13c urease test: paghahanda, resulta, positibo, negatibo

Dahil ang pagtuklas ng Helicobacter pylori bacterium na nauugnay sa talamak na gastritis at gastric at duodenal ulcers, ang mga pamamaraan ng diagnostic ay binuo, kabilang ang urease test, na nagpapahintulot sa pag-detect ng mga microorganism na ito sa isang partikular na pasyente, na nagpapatunay sa kanilang paglahok sa pagbuo ng mga gastrointestinal na sakit at pagrereseta ng epektibong paggamot.

Urease enzyme bilang isang biomarker ng impeksyon sa Helicobacter

Ang H. pylori bacteria ay nagpoprotekta sa kanilang sarili mula sa acidic na kapaligiran sa lumen ng tiyan sa dalawang paraan. Una, sa pamamagitan ng pagsira sa mucous membrane gamit ang kanilang flagella, ang mga microorganism ay umabot sa mas mababang mga layer nito, hanggang sa mga epithelial cells, kung saan ang pH ay mas mataas (ibig sabihin, ang acidity ay mas mababa). Pangalawa, ang bakterya ay neutralisahin ang acid sa pamamagitan ng pag-synthesize ng malalaking dami ng catalytically active high-molecular metalloenzyme urease o urea amidohydrolase.

Ang paggamit ng urease sa diagnosis ng Helicobacter ay posible dahil hindi lamang sa aktibidad ng cytoplasmic ng enzyme na ito, kundi pati na rin sa panlabas na pakikipag-ugnayan sa mga host cell.

Sa ilalim ng pagkilos ng urease, nangyayari ang pagkasira ng gastric urea sa hydrogen nitride (ammonia) at carbon dioxide (carbon dioxide). Tumutugon sila sa hydrochloric acid sa gastric juice at nagbibigay ng isang zone ng neutral na kaasiman sa paligid ng H. pylori, at sinusuportahan din ang metabolismo ng mga bacterial cell.

Ito ang dahilan kung bakit ang urease ay ang pinakamahalagang kadahilanan sa kolonisasyon ng H. pylori sa gastric mucosa ng tao, at ang pagtuklas ng aktibidad ng ureolytic ay itinuturing na isang biomarker ng virulence ng bacterium na ito, na ginagamit ng mga gastroenterologist - sa pamamagitan ng pagsasagawa ng urease test - upang masuri ang impeksyon sa Helicobacter, gayundin upang masubaybayan ang mga resulta ng pagkasira ng bakterya (induced) ng droga.

Kasama sa H. pylori diagnostics ang mga invasive at non-invasive na pagsusuri – depende sa kung kailangan o hindi ang endoscopic na pagsusuri ng tiyan (fibrogastroduodenoscopy). Ang invasive test ay ang rapid urease test o express urease test (RUT-test), na nangangailangan ng pagkuha ng tissue sample (biopsy). Ang 13C urea breath test (13C-UBT) ay ang pinakakaraniwang non-invasive na pagsubok.

Dapat pansinin na ang mga di-nagsasalakay na diagnostic ng H.pylori ay maaaring isagawa gamit ang pagsusuri ng dugo para sa mga antibodies (pagtutukoy sa antas ng 75%, sensitivity - 84%), ihi ELISA (na may sensitivity ng 96% at pagtitiyak ng 79%), at isang coprogram para sa bacterial antigens. Higit pang impormasyon - Helicobacter pylori infection: antibodies sa Helicobacter pylori sa dugo

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ]

Mga pahiwatig para sa pamamaraan urease test

Ang kolonisasyon ng gastric mucosa ni H. pylori mismo ay hindi isang sakit; ito ay isang kadahilanan sa pagtaas ng bacterial load sa katawan, na sa ilalim ng ilang mga kundisyon ay maaaring mag-trigger ng pag-unlad ng isang bilang ng mga pathologies ng tiyan at itaas na gastrointestinal tract.

