Mga limitasyon, panganib at komplikasyon ng pag-transplant ng cell

Plastic-nagbabagong-buhay gamot ay batay sa pagtupad sa klinika at toti- properties pluripotent embryonic stem at ninuno cell, na nagpapahintulot sa vitro at sa Vivo upang lumikha ng isang paunang-natukoy na mga linya ng cell repopulating nasira tisiyu at organo ng isang tao pasyente.

Ang isang tunay na pagkakataon na nakakagaling na paggamit ng mga embryonic stem cell at stem depinitibo tissue cell (tinatawag na "adult" stem cells - adult stem cells) ang tao ay wala na sa pagdududa. Gayunpaman, inirerekomenda ng mga eksperto sa National and Medical Academies ng Estados Unidos (USA) na ang mga katangian ng mga stem cell sa mga eksperimento ay pinag-aralan nang mas detalyado sa sapat na biological na mga modelo at talaga na suriin ang lahat ng mga kahihinatnan ng paglipat, at pagkatapos ay pagkatapos ay gumamit ng stem cells sa klinika.

Ito ay itinatag na ang mga stem cells ay bahagi ng derivatives ng tissue ng lahat ng tatlong embryonic leaflets. Stem cell ay natagpuan sa retina, cornea, balat, balat, utak ng buto at paligid ng dugo, sa mga sasakyang-dagat, ang mga masa ng mga ngipin, ang mga bato, ang epithelium ng lagay ng pagtunaw, pancreas at atay. Sa tulong ng mga modernong pamamaraan napatunayan na ang stem neural cells ay naisalokal sa utak ng utak at spinal cord. Ang mga kagila-gilalas na mga natuklasan nakahimok ng espesyal na pansin ng mga siyentipiko at ang media, tulad ng neurons sa utak ay isang klasikong halimbawa ng isang static na cell populasyon na hindi na maibabalik. Parehong maaga at late panahon ng ontogenesis dahil sa neural cell stem sa tao at hayop utak nabuo neurons, astrocytes at oligodendrocytes (stem cells: pang-agham na pag-unlad at sa hinaharap na pananaliksik direksyon Nat Inst, of Health USA ..).

Gayunpaman, sa ilalim ng normal na kondisyon, ang plasticity ng mga stem cell ng mga tiyak na tisyu ay hindi lilitaw. Upang mapagtanto ang mga potensyal na plastik ng mga stem cell ng tiyak na tisyu, dapat silang ihiwalay at pagkatapos ay pinag-aralan sa media na may mga cytokine (LIF, EGF, FGF). Bukod dito, ang mga stem cell derivatives ay matagumpay na nakataguyod lamang kapag inilipat sa katawan ng isang hayop na may nalulumbay immune system (γ-pag-iilaw, cytostatics, busulfan, atbp.). Sa ngayon, walang nakakumbinsi na katibayan ng plasticity ng stem cell sa mga hayop na hindi sinanay o kung hindi nakalantad sa malalim na immunosuppression.

Sa ganoong pangyayari, mapanganib potency PGCs ay ipinahayag lalo na sa kanilang ectopic transplantation lugar - subcutaneously ESK immunodeficient daga sa iniksyon site nabuo teratocarcinoma. Higit pa rito, sa panahon ng tao embryonic unlad dalas ng kromosoma abnormalities kaysa sa embryogenesis sa mga hayop. Sa blastocyst stage lamang 20-25% ng mga tao embryo ay binubuo ng mga cell na may isang normal karyotype, at sa napakalaki karamihan ng mga maagang tao embryo nakuha pagkatapos pagpapabunga sa vitro, chromosomal mosaicism napansin may gulo at napaka-madalas na numerical at istruktura aberrations.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7]

Kapaki-pakinabang na epekto ng mga stem cell

Ang mga paunang resulta ng mga klinikal na pagsubok ay nagpapatunay sa kapaki-pakinabang na epekto ng mga selulang stem sa pasyente, ngunit sa ngayon ay walang impormasyon sa pangmatagalang kahihinatnan ng paglipat ng selula. Sa panitikan, sa una dominado ng mga ulat ng mga positibong resulta ng paglipat ng utak ng mga fragment ng embryo sa Parkinson ng sakit, ngunit pagkatapos ay nagsimula na lumitaw ang data sa hindi pagbibigay ng epektibong nakakagaling na mga epekto ng embryonic o pangsanggol neural tissue transplanted sa ang talino ng mga pasyente.

Sa gitna ng XX siglo sa pagpapanumbalik ng hematopoiesis ay unang natuklasan sa lethally irradiated hayop pagkatapos intravenous pagsasalin ng dugo ng mga cell sa utak ng buto, at noong 1969 sa American tagapagpananaliksik D. Thomas ginanap ang unang buto utak transplant tao. Kakulangan ng kaalaman sa mga mekanismo ng immunological hindi pagkakatugma sa utak ng buto donor at recipient habang sanhi ng mataas na dami ng namamatay dahil sa madalas na neprizhivleniya graft at pag-unlad reaction "pangunguwalta kumpara host". Ang pagtuklas ng mga pangunahing histocompatibility complex, kung saan ay binubuo ng mga tao leukocyte antigen (HbA), at pagpapabuti ng mga pamamaraan ng pag-type posible na makabuluhang taasan ang kaligtasan ng buhay rate pagkatapos ng utak ng buto paglipat, na kung saan ay humantong sa laganap sa paraan ng paggamot sa Oncology at Hematology. Isang dekada mamaya, ang unang paglipat ng hematopoietic cell stem (HSCs) ay ginanap, na nakuha mula sa paligid ng dugo sa pamamagitan leukapheresis. Noong 1988 sa France para sa paggamot ng isang bata na may Fanconi anemia bilang isang mapagkukunan ng HSCs ito ay unang ginamit pusod ng dugo, at sa katapusan ng 2000 sa press ay nagsimula na lumitaw tungkol sa kakayahan ng HSCs-iba-ibahin sa mga cell ng iba't-ibang uri ng tissue na potensyal na nagpapalawak sa saklaw ng kanilang mga klinikal na application. Gayunpaman, ang materyal na para sa paglipat, kasama ang GSK, ay naglalaman ng isang malaking halaga ng mga di-hemopoietic cells, na magkakaiba sa kalikasan at ari-arian. Kaugnay nito, ang mga pamamaraan para sa paglilinis ng graft at pamantayan para sa pagtatasa ng cellular na kadalisayan nito ay binuo. Sa partikular, ang paggamit ng positibong immunoselection ng CD34 + cells, na nagpapahintulot sa upang ihiwalay GCW gamit monoclonal antibodies.

