Hepatitis A virus

Ang viral hepatitis A ay isang nakakahawang sakit ng mga tao, pangunahing nailalarawan sa pamamagitan ng pinsala sa atay at clinically manifested sa pamamagitan ng pagkalasing at jaundice. Ang hepatitis A virus ay natuklasan noong 1973 ni S. Feinstone (et al.) gamit ang paraan ng immune electron microscopy at sa pamamagitan ng infecting monkeys - chimpanzees at marmoset. Ang kakanyahan ng paraan ng immune electron microscopy ay ang mga tiyak na antibodies (convalescent serum) ay idinagdag sa filtrate ng mga feces ng isang pasyente na may hepatitis A at ang sediment ay sumasailalim sa electron microscopy. Dahil sa pakikipag-ugnayan ng mga virus sa mga tiyak na antibodies, sumasailalim sila sa tiyak na pagsasama-sama. Sa kasong ito, mas madaling makita ang mga ito, at ang pagsasama-sama sa ilalim ng impluwensya ng mga antibodies ay nagpapatunay sa pagtitiyak ng pathogen. Ang pagtuklas ni S. Feinstone ay nakumpirma sa mga eksperimento sa mga boluntaryo.

Ang hepatitis A virus ay spherical, ang virion diameter ay 27 nm. Ang genome ay kinakatawan ng single-stranded positive RNA na may mm 2.6 MD. Walang supercapsid. Ang uri ng simetrya ay kubiko - icosahedron. Ang capsid ay may 32 capsomeres, ito ay nabuo ng apat na polypeptides (VP1-VP4). Ayon sa mga katangian nito, ang hepatitis A virus ay kabilang sa genus Heparnovirus, ang pamilyang Picornaviridae. Sa mga tuntunin ng antigens, ang hepatitis A virus (HAV - hepatitis A virus) ay homogenous. Ang HAV ay dumarami nang maayos sa katawan ng mga chimpanzee, baboon, hamadryas baboon at marmoset monkey. Sa loob ng mahabang panahon, ang virus ay hindi maaaring linangin. Noong 1980s lamang posible na makakuha ng mga kultura ng cell kung saan ang HAV ay nagpaparami. Sa una, ang tuluy-tuloy na mga linya ng cell ng rhesus macaque embryo kidney (kultura FRhK-4) ay ginamit para sa mga layuning ito, at ngayon ay isang tuluy-tuloy na linya ng cell ng berdeng monkey kidney cells (kultura 4647) ang ginagamit.

Ayon sa mga rekomendasyon ng mga eksperto ng WHO, ang sumusunod na katawagan ng mga marker ng hepatitis A virus ay pinagtibay: hepatitis A virus - HAV antibodies sa hepatitis A virus: anti-HAV IgM at anti-HAV IgG.

Ang HAV ay isang maliit na particle na may diameter na 27-30 nm, na may icosahedral symmetry at nagtataglay ng homogeneity. Ang electronogram na nakuha gamit ang immune aggregation method ay nagpapakita ng mga electron-dense na particle na may mababaw na matatagpuan na simetriko na nakaayos na mga capsomer. Sa negatibong contrasting, ang parehong puno at walang laman na mga particle ay ipinahayag sa paghahanda. Ang nucleocapsid ng HAV, hindi katulad ng trangkaso, ay walang mga protrusions sa ibabaw at isang lamad. Mahalaga rin na ang HAV virion ay walang hugis pusong istraktura.

Batay sa mga katangian ng physicochemical nito, ang hepatitis A virus ay inuri bilang kabilang sa pamilya ng picornavirus, ang enterovirus genus na may serial number 72. Gayunpaman, ang taxonomy na ito ay naging hindi pangkaraniwan, at itinuturing ng WHO na posible na mapanatili ang terminolohiya na "hepatitis A virus".

Tulad ng lahat ng mga virus ng pamilyang Picornaviridae, ang hepatitis A virus ay naglalaman ng ribonucleic acid. Ang ilang mga laboratoryo ay nagpakita ng posibilidad ng pag-clone ng hepatitis A virus genome, na nagbubukas ng posibilidad na makakuha ng mga bakuna.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ]

Panlaban sa virus ng Hepatitis A

Ang virus ay medyo lumalaban sa mataas na temperatura, acid, fat solvents (walang lipids), disinfectant, at mahusay na pinahihintulutan ang mababang temperatura. Ang lahat ng ito ay nag-aambag sa pangmatagalang pangangalaga nito sa panlabas na kapaligiran. Sa temperatura ng silid, nabubuhay ito ng ilang linggo, sa 60 °C bahagyang nawawala ang pagkahawa nito pagkatapos ng 4-12 oras, at ganap - pagkatapos ng ilang minuto sa 85 °C. Ito ay lubos na lumalaban sa murang luntian, dahil sa kung saan ito ay maaaring tumagos sa gripo ng tubig sa pamamagitan ng mga hadlang ng mga pasilidad sa paggamot ng tubig.

