Polymerase chain reaction (PCR) sa diagnosis ng mga nakakahawang sakit

PCR - isa sa mga pamamaraan para sa DNA diagnostic na nagbibigay-daan upang madagdagan ang bilang ng mga kopya ng isang detectable na bahagi ng genome (DNA) ng bakterya o virus ay isang milyong beses gamit ang isang DNA polymerase enzyme. Ang segment ng nucleic acid na nasubukan para sa isang binigay na genome ay pinararami (amplified) ng maraming beses, na nagpapahintulot na makilala ito. Una, isang DNA Molekyul ng mga bakterya o virus sa pamamagitan ng heating nahahati sa dalawang kadena, at pagkatapos ay sa pagkakaroon ng na-synthesize DNA primers (pagkakasunod-sunod ng nucleotides partikular sa tinukoy genomic) ay nagbubuklod sa kanila na may komplimentaryong umaabot ng DNA, na-synthesize ang ikalawang sumadsad ng nucleic acid pagkatapos ng bawat primer sa presensya ng isang matatag sa init DNA polymerase . Dalawang DNA molekula ang nakuha. Ang proseso ay paulit-ulit nang maraming beses. Para sa pagsusuri, isang molekula ng DNA, iyon ay, isang bakterya o isang viral na butil, ay sapat. Reacting sa isang karagdagang hakbang - ang DNA synthesis sa RNA Molekyul gamit ang enzyme-reverse transcriptase - ay pinapayagan upang subukan ang RNA virus tulad ng HCV virus. Ang PCR ay isang proseso ng tatlong hakbang, paulit-ulit na cyclically: denaturation, primer annealing, DNA synthesis (polimerisasyon). Ang synthesize na halaga ng DNA ay kinilala ng ELISA o ng electrophoresis.

PCR ay maaaring gamitin sa iba't ibang mga biological materyal - suwero o plasma ng dugo, pag-scrape ng yuritra, byopsya, pleural fluid, cerebrospinal fluid, etc. Ang unang PCR ay ginagamit para sa diagnosis ng mga nakakahawang sakit tulad ng viral hepatitis B, viral hepatitis C, viral hepatitis D, CMV impeksiyon, nakakahawang sexually transmitted infection (gonorrhea, basura diynaya, mycoplasma, Ureaplasma infection), tuberculosis, HIV -infeksyon, atbp.

Ang kalamangan ng PCR sa pagsusuri ng mga nakakahawang sakit sa ibang mga pamamaraan ng pananaliksik ay ang mga sumusunod:

• ang causative agent ng impeksyon ay matatagpuan sa anumang biological na kapaligiran ng katawan, kabilang ang materyal na nakuha sa pamamagitan ng biopsy;
• Posible upang masuri ang mga nakakahawang sakit sa pinakamaagang yugto ng sakit;
• Ang isang quantitative evaluation ng mga resulta ng pananaliksik ay posible (kung gaano karaming mga virus o bakterya ay nakapaloob sa materyal sa ilalim ng pagsisiyasat);
• mataas na sensitivity ng paraan; hal, pagiging sensitibo ng PCR para sa pagtuklas ng DNA ng hepatitis B virus sa dugo ay 0001 pg / ml (humigit-kumulang 4 × 10 ² kopya / ML), samantalang ang pagiging sensitibo ng isang paraan DNA paghahalo ng lahi gamit branched probes - 2.1 pg / ml (humigit-kumulang 7 × 10 ⁵ kopya / ml).

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8]