[8], [9], [10], [11], [12]

Mga komplikasyon ng stem cell therapy

Komplikasyon ng utak ng buto paglipat ay pinaka-madalas na nauugnay sa hematological at prolonged panahon ng iatrogenic pancytopenia. Ang pinaka-karaniwang impeksiyon ay anemia, anemia at hemorrhages. Sa ganitong koneksyon ito ay napakahalaga kung paano hanapin ang pinakamainam na sampling mode, processing at imbakan ng mga utak ng buto para sa maximum na pangangalaga ng mga cell stem na nagbibigay ng isang mabilis at matatag na pagbawi ng hematopoiesis. Sa characterizing ang graft kinuha upang masuri ang mga sumusunod na parameter na ito ay ngayon: ang bilang ng mononuclear at / o nucleated cell, at kolonya bumubuo ng unit nilalaman SB34-positibong cell. Sa kasamaang palad, ang mga figure na bigyan lamang ng isang di-tuwiran pagtatasa ng aktwal na kakayahan ng hematopoietic stem cell populasyon transplant. Sa kasalukuyan, doon ay ganap na tumpak na mga parameter sa pagtukoy ng pagiging sapat ng nakawan sa gubyerno para sa pang-matagalang pagbawi ng hematopoiesis sa mga pasyente kahit na may autologous buto utak transplant. Ang pag-unlad ng mga karaniwang mga pamantayan ay lubhang mahirap dahil sa kakulangan ng mahigpit na mga pamantayan ng processing, cryopreservation at transplant pagsubok. Bilang karagdagan, ito ay kinakailangan upang isaalang-alang ang pagkakaiba-iba ng mga kadahilanan na impluwensya ang mga parameter ng isang matagumpay na pagbawi ng hematopoiesis sa mga indibidwal na mga pasyente. Sa autologous buto utak transplant pinaka-mahalaga sa mga ito ay ang bilang ng mga paunang regimens, lalo conditioning pamumuhay, ang isang panahon ng sakit, na kung saan ay ginawa sa utak ng buto collection scheme kolonya application stimulating kadahilanan sa posttransplant panahon. Bilang karagdagan, hindi namin dapat kalimutan na ang bago bakod transplant chemotherapy ay maaaring magkaroon ng negatibong epekto sa mga cell sa utak ng buto stem.

Ang insidente ng malubhang nakakalason na komplikasyon ay nagdaragdag nang malaki sa allogeneic bone marrow transplantation. Sa ganitong koneksyon, ang mga statistical data sa transplantation ng allogeneic bone marrow sa thalassemia ay interesado. Sa mga ulat ng European Bone Marrow Transplantation Group, ang tungkol sa 800 transplant sa utak ng buto ay naitala sa mga pasyente na may malalaking thalassemia. Allogeneic paglipat sa thalassemia sa karamihan ng mga kaso ginanap mula sa HLA-magkakahawig na mga kapatid, na kung saan ay nauugnay sa malubhang komplikasyon at mas mataas na dami ng namamatay sa transplantation of stem cell materyal na may kaugnayan bahagyang tugma o nababagay walang-kaugnayang donor. Para mabawasan ang panganib ng malalang nakahahawang komplikasyon, ang mga pasyente ay inilalagay sa mga liblib na aseptiko kahon na may laminar flow, ay mababa o abacterial diyeta. Para sa bacterial decontamination ng bituka sa bawat os ay nagreseta ng mga di-resorptive na mga anyo ng mga antibiotics, mga antipungal na gamot. Upang maiwasan ang intravenous amphotericin B. Pag-iwas ng systemic impeksiyon naayos Amikacin at ceftazidime, na maitalaga ang araw bago transplantation, habang patuloy na paggamot upang discharge pasyente. Lahat ng paghahanda sa dugo bago ang pag-iilaw ay iradiated sa isang dosis ng 30 Gy. Ang nutrisyon sa parenteral sa panahon ng paglipat ay isang paunang kinakailangan at nagsisimula agad sa pamamagitan ng paglimita sa paggamit ng pagkain nang natural.

Ang isang bilang ng mga komplikasyon na kaugnay sa mataas na toxicity ng immunosuppressive gamot, na madalas maging sanhi ng pagsusuka, pagsusuka at mucositis, bato pinsala, at interstitial pneumonia. Isa sa mga pinaka matinding komplikasyon ng chemotherapy ay venookklyuzionnaya sakit sa atay na humahantong sa kamatayan sa unang bahagi ng panahon ng post-transplant. Kabilang sa mga kadahilanan panganib para sa kulang sa hangin trombosis sa mga portal na sistema ng atay ay dapat na nabanggit pasyente edad, pagkakaroon ng sakit sa atay at atay fibrosis, at may hawak na immunosuppressive therapy matapos buto utak transplant. Venookklyuzionnaya sakit ay partikular na mapanganib sa thalassemia, na kung saan ay sinamahan ng hemosiderosis atay fibrosis at sakit sa atay - frequent satellite trans- fusional therapy. Kulang sa hangin trombosis sa mga portal na sistema ng atay bubuo sa loob ng 1-2 linggo pagkatapos ng transplant at ay nailalarawan sa pamamagitan ng isang mabilis na pagtaas sa bilirubin sa dugo at transaminases, progresibong hepatomegaly, ascites, encephalopathy, at sakit sa itaas na tiyan. Histologically autopsy materyal na tinukoy sa endothelial pinsala, subendothelial paglura ng dugo, sugat tsentrolobulyarnyh hepatocytes, thrombotic sagabal hepatic venules at ang gitnang ugat. Mga pasyente na may thalassemia ay inilarawan kaso ng malalang para puso aresto kaugnayan sa nakakalason epekto ng cytostatics.

Sa paghahanda para sa paglipat, ang cyclophosphamide at busulfan ay madalas na nagiging sanhi ng nakakalason na hemorrhagic cystitis na may mga pathological na pagbabago sa mga uroepithelial cell. Paggamit ng cyclosporin A sa utak ng buto paglipat ay madalas na sinamahan ng mga epekto ng nephrotoxicity at neurotoxicity, hypertensive syndrome, likido pagpapanatili at cytolysis hepatocytes. Ang paglabag sa pag-andar ng sekswal at reproduktibo ay mas madalas na sinusunod sa mga kababaihan. Sa mga maliliit na bata pagkatapos ng pag-unlad ng pagbubukas ng pubertal ay karaniwang hindi nagdurusa, ngunit sa mga mas matandang bata ang patolohiya ng pag-unlad ng genital sphere ay maaaring maging seryoso - hanggang sa pagkabaog. Ang mga komplikasyon na direktang may kaugnayan sa transplant mismo ay kinabibilangan ng pagtanggi ng allogeneic bone marrow cells, hindi pagkakatugma sa sistema ng ABO, malubhang at malalang mga anyo ng reaksyon ng "graft versus host".