Sa pagbubuod ng lahat ng data, maaari nating makilala ang hepatitis A virus tulad ng sumusunod:

• ang likas na host ay tao;
• mga pang-eksperimentong hayop - marmoset, chimpanzees;
• ang pinagmulan ng impeksiyon ay dumi;
• ang sakit ay epidemya at endemic;
• ruta ng paghahatid: feco-oral;
• panahon ng pagpapapisa ng itlog - 14-40 araw;
• paglipat sa talamak na hepatitis - hindi sinusunod.

Ang mga immunological na katangian ng HAV ay ang mga sumusunod:

• Prototypic strains - Ms-1, CR-326, GВG. Lahat ay immunologically magkapareho o magkapareho;
• Antibodies - IgM at IgG, ay ginawa bilang tugon sa pagpapakilala ng mga istrukturang protina ng virus at proteksiyon;
• I. Ang proteksiyon na epekto ng human serum gamma globulin - pinipigilan o pinapahina ang sakit kung ibibigay bago ang impeksyon o sa panahon ng incubation.

Ang mga katangiang physicochemical ng NAU ay ang mga sumusunod:

• Morpolohiya: shell-less spherical particle na may cubic symmetry, capsid ay binubuo ng 32 capsomeres;
• Diameter - 27-30 nm;
• Density sa CsCl (g/cm3) - 1.38-1.46 (bukas na mga particle), 1.33-1.34 (mature virion), 1.29-1.31 (immature virion, empty particles);
• Sedimentation coefficient - 156-160 mature virion;
• Ang nucleic acid ay isang single-stranded, linear na RNA;
• Kamag-anak na molekular na timbang - 2.25 106-2.8 106KD;
• Ang bilang ng mga nucleotide ay 6,500-8,100.

Ang katatagan ng HAV sa ilalim ng pisikal at kemikal na impluwensya ay ang mga sumusunod:

• Chloroform, eter - matatag;
• Chlorine, 0.5-1.5 mg/l, 5 °C, 15 min - bahagyang hindi aktibo;
• Chloramine, 1 g/l, 20 °C, 15 min - kumpletong hindi aktibo;
• Formalin, 1:4000, 35-37 °C, 72 h - kumpletong hindi aktibo, 1:350, 20 °C, 60 min - bahagyang hindi aktibo.

Temperatura:

• 20-70 °C - matatag;
• 56 °C, 30 min - matatag;
• 60 °C, 12 h - bahagyang hindi aktibo;
• 85 °C, 1 min - kumpletong hindi aktibo;
• Autoclaving, 120 °C. 20 min - kumpletong hindi aktibo;
• Tuyong init, 180 °C, 1 oras - kumpletong hindi aktibo;
• UFO, 1.1 W, 1 min - kumpletong hindi aktibo.

Ang ipinakita na data ay nagpapakita na sa mga katangiang physicochemical nito, ang hepatitis A virus ay pinakamalapit sa mga enterovirus. Tulad ng ibang mga enterovirus, ang HAV ay lumalaban sa maraming solusyon sa disinfectant at ganap na hindi aktibo sa loob ng ilang minuto sa 85 °C at autoclaving.

Napatunayan na ang hepatitis A virus ay maaaring magparami sa pangunahin at tuluy-tuloy na monolayer na linya ng mga kultura ng selula ng tao at unggoy. Ang partikular na aktibong pagpaparami ng hepatitis A virus sa mga in vitro culture ay sinusunod kapag gumagamit ng mga extract ng atay mula sa mga may sakit na unggoy bilang panimulang materyal. Dapat pansinin, gayunpaman, na sa lahat ng mga eksperimento sa pagpaparami ng hepatitis A virus sa mga in vitro culture, ang pansin ay iginuhit sa mahabang panahon ng pagpapapisa ng itlog sa panahon ng mga pangunahing sipi (hanggang sa 4-10 na linggo), pagkatapos ay ang akumulasyon ng viral genetic na materyal ay tumataas, ngunit ang mga ganap na halaga ay nananatiling napakaliit, na nagbibigay ng mga batayan para sa maraming mga mananaliksik ng hepatitis A na magsalita tungkol sa pagtitiklop ng tissue sa kultura ng hepatitis A.