Ang mga indikasyon para sa diagnostic ng impeksyon sa Helicobacter, lalo na, ang urease test, ay nauugnay sa gastritis na may pagtaas ng acidity, antral at atrophic gastritis, duodenitis, gastric ulcer at duodenal ulcer, gastric MALT lymphoma. Pagkatapos ng endoscopic resection ng maagang yugto ng gastric cancer, maaaring magsagawa ng histological examination kasabay ng rapid urease test - FGDS na may urease test.

Maaaring magreseta ang mga gastroenterologist ng urease test kung ang mga pasyente ay nagreklamo ng pakiramdam ng bigat at kakulangan sa ginhawa sa rehiyon ng epigastric, madalas na heartburn pagkatapos kumain, maasim o bulok na belching, kapaitan sa bibig, pagduduwal, mga sakit sa bituka, pananakit o pananakit ng cramping sa tiyan.

[ 8 ], [ 9 ]

Paghahanda

Ang paghahanda para sa 13C urea breath test ay binubuo ng paghinto ng pasyente: pag-inom ng antibiotic 4 na linggo bago ang pagsusuri, at mga NSAID, proton pump inhibitors (pagbabawas ng acidity sa tiyan) at antacid o adsorbents na ginagamit para sa heartburn - hindi bababa sa dalawang linggo bago. Ang pag-inom ng anumang mga gamot ay dapat ihinto lima hanggang anim na araw, at pag-inom ng alak at paninigarilyo - tatlong araw bago ang pagsusulit.

Inirerekomenda din na iwasan ang pagkain ng mga munggo nang humigit-kumulang isang linggo bago ang pagsubok, dahil ang beans, peas, lentils, soybeans at beans ay naglalaman ng urease (na nagpoprotekta sa mga halaman mula sa mga sakit at peste ng insekto).

Ang gabi bago ang pagsubok, ang isang late heavy dinner ay kontraindikado; sa araw ng pagsubok, dapat kang magsagawa ng normal na kalinisan sa bibig, at isang oras at kalahati bago ang pagsusulit, hindi ka dapat uminom ng anuman o gumamit ng gum.

[ 10 ], [ 11 ], [ 12 ], [ 13 ], [ 14 ]

Pamamaraan urease test

Teknik ng pagpapatupad:

• Una, ang isang pangunahing sample ng paghinga ay kinuha - isang pagbuga ay ginawa sa isang malambot na lalagyan ng plastik (at hermetically selyadong);
• ang likido na may idinagdag na 13C-urea ay kinukuha nang pasalita;
• Pagkatapos ng 25-30 minuto, ang pangalawang sample ng exhaled air ay dadalhin sa isa pang lalagyan.

Ang mga sample na nakuha sa ganitong paraan ay nasuri sa isang mass spectrometer na may paghihiwalay ng mga isotopes sa pangalawang sample at pagpapasiya ng kanilang konsentrasyon. Ang pagkakaiba sa pagitan ng mga halaga sa pangalawa at unang sample ay ipinahayag bilang delta (δ) kumpara sa antas ng baseline. Ang mga normal na halaga, ibig sabihin, ang mga negatibong halaga ng may label na atom 13C sa mga hindi nahawaang pasyente ay nag-iiba mula sa 0.15-0.46%, at ang mga positibong halaga sa pagkakaroon ng impeksyon ay 1.2-9.5% na may urea hydrolysis rate na higit sa 12-14 μg/min.

Sa madaling salita: ang pagtuklas ng carbon dioxide na may label na 13C sa exhaled air ay nagpapahiwatig na ang urea ay na-hydrolyzed ng urease enzyme na H. pylori, na, sa katunayan, ay nagpapatunay sa katotohanan ng presensya nito sa tiyan.

H. pylori breath test

Ang 13C-UBT test o 13C urea breath test para sa Helicobacter pylori ay isa sa pinakamahalagang non-invasive na pamamaraan para sa pag-detect ng impeksyong ito: na may 100% sensitivity at 98% specificity, ang panganib ng false positive at false negative na resulta kumpara sa histology at blood antibody testing ay 2.3% na mas mababa.