Sa mga pasyente pagkatapos ng transplant ABO-tugma utak ng buto idioagglutinin i-type ang "host laban donor ABO" na ginawa sa loob ng 330-605 araw pagkatapos ng paglipat, na kung saan ay maaaring humantong sa matagal haemolysis at isang matalim na pagtaas sa ang pangangailangan para sa pagsasalin ng dugo. Sinabi komplikasyon ay pinigilan ito ng pagsasalin ng dugo ng erythrocytes grupo lamang 0. Pagkatapos transplantation sa isang bilang ng mga pasyente ang autoimmune neutropenia, thrombocytopenia, pancytopenia, o, para sa pagwawasto na dapat na natupad splenectomy.

Sa 35-40% ng mga tatanggap ng talamak reaksyon "pangunguwalta kumpara host" bubuo sa loob ng 100 araw pagkatapos ng paglipat ng allogeneic hemoglobin-magkatulad na utak ng buto. Ang antas ng sugat sa balat, atay at bituka ay nag-iiba mula sa mga pantal, hyperbilirubinemia, pagtatae at banayad sa desquamation ng balat, bituka sagabal, at acute atay kabiguan. Mga pasyente na may thalassemia frequency acute reaction "pangunguwalta kumpara host" Ako lawak matapos utak ng buto paglipat ay 75%, II at mas mataas na lawak - 11-53%. Panmatagalang reaction "pangunguwalta kumpara host" bilang isang systemic multiorgan syndrome ay karaniwang develops sa loob ng 100-500 araw pagkatapos ng paglipat ng allogeneic buto utak sa 30-50% ng mga pasyente. Ang balat, bibig, atay, mata, esophagus at upper respiratory tract ay apektado. Makilala ang limitadong anyo ng talamak reaksyon "pangunguwalta kumpara host" kapag ang mga apektadong balat at / o atay, at kalat na kalat, heneralisado sugat sa balat kapag isinama sa talamak agresibo hepatitis, sakit sa mata, mga glandula ng laway o anumang iba pang bahagi ng katawan. Ang sanhi ng kamatayan ay madalas na ang mga nakakahawang komplikasyon na nagreresulta mula sa malubhang immunodeficiency. Sa thalassemia talamak malumanay na form ng ang reaksyon "pangunguwalta kumpara host" ay natagpuan sa 12%, i-moderate - 3% at malubhang - mayroon 0.9% ng mga tatanggap ng HLA-compatible allogenic utak ng buto. Matinding pagkamagulo ng buto utak transplant pangunguwalta pagtanggi, na develops sa loob ng 50-130 araw pagkatapos ng pagtitistis. Ang dalas ng pagtanggi ay depende sa conditioning mode. Sa partikular, mga pasyente na may thalassemia ginagamot sa panahon ng paghahanda ng methotrexate mag-isa, pagtanggi ng utak ng buto pangunguwalta ay na-obserbahan sa 26% ng mga kaso, mga kumbinasyon ng methotrexate sa cyclosporin A - 9%, at kapag nagtatalaga lamang cyclosporin A - 8% ng mga kaso (Haziyev etc. ., 1995).

Ang mga nakakahawang komplikasyon matapos ang paglipat ng utak ng buto ay nagiging sanhi ng mga virus, bakterya at fungi. Ang kanilang pag-unlad ay konektado na may malalim na neutropenia, na kung saan ay sapilitan sa panahon ng chemotherapy conditioning, cytostatics talunin mucosal hadlang at reaksyon "pangunguwalta kumpara host". Depende sa panahon ng pag-unlad, tatlong phase ng nakakahawang mga komplikasyon ay nakikilala. Sa unang phase (pagbubuo sa unang buwan ng post-transplant) ay pinangungunahan ng pinsala sa mucosal barrier at neutropenia, madalas na sinamahan ng viral infection (herpes, Epstein-Barr virus, Cytomegalovirus, Varicella zoster), pati na rin ang mga impeksiyon na sanhi ng grampolozhi - namumula at Gram-negatibong bakterya, Candida fungi , aspergillomas. Sa unang bahagi ng panahon ng post-transplant (ang ikalawa at ikatlong buwan pagkatapos ng paglipat) ay ang pinaka matinding cytomegalovirus impeksyon, na madalas ay humahantong sa kamatayan ng mga pasyente sa ikalawang yugto ng impeksiyon. Thalassemia cytomegalovirus impeksyon pagkatapos ng paglipat ng utak ng buto ay nangyayari sa 1.7-4.4% ng mga tatanggap. Ang ikatlong yugto ay na-obserbahan sa huling bahagi ng panahon ng post-transplant (tatlong buwan matapos ang operasyon), at ay nailalarawan sa pamamagitan ng malubhang pinagsama immunodeficiency. Ang panahong ito ay karaniwang matatagpuan impeksiyon na sanhi ng varicella zoster, streptococcus, Pneumocystis Carini, Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae, at hepatotropic virus. Thalassemia dami ng namamatay sa mga pasyente pagkatapos ng utak ng buto paglipat ay nauugnay sa bacterial at fungal sepsis, idiopathic interstitial at cytomegalovirus pneumonia, talamak paghinga pagkabalisa sindrom, talamak pagpalya ng puso, para puso tamponade, tserebral pagsuka ng dugo, sakit sa venookklyuzionnoy atay at talamak na reaksyon "pangunguwalta kumpara host".

Sa kasalukuyan, ang ilang mga pag-unlad ay ginawa sa pagbuo ng mga pamamaraan para sa paghihiwalay mula sa buto utak ng isang dalisay na populasyon ng stem hemopoietic cells. Ang pamamaraan ng pagkuha ng fetal blood mula sa umbilical cord ay napabuti at ang mga pamamaraan ay binuo para sa paghihiwalay ng mga cell na bumubuo ng dugo mula sa blood cord. Sa siyentipiko pindutin ang may mga ulat na kapag pinag-aralan sa media sa cytokines, hematopoietic stem cell ay may kakayahang multiplikasyon. Kapag gumagamit ng espesyal na dinisenyo bioreactors para sa paglawak ng HSC, ang biomass ng stem hemopoietic cells na nakahiwalay sa utak ng buto, ang peripheral o cord blood ay makabuluhang nadagdagan. Ang posibilidad ng paglawak ng HSC ay isang mahalagang hakbang sa klinikal na pag-unlad ng paglipat ng cell.

Gayunpaman, bago ang pagpaparami ng HSC sa vitro, kinakailangang ihiwalay ang isang homogenous na populasyon ng hematopoietic stem cells. Ito ay kadalasang nakakamit gamit markers, na nagpapahintulot sa selectively markahan HSC monoclonal antibodies covalently naka-link sa magnetic o fluorescent label, at piliin ang mga ito sa isang angkop cell sorter. Kasabay nito, ang isyu ng phenotypic na katangian ng mga hematopoietic stem cell ay hindi pa nasisiyahan sa wakas. A. Petrenko., V. Hryschenko (2003) bilang mga kandidato para GSK itinuturing na mga cell, na kung saan ay naroroon sa ibabaw ng CD34, AC133 at Thyl antigens at walang CD38, HLA-DR at iba pang mga marker ng pagkita ng kaibhan (cell na may ang phenotype CD34 + Liir). Sa pamamagitan ng linear na pagkita ng kaibhan ng mga marker (lineage, Lin) ay kinabibilangan ng glycophorin A (GPA), CD3, CD4, CD8, CD10, CD14, CD16, CD19, CD20 (Muench, 2001). Itinuturing na may pag-asa para sa paglipat ng mga cell na may mga phenotype CD34 + CD45RalüW CD71low, pati na rin CD34 + Thyl + CD38low / c-kit / mababa.