Ang pagbubuod ng data ng panitikan sa pagpaparami ng hepatitis A virus sa mga extra-tissue culture, masasabing ang katotohanan ng pangmatagalang kaligtasan ng HAV in vitro ay walang pag-aalinlangan. Ang mga pinakamainam na kondisyon para sa isang matatag na mataas na antas ng pagtitiklop ng virus ay hindi pa natukoy sa wakas, at ito ay humahadlang sa pag-aaral ng mga biological na katangian nito, pagkuha ng isang mapagkukunan ng mga reagents para sa paggawa ng mga diagnostic at disenyo ng bakuna.

Kasabay nito, ang higit pang mga optimistikong paghuhusga tungkol sa problemang ito ay matatagpuan sa panitikan. Ang solusyon sa lahat ng mga isyu na may kaugnayan sa paglilinang ng hepatitis A virus ay isang bagay sa malapit na hinaharap. Kapag pinag-aaralan ang pinakamainam na kondisyon para sa pagpaparami ng HAV sa kultura ng mga embryonic kidney cells ng rhesus macaque, dalawang yugto ang natukoy: ang yugto ng paggawa ng nakakahawang virus (hanggang 6-8 araw sa antas ng ika-5 na daanan) at ang yugto ng masinsinang akumulasyon ng viral antigen. Ipinakita rin na ang pinaka makabuluhang akumulasyon ng viral antigen ay nangyayari sa ilalim ng mga kondisyon ng tinatawag na roller cultivation (rotating flasks). Ang pamamaraang ito ay nagbubukas ng malawak na mga pagkakataon para sa pagkuha ng cultural antigen sa malalaking dami, at, dahil dito, ang pinagmumulan ng materyal para sa paghahanda ng mga diagnostic system at ang paggawa ng mga bakuna ay lilitaw.

Epidemiology ng hepatitis A

Ang hepatitis A virus ay lubhang pathogenic para sa mga tao. Ayon sa WHO (1987), ang impeksyon sa isang virion lamang ay sapat na upang maging sanhi ng sakit. Gayunpaman, ang praktikal na nakakahawang dosis ay malamang na mas mataas. Ang tanging pinagmumulan ng impeksyon ay isang taong nahawahan. Ang virus ay excreted sa malaking dami na may feces 12-14 araw bago ang simula ng paninilaw ng balat at sa panahon ng 3 linggo ng icteric period. Walang nakitang makabuluhang pagkakaiba sa paglabas ng pathogen sa mga pasyenteng may icteric, anicteric at asymptomatic na anyo ng hepatitis A. Ang ruta ng impeksyon ay fecal-oral, pangunahin sa tubig, gayundin sa sambahayan at pagkain. Ang ruta ng impeksyon ay fecal-oral, pangunahin sa tubig, gayundin sa sambahayan at pagkain. Ang pangunahing (pangunahing) ruta ng paghahatid ng virus ay waterborne. Posible rin ang impeksyon sa pamamagitan ng airborne droplets. Ang pagkamaramdamin ng populasyon ay pangkalahatan. Karamihan sa mga batang wala pang 14 taong gulang ay apektado. Ang sakit ay may binibigkas na taglagas-taglamig seasonality.

[ 8 ], [ 9 ], [ 10 ], [ 11 ], [ 12 ], [ 13 ], [ 14 ], [ 15 ]

Sintomas ng Hepatitis A

Ang panahon ng pagpapapisa ng itlog ay nag-iiba mula 15 hanggang 50 araw, depende sa infective na dosis ng virus, ngunit sa karaniwan ay 28-30 araw. Sa sandaling nasa katawan, ang hepatitis A virus ay dumarami sa mga rehiyonal na lymph node, tumagos sa dugo, at pagkatapos ay ang mga selula ng atay at nagiging sanhi ng talamak na nagkakalat na hepatitis, na sinamahan ng pinsala sa mga hepatocytes at reticuloendothelial na elemento ng atay at isang pagbawas sa detoxification at barrier function nito. Ang pinsala sa mga hepatocytes ay nangyayari hindi dahil sa direktang pagkilos ng virus, ngunit bilang resulta ng mga immunopathological na mekanismo. Ang pinakakaraniwang larawan ng hepatitis A ay isang talamak na icteric cyclic form: incubation period, prodromal (pre-icteric), icteric period at convalescence. Gayunpaman, sa foci ng impeksyon, ang isang malaking bilang ng mga pasyente na may anicteric at asymptomatic na mga anyo ng impeksyon ay napansin, ang bilang ng mga ito ay higit na nangingibabaw sa mga icteric ("iceberg phenomenon").