Ang pagsusuri ay batay sa hydrolysis ng oral administration na likidong urea na may label na carbon atom (stable non-radioactive isotope) 13C (50-75 mg 13C-urea na diluted sa 100 ml ng likido) ng H. pylori urease.

Ang urea na may label na isotope indicator ay sumasailalim sa hydrolysis sa tiyan na may paglabas ng ammonia at carbon dioxide na naglalaman ng mga atom na may label, na kumakalat sa dugo at inilalabas mula sa mga baga habang humihinga. Ang may label na carbon dioxide ay naitala ng isang analytical device - isang mass spectrometer, ang operasyon nito ay batay sa non-dispersive isotope-selective spectroscopy, o isang infrared spectroscopic analyzer.

Rapid urease test

Ang Rapid Urease Test (RUT) ay isinasagawa sa panahon ng endoscopic examination ng tiyan at duodenum - gamit ang mga modernong endofibroscope - at sabay-sabay na koleksyon ng mga biopsy sample. Ang biomaterial ay dapat na kinuha mula sa antral na bahagi ng tiyan. Kaya ang fibrogastroduodenoscopy o FGDS na may urease test ay isang invasive diagnostic method.

Ang nakuhang biopsy ay ganap na nilulubog sa isang inihandang standardized medium na naglalaman ng agar gel, urea, acid-base indicator phenolsulfophthalein at isang bacteriostatic agent (idinagdag upang maiwasan ang paglaki ng mga nakakahawa na microorganism at maling positibong resulta).

Kung ang H. pylori bacteria ay naroroon sa sample ng tissue ng tiyan, ang urease na nabubuo nila ay mag-hydrolyze ng urea at magtataas ng pH, na malinaw na nakikita habang nagbabago ang indicator mula sa dilaw hanggang sa orange (sa pH 6.8) at purple (sa pH> 8). 75% ng mga positibong pagsusuri ay nagbabago ng kulay sa loob ng 120-180 minuto, at mas mabilis na nagbabago ang kulay ng indicator, mas marami ang bilang ng mga bakterya. Ngunit ang mga pagsubok na lumalabas na negatibo ay pinananatili sa loob ng 24 na oras.

Rapid Urease Test Positive, Ano ang Ibig Sabihin Nito? Ang isang positibong pagsusuri sa RUT - ang indicator ay nagiging pula - ay nangangahulugan na ang biopsy sample na inilagay sa agar medium ay naglalaman ng hindi bababa sa 105 H. pylori bacteria, bagama't ang kanilang konsentrasyon ay karaniwang mas mataas.

Ang sensitivity ng iba't ibang mga pagbabago sa pagsubok ay nag-iiba sa hanay ng 90-98%, at ang pagtitiyak - 97-99%.

Tulad ng nabanggit ng mga gastroenterologist, kung ang konklusyon ng pasyente ay nagpapahiwatig ng isang matinding positibong pagsusuri sa urease (tatlong krus), nangangahulugan ito: pH> 8, at ang tagapagpahiwatig ay nagbago ng kulay sa mas mababa sa 60 minuto mula sa sandali ng paglulubog ng biopsy, na nagpapahiwatig ng isang malaking bilang ng H.pylori at isang mataas na antas ng pagpapahayag ng urease. Ang tinatayang bilang ng bakterya ay mabibilang sa panahon ng histological na pagsusuri ng biopsy sa ilalim ng mikroskopyo, at kung ito ay lumampas sa 40-50 sa visualized na lugar, ang antas ng impeksyon ay itinuturing na mataas.

Ang 13C urea breath test ay bihirang nagbibigay ng mga false-positive na resulta, at sa mga pasyente na may pinaghihinalaang gastric o duodenal ulcer, isang positibong pagsusuri ang isinasaalang-alang upang kumpirmahin ang diagnosis, samantalang ang isang negatibong resulta ay dapat kumpirmahin ng EGD na may urea test.