Ang problema ng bilang ng mga HSC na sapat para sa epektibong paglipat ay nananatiling isang problema. Sa kasalukuyan, ang pinagmulan ng mga stem cell na bumubuo ng dugo ay ang utak ng buto, dugo ng paligid at kurdon, pati na rin ang embryonic na atay. Ang pagpapalawak ng mga stem hemopoietic cells ay nakamit sa pamamagitan ng pag-kulturang ito sa pagkakaroon ng mga endotheliocytes at hematopoietic na paglago ng mga kadahilanan. Sa iba't ibang mga protocol, ang myeloproteins, SCF, erythropoietin, mga salik na paglago ng insulin, corticosteroids at estrogens ay ginagamit upang mahawa ang paglaganap ng HSC. Kapag ang mga kumbinasyon ng mga cytokines ay ginagamit sa in vitro, ang isang makabuluhang pagtaas sa pool ng HSC ay maaaring makamit na may tuktok ng kanilang paglabas sa dulo ng ikalawang linggo ng paglilinang.

Ayon sa kaugalian, ang dugo ng HSC cord ay pangunahin nang ginagamit sa hemoblastoses. Gayunpaman, ang minimum na dosis ng hematopoietic cells na kinakailangan para sa matagumpay na pag-transplant ng cord blood cells ay 3.7 x 10 ⁷ nucleated cells kada 1 kg ng timbang ng katawan ng tatanggap. Ang paggamit ng isang mas maliit na halaga ng HSC ay makabuluhang nagpapataas ng panganib ng kabiguan ng graft at pagbabalik ng sakit. Samakatuwid, ang transplantation ng dugo na bumubuo ng mga selula ng umbilical cord ay pangunahing ginagamit sa paggamot ng hemoblastosis sa mga bata.

Sa kasamaang palad, wala pa ring standard blangko, at standardized protocol klinikal na paggamit ng kurdon ng dugo hematopoietic cell. Alinsunod dito ang kanilang mga sarili stem cells ng kurdon ng dugo ay hindi legal na kinikilala bilang isang pinagmulan ng hematopoietic cell stem para sa pagsasalin. Bilang karagdagan, walang etikal o legal na mga panuntunan na namamahala sa mga gawain at samahan ng mga bangko ng lawit ng pusod krovb na magagamit sa ibang bansa. Samantala, para sa ligtas na paglipat, lahat ng mga halimbawa ng dugo ng umbilical cord ay dapat na maingat na masubaybayan. Bago ang isang sample ng dugo ay nakolekta mula sa isang buntis, dapat na makuha ang kanyang pahintulot. Ang bawat buntis ay dapat na napagmasdan sa isang carriage ng HBsAg, antibodies sa hepatitis C virus, HIV, at syphilis. Ang bawat sample ng kurdon ng dugo ay dapat magpasuri sa karaniwang bilang ng mga nucleated cell at CD34 + kolonya na bumubuo ng kakayahan. Higit pa rito, HbA isinasagawa pagta-type, dugo grupo ABO at ang kanyang membership ng Rh factor. Testing pamamaraan ay kinakailangan crop sa bacteriological baog, serological pagsubok para sa HIV-1 at HIV-2 impeksyon, HBsAg, hepatitis C virus, cytomegalovirus impeksyon, NTLY NTLY-1 at-II, syphilis, toxoplasmosis. Bilang karagdagan, isang reaksyon ng polymerase chain ang ginagawa upang makita ang cytomegalovirus at HIV infection. Tila angkop upang makadagdag sa pag-aaral ng mga protocol testing umbilical HSCs kurdon ng dugo upang makilala ang mga naturang genetic sakit tulad ng thalassemia at sickle-cell anemia, adenosine deaminase kakulangan, agammaglobulinemia Bruton, sakit Harlera at tagasipa.

Sa susunod na yugto ng paghahanda para sa paglipat, ang tanong ay nagmumula sa pagpapanatili ng GSK. Ang pinaka-mapanganib para sa posibilidad na mabuhay ng mga cell kapag naghahanda ang mga ito ay ang mga proseso ng pagyeyelo at pag-ihi. Kapag nagyeyelo ang mga hemopoietic cells, ang isang mahalagang bahagi ng mga ito ay maaaring pupuksain dahil sa pagbuo ng kristal. Upang mabawasan ang porsyento ng kamatayan ng cell, ang mga espesyal na sangkap ay ginagamit - cryoprotectants. Kadalasan, bilang isang cryoprotectant, ang DMSO ay ginagamit sa isang huling konsentrasyon ng 10%. Gayunpaman, para sa DMSO, ang konsentrasyon na ito ay nailalarawan sa pamamagitan ng isang direktang cytotoxic effect, na nagpapakita mismo kahit sa ilalim ng mga kondisyon ng minimal na pagkakalantad. Nabawasang cytotoxic epekto nakakamit sa pamamagitan ng pagpapanatili ng isang mahigpit zero temperatura exposure mode at regulasyon pagsunod sa pagpoproseso ng materyal sa panahon at pagkatapos lasaw (bilis ng lahat ng mga manipulations ng paglalapat ng maramihang mga pamamaraan laundering). Huwag maglapat ng konsentrasyon ng DMSO na mas mababa sa 5%, dahil sa kasong ito, ang mass death ng hematopoietic cells ay nangyayari sa panahon ng pagyeyelo.

Ang pagkakaroon ng mga impurities sa erythrocyte suspensyon pinaghalong GSK ay lumilikha ng panganib ng hindi pagkakatugma reaksyon ng erythrocyte antigens. Kasabay nito habang tinatanggal ang pulang selula ng dugo makabuluhang tumaas pagkawala ng hematopoietic cell. Sa ganitong koneksyon, iminungkahi ang isang paraan para sa di-wastong paghihiwalay ng GCS. Sa kasong ito, upang maprotektahan ang mga nucleated mga cell mula sa damaging epekto ng mababang temperatura gamit 10% DMSO solusyon at pagpapalamig sa isang pare-pareho ang bilis (HS / min) sa -80 ° C, kung saan pagkatapos, ang cell suspensyon ay frozen sa likido nitrogen. Ito ay pinaniniwalaan na may ganitong cryopreservation pamamaraan ng isang bahagyang lysis ng mga pulang selula ng dugo, kaya mga sample ng dugo ay hindi nangangailangan ng fractionation. Bago transplantation, ang cell suspensyon ay lasaw, hugasan nang walang DMSO at libreng pula ng dugo sa ang solusyon ng tao puti ng itlog o dugo suwero. Pagpapanatili ng hematopoietic progenitor gamit ang pamamaraang ito ay sa katunayan mas mataas kaysa sa pagkatapos fractionation kurdon ng dugo, ngunit ang panganib ng komplikasyon dahil sa pagsasalin ng dugo ng ABO-tugma pagsasalin ng erythrocyte naka-imbak.