Ang post-infection immunity ay malakas at pangmatagalan, sanhi ng virus-neutralizing antibodies at immune memory cells.

Microbiological diagnostics ng hepatitis A

Ang mga diagnostic ng hepatitis A (maliban sa impeksyon ng mga hayop - chimpanzees, marmoset, baboon, na wala tayo) ay batay sa iba't ibang mga immunological na pamamaraan: RSC, immunofluorescence method, hemagglutination ng immune adhesion (ang complex ng viral antigen + antibody sa pagkakaroon ng complement ay adsorbed sa erythrocytes at nagiging sanhi ng kanilang gluing). Gayunpaman, ang mga posibilidad ng paggamit ng mga pamamaraang ito ay limitado dahil sa kakulangan ng mga tiyak na viral antigens, at ang reaksyon ng immunofluorescence ay nangangailangan ng biopsy sa atay, na hindi kanais-nais. Ang paraan ng immune electron microscopy ay maaasahan at tiyak, ngunit ito ay napaka-labor-intensive. Samakatuwid, sa ngayon ang tanging katanggap-tanggap na immunological reaction ay ang paraan ng immunosorbent analysis ng solid phase sa anyo ng IFM o RIM, lalo na sa pagbabago ng "capture" ng immunoglobulins ng klase M. Sa ating bansa, isang sistema ng pagsubok ang iminungkahi para sa layuning ito - "DIAGN-A-HEP". Ang prinsipyo ng pagpapatakbo ng sistema ng pagsubok na ito ay ang mga sumusunod. Una, ang mga antibodies sa mga immunoglobulin ng klase M (antiimmunoglobulins M) ay inilalagay sa mga dingding ng mga balon ng polystyrene, pagkatapos ay idinagdag ang serum ng pasyente na susuriin. Kung ito ay naglalaman ng IgM antibodies, sila ay magbubuklod sa mga anti-antibodies ng klase M, pagkatapos ay isang tiyak na viral antigen (hepatitis A virus) ay idinagdag, na nakuha sa pamamagitan ng paglaki sa cell culture. Ang sistema ay hugasan, at ang mga antiviral antibodies na may label na malunggay peroxidase ay idinagdag dito. Kung ang lahat ng apat na bahagi ng system ay nakikipag-ugnayan, ang isang apat na layer na "sandwich" ay nabuo:

• antiimmunoglobulins M,
• immunoglobulins M (laban sa hepatitis A virus - sa serum ng pasyente sa ilalim ng pag-aaral),
• viral antigen,
• antiviral antibodies na may label na enzyme.

Upang makita ang kumplikadong ito, isang substrate para sa enzyme ay idinagdag sa mga balon. Sa ilalim ng impluwensya ng enzyme, ito ay nawasak, at isang kulay na produkto ay nabuo. Ang intensity ng kulay ay maaaring masukat sa quantitatively gamit ang isang spectrophotometer o photocolorimeter.

Ang bentahe ng pamamaraang "capture" ng IgM ay ang mga antibodies ng klase ng immunoglobulin na ito ay lumilitaw sa panahon ng pangunahing pagtugon sa immune at nagpapahiwatig ng aktibong yugto ng impeksiyon, nawawala sila pagkatapos na maranasan ang sakit. Ang mga antiviral antibodies na kabilang sa klase ng IgG, sa kabaligtaran, ay nagpapatuloy sa mahabang panahon pagkatapos na maranasan ang sakit, na nagbibigay ng nakuha na kaligtasan sa sakit. Ang isang paraan ng pagsisiyasat ng DNA ay iminungkahi para sa pag-detect ng hepatitis A virus: ang komplementaryong vRNA DNA ay ginagamit bilang isang probe.

Paggamot ng hepatitis A

Dahil sa ang katunayan na ang paggawa ng interferon ay nagambala sa viral hepatitis, ang paggamot sa hepatitis A ay batay sa paggamit ng interferon at ang inducer ng endogenous synthesis nito, ang amixin.

Tukoy na pag-iwas sa hepatitis A

Ang dati nang malawakang ginagamit na seroprophylaxis ng hepatitis A na may gamma globulin ay hindi nabigyang-katwiran ang sarili nito, samakatuwid ang pangunahing diin ay inilagay sa pagsasagawa ng pagbabakuna sa prophylaxis, ang pagbabakuna laban sa hepatitis A ay isinasagawa. Para sa layuning ito, ang iba't ibang uri ng mga bakuna ay ginagawa at ginagamit na. Sa Russia, ang isang epektibong bakuna laban sa hepatitis A ay nakuha noong 1995, at ito ngayon ay matagumpay na ginagamit.