcriptase - naging posible na subukan ang mga RNA virus, tulad ng HCV virus. Ang PCR ay isang tatlong yugto na proseso na paulit-ulit na paikot: denaturation, primer annealing, DNA synthesis (polymerization). Ang synthesized na halaga ng DNA ay kinilala ng ELISA o electrophoresis.
Maaaring gumamit ang PCR ng iba't ibang biological na materyales - blood serum o plasma, urethral scraping, biopsy, pleural fluid, cerebrospinal fluid, atbp. Pangunahing ginagamit ang PCR upang masuri ang mga nakakahawang sakit tulad ng viral hepatitis B, viral hepatitis C, viral hepatitis D, CMV infection, sexually transmitted infections (gonorrhea, chlamydia, mycoplasma, impeksyon sa HIV), atbp.
Ang bentahe ng PCR sa pag-diagnose ng mga nakakahawang sakit sa iba pang mga pamamaraan ng pananaliksik ay ang mga sumusunod:
- ang nakakahawang ahente ay maaaring makita sa anumang biological na kapaligiran ng katawan, kabilang ang materyal na nakuha sa panahon ng biopsy;
- posible na masuri ang mga nakakahawang sakit sa pinakamaagang yugto ng sakit;
- posibleng suriin sa dami ang mga resulta ng pananaliksik (kung gaano karaming mga virus o bakterya ang nilalaman sa materyal na pinag-aaralan);
- mataas na sensitivity ng pamamaraan; halimbawa, ang sensitivity ng PCR para sa pagtuklas ng hepatitis B virus DNA sa dugo ay 0.001 pg/ml (humigit-kumulang 4×10 2 copies/ml), habang ang sensitivity ng DNA hybridization method gamit ang branched probes ay 2.1 pg/ml (humigit-kumulang 7×10 5 copies/ml).
[