Ang pagtatatag ng isang sistema ng mga bangko para sa imbakan ng HSC na sinuri at mga halimbawa ng HSC ay maaaring malutas ang mga problema sa itaas. Gayunpaman, para sa mga ito ay kinakailangan upang bumuo ng etikal at legal na mga pamantayan, na kung saan ay pa rin lamang tinalakay. Bago ang paglikha ng isang network ng pagbabangko, kinakailangan upang magpatibay ng maraming mga probisyon at mga dokumento sa standardisasyon ng mga pamamaraan para sa sampling, fractionation, pagsubok at pag-type, at cryoconservation ng GCW. Ang isang paunang kinakailangan ng epektibong aktibidad ng mga bangko GSK ay ang samahan ng mga database ng computer para sa mga relasyon sa donor utak ng buto nagrerehistro World Association (WMDA) at ng National donor utak ng buto ng Estados Unidos Program (NMDP).

Bilang karagdagan, kinakailangan upang ma-optimize at ilagay sa pamantayan ang mga pamamaraan ng pagpapalawak ng HSC sa vitro, lalo na ang mga selyula ng dugo ng hematopoietic cord. Ang pagpaparami ng dugo ng HSC cord ay kinakailangan upang madagdagan ang bilang ng mga potensyal na tatanggap na katugma sa sistema ng HLA. Dahil sa maliliit na volume ng blood cord, ang halaga ng HSC na nakapaloob dito ay, bilang isang patakaran, ay hindi nakapagbigay ng repopulation sa utak ng buto sa mga pasyenteng nasa hustong gulang. Kasabay nito, para sa pagsasagawa ng mga hindi kaugnay na transplantasyon, kinakailangan upang magkaroon ng sapat na bilang ng mga tipikal na sample ng GSK (mula sa 10,000 hanggang 1,500,000 bawat 1 tatanggap).

Ang paglipat ng mga stem hemopoietic cells ay hindi nag-aalis ng mga komplikasyon na kasama sa transplantation ng buto ng utak. Ang pagtatasa ay nagpapakita na sa paglipat ng umbilical cord blood stem cells, ang mga malubhang anyo ng talamak na "graft-versus-host" reaksyon ay lumalaki sa 23%, talamak sa 25% ng mga tatanggap. Sa mga pasyente ng oncohematological recurrences ng talamak na lukemya sa loob ng unang taon pagkatapos ng pag-transplant ng HSC cord blood ay sinusunod sa 26% ng mga kaso.

Sa mga nakalipas na taon, ang mga pamamaraan ng paglipat ng mga peripheral hematopoietic stem cells ay bumubuo ng intensively. Ang nilalaman ng HSC sa paligid ng dugo ay napakaliit (mayroong 1 GSK sa bawat 100,000 selula ng dugo), na ang kanilang paghihiwalay na walang espesyal na paghahanda ay walang kabuluhan. Samakatuwid, ang donor ay dati ay binigyan ng isang kurso ng pagbibigay-buhay ng droga sa paglabas ng hematopoietic bone marrow cells sa dugo. Sa layuning ito, ang mga di-nakakapinsalang gamot na tulad ng cyclophosphamide at granulocyte kolonya-stimulating factor ay ginagamit. Ngunit kahit na matapos ang pamamaraan para sa pagpapakilos ng HSC sa paligid ng dugo, ang nilalaman ng CD34 + na mga cell dito ay hindi lalagpas sa 1.6%.

Upang mapakilos ang HSC sa klinika, ang C-CEC ay mas karaniwang ginagamit, na kung saan ay nailalarawan sa pamamagitan ng medyo magandang pagpapaubaya, maliban sa halos regular na hitsura ng sakit sa mga buto. Dapat pansinin na ang paggamit ng modernong mga separator ng dugo ay nagpapahintulot sa amin na ihiwalay ang mga stem progenitors ng hematopoiesis. Gayunpaman, sa ilalim ng mga kondisyon ng normal na hematopoiesis, hindi bababa sa 6 na pamamaraan ang dapat gawin upang makakuha ng sapat na bilang ng mga selulang stem hematopoietic, katulad sa kapasidad na repopulative ng slurry marrow sa utak. Sa bawat pamamaraan, ang separator ay nagpapatakbo ng 10-12 litro ng dugo, na maaaring maging sanhi ng thrombocytopenia at leukopenia. Ang pamamaraan ng paghihiwalay ay nagsasangkot sa pangangasiwa ng isang anticoagulant (sodium citrate) sa donor, na hindi magbubukod, gayunman, makipag-ugnay sa pag-activate ng mga platelet sa panahon ng extracorporeal centrifugation. Ang mga salik na ito ay lumikha ng mga kondisyon para sa pagpapaunlad ng mga nakakahawang sakit at hemorrhagic. Ang isa pang disbentaha ng pamamaraan ay ang malaking pagkakaiba sa tugon ng pagpapakilos, na nangangailangan ng pagsubaybay sa nilalaman ng HSC sa mga paligid ng mga donor ng dugo, na kinakailangan upang matukoy ang kanilang pinakamataas na antas.

Ang autologous transplantation ng HSC, sa kaibahan sa allogeneic, ay ganap na hindi isinasama ang pag-unlad ng reaksyon sa pagtanggi. Gayunman, ang isang makabuluhang disbentaha ng autologous paglipat ng hematopoietic cell stem, nililimitahan ang saklaw ng mga indications para sa kanyang pag-uugali, ay isang mataas na posibilidad reinfusion cell leukemic clone na may isang transplant. Bilang karagdagan, ang kakulangan ng epekto ng "immuno-mediated" na graft-versus-tumor ay makabuluhang nagpapataas ng dalas ng pag-ulit ng malignant na sakit sa dugo. Samakatuwid, ang tanging paraan ng radikal pag-aalis ng clonal hematopoietic neoplastic at ibalik ang normal na polyclonal hematopoiesis in myelodysplastic syndromes ay intensive chemotherapy na may allogeneic HSC transplantation.

Ngunit kahit na sa kasong ito, ang paggamot para sa karamihan sa mga hemoblastoses ay naglalayon lamang sa pagtaas ng oras ng kaligtasan ng mga pasyente at pagpapabuti ng kanilang kalidad ng buhay. Ayon sa maraming mga malalaking pag-aaral, ang matagal na kaligtasan ng buhay na walang hanggan matapos makamit ang HSC allotransplantation sa 40% ng mga pasyente sa oncohematological. Kapag gumagamit ng stem cell ng HbA-compatible na kapatid, ang pinakamahusay na resulta ay sinusunod sa mga batang pasyente na may isang maikling kasaysayan ng sakit, ang bilang ng mga cell ng sabog ng hanggang sa 10%, at kanais-nais na cytogenetics. Sa kasamaang palad, ang namamatay na nauugnay sa pamamaraan para sa HSC allotransplantation sa mga pasyente na may mga myelodysplastic na sakit ay nananatiling mataas (sa karamihan ng mga ulat - mga 40%). Ang mga resulta ng 10 taon magtrabaho US National Program buto utak donasyon (510 pasyente, ang panggitna edad - 38 taon) ay nagpapahiwatig na ang sakit-free na kaligtasan ng buhay ay 29% sa loob ng dalawang taon sa isang medyo mababa ang posibilidad ng pagbabalik sa dati (14%). Gayunpaman, ang dami ng namamatay na sanhi ng pamamaraan ng GSC allotransplantation mula sa isang walang-kaugnayang donor ay napakataas at umaabot sa 54% sa loob ng dalawang taon. Ang mga katulad na resulta ay nakuha sa pag-aaral sa Europa (118 mga pasyente, median edad na 24 taon, 2-taong pagbabalik-loob na walang kaligtasan 28%, pag-ulit 35%, dami ng namamatay na 58%).

Kapag nagdadala ng masinsinang kurso ng chemotherapy na may kasunod na pagpapanumbalik ng hematopoiesis sa pamamagitan ng allogeneic hemopoietic cells, madalas na lumitaw ang mga komplikasyon ng immunohematological at transfusion. Sa maraming paraan, nauugnay ang mga ito sa katotohanan na ang mga grupo ng dugo sa mga tao ay minana nang nakapag-iisa ng mga molecule ng MHC. Samakatuwid, kahit na ang donor at tatanggap ay magkatugma sa mga pangunahing HLA antigens, ang kanilang erythrocytes ay maaaring magkaroon ng ibang phenotype. Maglaan ng "malaking" hindi pagkakatugma kapag mabuhay bago sa simula sa ang tatanggap antibody sa antigen ng donor pulang selula ng dugo, at "maliit" kapag ang donor antibodies sa mga antigens ng pulang selula ng dugo sa mga tatanggap. May mga kaso ng isang kumbinasyon ng "malaki" at "maliit" na hindi pagkakatugma.

Ang mga resulta ng comparative analysis ng klinikal na espiritu ng utak ng buto at hematopoietic stem cell ng lawit ng pusod allografts dugo sa hematological malignancies ay nagpapahiwatig na ang mga batang allotransplantation GSK kurdon ng dugo makabuluhang bawasan ang panganib ng reaksyon "pangunguwalta kumpara host", ngunit mayroong isang mas mahabang tagal ng pagbawi ng neutrophil at platelet isang mas mataas na dalas ng isang 100-araw pagkamatay ng post-transplant.

Ang pag-aaral ng mga sanhi ng maagang kabagsikan ay naging posible upang linawin ang mga kontraindikasyon sa allogeneic transplantation ng GSK, bukod sa kung saan ang pinakamahalaga ay:

• presensya sa tatanggap o donor ng mga positibong pagsusuri para sa impeksiyon ng cytomegalovirus (nang walang pagsasagawa ng preventive treatment);
• matinding radiation sickness;
• presensya o kahit na hinala ng pagkakaroon ng isang mycotic infection sa pasyente (walang systemic maagang prophylaxis na may fungicidal na gamot);
• hemoblastoses, kung saan ang mga pasyente ay tumanggap ng matagal na paggamot na may mga cytostatics (dahil sa mataas na posibilidad ng biglaang pag-aresto sa puso at maramihang organ failure);
• paglipat mula sa mga hindi magkaparehong donor ng HLA (nang walang pag-iwas sa talamak na "transplant laban sa host" reaksyon ng cyclosporin A);
• talamak na viral hepatitis C (dahil sa isang mataas na panganib ng pagbuo ng veno-occlusive sakit ng atay).

Kaya, ang paglipat ng GSK ay maaaring maging sanhi ng malubhang komplikasyon, na madalas na humantong sa kamatayan. Sa unang bahagi (hanggang sa 100 araw post-transplant) na panahon ito ay kinabibilangan ng mga nakakahawang komplikasyon, acute reaction "pangunguwalta kumpara host", transplant pagtanggi (neprizhivlenie HSC donor), venookklyuzionnaya sakit sa atay, pati na rin dahil sa ang conditioning regimen toxicity, tissue pinsala, kung saan ang mga mataas na katangian ang rate ng remodeling (balat, vascular endothelium, bituka epithelium). Komplikasyon ng late panahon ng post-transplant isama talamak reaksyon ng "graft kumpara host" ang pag-ulit ng kalakip na sakit, paglago pagpaparahan sa mga bata, may kapansanan sa reproductive function at sakit teroydeo mata.

Kamakailan lamang, may kaugnayan sa paglitaw ng mga publisher sa plasticity ng mga cell sa utak ng buto, ang ideya ng paggamit ng GSK para sa paggamot ng mga atake sa puso at iba pang mga sakit ay lumitaw. Bagaman sinusuportahan din ng ilang mga eksperimento sa mga hayop ang posibilidad na ito, ang mga konklusyon tungkol sa plasticity ng mga cell sa utak ng buto ay kailangang kumpirmahin. Ang pangyayari na ito ay dapat isaalang-alang ng mga mananaliksik na naniniwala na ang mga transplant na selula ng utak ng buto ng tao ay madaling mabago sa mga selula ng kalamnan ng skeletal, myocardium o CNS. Ang teorya na ang GSK ay isang natural na cellular source ng pagbabagong-buhay ng mga organo na ito ay nangangailangan ng malubhang katibayan.

Sa partikular, inilathala ang unang resulta ng isang bukas na randomized trial Belenkova V. (2003), na ang layunin - upang pag-aralan ang epekto ng C-SIS (ie, pagpapakilos ng autologous HSCs dugo) sa klinikal, hemodynamic at neurohumoral katayuan ng mga pasyente na may katamtaman sa malubhang talamak pagpalya ng puso, pati na rin ang kaligtasan ng pagtatasa nito sa standard therapy (ACE inhibitors, beta-blocker, diuretics, para puso glycosides). Ang unang paglalathala ng mga resulta ng mga may-akda ng programa sa pananaliksik tandaan na ang tanging argument sa pabor ng O-CBP ay ang mga resulta ng paggamot ng isang pasyente na sa panahon therapy na may gamot na ito natagpuan matututulan na pagpapabuti sa lahat ng mga klinikal at hemodynamic mga parameter. Gayunman, ang mga teorya ng HSCs mobilisasyon sa bloodstream na sinusundan ng pagbabagong-buhay ng myocardium sa post-infarction zone ay hindi pa nakumpirma - kahit na sa mga pasyente na may isang positibong klinikal na dynamics ng stress echocardiography sa dobutamine ay hindi ibunyag ang paglitaw ng mga viable myocardium sa pilat lugar ng field.

Dapat ito ay nabanggit na ang kasalukuyang data ng punto upang magrekomenda ng isang kapalit cell therapy para sa lakit pagpapakilala sa araw-araw na klinikal na kasanayan, ito ay hindi sapat. Ang isang mahusay na crafted at ng husay na pagganap ng klinikal na pag-aaral upang matukoy ang pagiging epektibo ng mga iba't ibang mga pagpipilian ng nagbabagong-buhay cell therapy, pag-unlad ng indications at contraindications dito, pati na rin ang mga alituntunin sa ang pinagsamang paggamit ng mga nagbabagong-buhay at plastic therapy at maginoo kirurhiko o konserbatibo paggamot. Sa ngayon, walang tugon sa tanong ng kung anong uri ng isang populasyon ng mga cell sa utak ng buto (hematopoietic stem o stromal) ay maaaring pagsimulan ng neurons at cardiomyocytes, at ito ay hindi malinaw kung ano ang mga kondisyon ng kontribusyon sa na ito sa Vivo.

Ang gawain sa mga lugar na ito ay ginagawa sa maraming bansa. Sa buod ng mga panayam sa talamak atay pagkabigo ng US National Institutes of Health sa gitna ng mga promising pamamaraan ng paggamot, kasama ang atay paglipat, transplant minarkahan xenon o allogeneic hepatocytes at sa vitro bioreactors na may kaugnayan sa mga cell atay. May direktang katibayan na ang alien lamang functionally aktibong hepatocytes ay magagawang magbigay ng epektibong suporta sa atay ng pinadadalhan. Para sa klinikal na paggamit ng nakahiwalay hepatocytes kinakailangan upang lumikha ng isang cell sa bangko, na kung saan ay lubos na mabawasan ang oras sa pagitan ng release ng mga cell at ang kanilang paggamit. Ang pinaka-katanggap-tanggap para sa paglikha ng isang bangko ng ilang mga hepatocytes ay ang cryopreservation ng mga selula ng atay sa likidong nitrogen. Ang paggamit ng naturang mga cell sa klinika para sa mga pasyente na may talamak at talamak sakit sa atay nagsiwalat ng isang sapat na mataas na nakakagaling na epekto.

Sa kabila maasahin sa mabuti at naghihikayat sa mga resulta ng paglipat ng mga cell atay sa eksperimento at klinika, may mga pa rin ng maraming mga problema ay pa rin malayo mula sa pagiging nalutas. Kabilang dito ang limitadong halaga ng angkop na mga katawan upang makakuha ng nakahiwalay hepatocytes insufficiently-epektibong paraan ng paghihiwalay, ang kakulangan ng ulirang pamamaraan ng pagpapanatili ng atay cell malabo unawa sa mga mekanismo ng regulasyon ng paglago at paglaganap ng mga transplanted cell, ang kakulangan ng sapat na mga pamamaraan engraftment pagsusuri o pagtanggi ng allogenic hepatocytes. Ito rin ay dapat isama ang pagkakaroon ng transplantation kaligtasan sa sakit gamit allogeneic o xenogeneic cell, kahit na mas mababa kaysa sa orthotopic atay paglipat, ngunit nangangailangan ang application ng immunosuppressive mga ahente, encapsulating nakahiwalay hepatocytes o espesyal na processing enzymes. Paglipat ng mga hepatocytes madalas na humantong sa isang immune salungatan sa pagitan ng recipient at donor sa isang pagtanggi reaksyon, na kung saan kinakailangan ang paggamit ng cytostatics. Isang solusyon sa problemang ito ay ang paggamit ng polymer microporous media upang ihiwalay ang atay cell, na kung saan ay mapabuti ang kanilang kaligtasan ng buhay, dahil ang capsule lamad epektibong pinoprotektahan ng hepatocytes, sa kabila ng mga host ng pagbabakuna.

Gayunpaman, sa talamak hepatic kabiguan tulad hepatocyte transplantation ay walang epekto dahil sa halip na mahabang panahon na kailangan para sa engraftment ng mga cell atay sa bagong kapaligiran na may access sa isang hakbang sa pinakamainam na paggana. Ang isang potensyal na limitasyon ay ang pagtatago ng apdo ectopic transplantation ng nakahiwalay hepatocytes, at kapag gumagamit ng bioreactors mahahalagang physiological hadlang ay gumaganap species pagkakaiba sa pagitan ng tao protina at protina na nagbigibay xenogeneic hepatocytes.

Sa panitikan may mga ulat na ang mga lokal na paglipat ng utak ng buto cell stromal stem pinapadali mabisa pagwawasto ng buto depekto, at buto pagpapanumbalik sa kasong ito ay mas intensive kaysa sa kusang reparative pagbabagong-buhay. Sa ilang preclinical pag-aaral sa mga modelo ng hayop na convincingly nagpakita ang posibilidad ng paggamit ng transplants buto utak stromal mga cell sa Orthopedics, kahit na i-optimize ang mga pamamaraan, kahit na sa pinakasimpleng kaso, karagdagang trabaho ay kinakailangan. Sa partikular, ang pinakamainam na kundisyon para sa pagpapalawak ng mga osteogenic stromal cells ex vivo ay hindi pa natagpuan, ang istraktura at komposisyon ng kanilang ideal carrier (matrix) ay nananatiling hindi napapagod. Ang minimum na bilang ng mga cell na kinakailangan para sa bulk bone regeneration ay hindi natutukoy.

Ito ay pinatunayan na ang mga mesenchymal stem cell nagpapakita transgermalnuyu plasticity - ang kakayahan upang makilala ang pagkakaiba sa mga uri ng cell na phenotypically na walang kaugnayan sa orihinal na cell linya. Sa ilalim ng mga pinakamabuting kalagayan kondisyon polyclonal stem cell linya kultura ng utak ng buto stromal cell pinananatili sa vitro para sa higit sa 50 mga dibisyon, na ginagawang posible upang makatanggap ng mga bilyun-bilyong ng mga cell stromal mula sa 1 ML ng utak ng buto aspirate. Gayunpaman, ang populasyon ng mesenchymal cell stem nailalarawan sa pamamagitan ng heterogeneity, na manifests ang sarili nito bilang pabagu-bago sa kolonya laki, iba't ibang mga bilis ng pagbuo at morphological pagkakaiba-iba ng mga uri ng cell - mula fibroblast-tulad ng suliran-shaped na malaking flat cells. Sa loob ng 3 linggo ng culturing stromal mga cell stem sinusunod phenotypic heterogeneity: isang kolonya bumubuo ng nodules ng buto tissue, habang ang iba - mga kumpol ng adipocytes, at iba pang, mas bihira, na bumubuo ng mga isla ng cartilage.

Para sa paggamot ng CNS degenerative na sakit sa una ginamit pangsanggol neural tissue transplant. Sa mga nakaraang taon, sa halip na ang pangsanggol utak tissue transplant steel cellular elemento neurospheres nagmula sa neural cell stem (.Poltavtseva, 2001). Neurospheres naglalaman nakatuon precursors ng mga neurons at glia - nagbibigay ito ng pag-asa para sa pagpapanumbalik ng nawala ang pag-andar ng utak pagkatapos ng paglipat. Pagkatapos ng paglipat ng mga cell na neurospheres dispersed daga striatal utak katawan na minarkahan ang kanilang paglaganap at pagkita ng kaibhan sa dopaminergic neurons, na kung saan ay nag-aalis motor kawalaan ng simetrya sa daga na may mga pang-eksperimentong gemiparkinsonizmom. Gayunpaman, sa ilang mga kaso, mula sa neurosphere cells binuo bukol, na kung saan ang humantong sa kamatayan ng mga hayop (Bjorklund, 2002).

Ang klinika maingat na pag-aaral ng dalawang grupo ng mga pasyente na kung saan hindi ang mga pasyente o ang mga doktor alam nanonood sa kanila (double-bulag), na isang pangkat ng mga pasyente transplanted embryonic tissue na may neurons na nagbigibay dopamine, ang pangalawang grupo ng mga pasyente na ginawa ng isang maling hakbang, nagbigay inaasahang resulta . Ang mga pasyente na ay transplanted embryonic neural tissue, naramdaman walang mas mahusay kaysa sa mga pasyente sa control group. Higit pa rito, 5 out of 33 pasyente pagkatapos ng 2 taon pagkatapos ng paglipat ng mga embryonic neural tissue binuo persistent dyskinesia, na kung saan ay walang kontrol sa mga pasyente group (Stem cells: pang-agham na pag-unlad at sa hinaharap na pananaliksik direksyon Nat Inst, of Health USA ...). Isa sa mga walang lutas problema ng mga klinikal na pag-aaral ng utak neural cell stem ay ang pag-aaral ng mga tunay na mga prospect at mga limitasyon ng kanilang mga derivatives transplantation para sa pagwawasto ng CNS disorder. Ito ay posible na matagal aagaw aktibidad sapilitan neyronogenez sa hippocampus, na humahantong sa kanyang istruktura at functional na mga pagbabago ay maaaring maging isang kadahilanan sa progresibong pag-unlad ng epilepsy. Konklusyon na ito ay partikular na kapansin-pansin, tulad ng ito tumuturo sa mga posibleng negatibong epekto ng henerasyon ng mga bagong neurons sa adult utak, at ang pagbuo ng nagkaligaw synaptic koneksyon.

Hindi namin dapat kalimutan na sa paglilinang ng media na may cytokines (mitogens) ay nagtataya ng mga katangian ng mga cell stem sa na ng tumor cells, pati na naganap ang mga ito malapit sa mga pagbabago sa regulasyon ng cell cycle, pagtukoy ng mga kakayahan upang hatiin nang walang hangganan. Walang pakundangan na transplanted tao maagang embryonic nagmula stem cells, dahil sa kasong ito ang panganib ng kapaniraan ay napakataas. Ito ay mas ligtas na gamitin ang mga ito mas nakatuon supling, ie, ninuno cell differentiated linya. Gayunpaman, sa kasalukuyan isang maaasahang pamamaraan para makuha ang matatag na mga linya ng cell ng tao na nag-iiba sa tamang direksyon ay hindi pa nagawa.

Ang paggamit ng mga molecular biology technology para sa pagwawasto ng hereditary patolohiya at mga sakit ng tao sa tulong ng pagbabago ng stem cell ay may malaking interes para sa praktikal na gamot. Ang mga katangian ng genome ng stem cell ay nagbibigay-daan sa pag-unlad ng mga natatanging mga scheme ng paglipat na may layuning itama ang mga sakit sa genetiko. Ngunit sa direksyong ito mayroon ding mga limitasyon na kailangang maubusan bago magsimula ang praktikal na aplikasyon ng genetic engineering ng mga stem cell. Una sa lahat, ito ay kinakailangan upang i-optimize ang proseso ng stem cell genome pagbabago ex vivo. Ito ay kilala na ang isang prolonged (3-4 linggo) paglaganap ng stem cell binabawasan ang kanilang transfection, kaya ilang mga cycle ng transfection ay kinakailangan upang makamit ang isang mataas na antas ng kanilang genetic pagbabago. Gayunpaman, ang pangunahing problema ay may kaugnayan sa tagal ng pagpapahayag ng therapeutic gene. Hanggang ngayon, sa wala sa mga pag-aaral, ang panahon ng epektibong pagpapahayag pagkatapos ng paglipat ng binagong mga selula ay hindi lumampas sa apat na buwan. Sa 100% ng mga kaso sa paglipas ng panahon, ang pagpapahayag ng transfected genes ay nabawasan dahil sa hindi aktibo ng mga promoter at / o pagkamatay ng mga cell na may binagong genome.

Ang isang mahalagang problema ay ang gastos ng paggamit ng mga cellular technology sa gamot. Halimbawa, ang tinatayang taunang kinakailangan sa pagpopondo para lamang sa mga gastusing medikal ng isang departamento ng transplant ng buto ng buto, na idinisenyo upang maisagawa ang 50 na transplant kada taon, ay humigit-kumulang na $ 900,000.

Ang pagpapaunlad ng mga cellular technology sa clinical medicine ay isang komplikadong at multi-stage na proseso na kinasasangkutan ng nakabubuo na kooperasyon ng multidisciplinary na siyentipiko at klinikal na mga sentro at ng internasyonal na komunidad. Kasabay nito, ang espesyal na pansin ay binabayaran sa siyentipikong organisasyon ng pananaliksik sa larangan ng cell therapy. Ang pinakamahalaga sa mga ito ay ang pagpapaunlad ng mga protocol para sa mga klinikal na pagsubok, pagsubaybay sa pagiging totoo ng mga klinikal na datos, pagbubuo ng isang rehistro ng pambansang pananaliksik, pagsasama sa mga internasyonal na programa ng mga klinikal na pagsubok ng multicenter at ang pagpapakilala ng mga resulta sa clinical practice.

Concluding ang pagpapakilala sa mga isyu cell transplantation, Gusto kong ipahayag ang pag-asa na ang pinagsamang mga pagsisikap ng mga nangungunang eksperto sa Ukraine mula sa iba't ibang larangan ng agham Titiyakin makabuluhang pag-unlad sa pang-eksperimentong at klinikal na pag-aaral at magbibigay-daan sa mga darating na taon upang mahanap ang epektibong paraan upang matulungan malubha tao na nangangailangan ng organ transplants , mga tisyu at mga selula.

[13], [14], [15], [16], [17], [18]