Hepatitis A virus

Ang Viral hepatitis A ay isang taong nakakahawang sakit na nailalarawan sa pamamagitan ng isang nangingibabaw na pinsala ng atay at nakikita sa pagkalasing at sa paninilaw ng clinical. Nakita ang virus ng Hepatitis A noong 1973 ni S. Feinstone (at iba pa) gamit ang paraan ng mikrobyo ng immune elektron at sa pamamagitan ng mga infecting monkeys - chimpanzees at marmosets. Ang kakanyahan ng paraan ng immune electron microscopy ay ang mga partikular na antibodies (suwero ng convalescent) ay idinagdag sa filtrate ng feces ng pasyente na may hepatitis A at ang precipitate ay ipapailalim sa elektron mikroskopya. Dahil sa pakikipag-ugnayan ng mga virus na may mga partikular na antibodies, sumailalim sila ng partikular na pagsasama. Sa kasong ito, mas madaling makilala, at ang pagsasama-sama sa ilalim ng impluwensya ng mga antibodies ay nagpapatunay sa pagtitiyak ng pathogen. Ang pagtuklas ng S. Feinstone ay nakumpirma sa mga eksperimento sa mga boluntaryo.

Ang Hepatitis A virus ay may pabilog na hugis, ang lapad ng virion ay 27 nm. Ang genome ay kinakatawan ng isang single-stranded positive RNA na may mass na 2.6 MD. Ang Supercapsid ay wala. Ang uri ng simetrya ay kubiko - icosahedron. Ang capsid ay may 32 capsomers, nabuo ito ng apat na polypeptides (VP1-VP4). Sa pamamagitan ng mga pag-aari nito, ang hepatitis A virus ay nabibilang sa genus Heparnovirus, ang pamilya Picornaviridae. Antigenically, hepatitis A virus (HAV - hepatitis A virus) ay homogenous. Ang HAV ay nagpaparami sa katawan ng mga chimpanzees, baboons, hamadryls at monkeys sa pagsusugal (marmosets). Sa loob ng mahabang panahon, hindi nilinang ang virus. Tanging sa 1980s. Posible na makakuha ng kultura ng cell kung saan ang HAV ay nagpapalaganap. Sa una na ginagamit para sa mga layuning ito, immortalized embryonic bato cell linya na resus unggoy ng makak (culture FRhK-4), at ngayon - transplanted bato cell linya ng green monkey (Culture 4647).

Ayon sa rekomendasyon ng WHO dalubhasa, pinagtibay ang mga sumusunod na katawagan ng hepatitis A virus marker: hepatitis A virus - NAU antibodies sa hepatitis A virus: anti-HAV IgM at anti-HAV IgG.

Ang HAV ay maliit na particle na may lapad na 27-30 nm, pagkakaroon ng simetrya ng icosahedral at pagkakaroon ng homogeneity. Sa electron diffraction pattern na nakuha sa pamamagitan ng pamamaraan ng immune aggregation, ang mga electron-siksik na mga particle na may mabibilis na matatagpuan symmetrically nakaayos na mga capsomer ay napansin. Sa negatibong magkakaiba, ang parehong kumpleto at walang laman na mga particle ay napansin sa mga paghahanda. Ang Nucleocapsid NAV, hindi tulad ng trangkaso, ay walang mga protrusion at lamad sa ibabaw. Mahalaga rin na ang Virion HAV ay walang hugis ng puso na istraktura.

Ayon sa kanyang pisikal-kimikal properties ng hepatitis A virus ay may kaugnayan sa pamilya ng Picornaviridae, genus Enterovirus na may atomic number 72. Gayunpaman, ito taxonomy ay masyadong hindi pangkaraniwang, at WHO natagpuan posible na mag-iwan ang mga terminolohiya na "hepatitis A virus".

Tulad ng lahat ng mga virus ng pamilya Picornaviridae, ang hepatitis A virus ay naglalaman ng ribonucleic acid. Ipinakita ng ilang laboratoryo ang posibilidad ng pag-clone ng genome ng hepatitis A virus, na nagbubukas sa pag-asam ng pagkuha ng mga paghahanda sa bakuna.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7],

Paglaban ng hepatitis A virus

Ang virus ay relatibong lumalaban sa mataas na temperatura, acids, taba solvents (walang mga lipids), disinfectants, ito tolerates isang mababang temperatura na rin. Ang lahat ng ito ay nag-aambag sa pang-matagalang pangangalaga sa panlabas na kapaligiran. Sa temperatura ng kuwarto, nakasalalay ito sa loob ng ilang linggo, sa 60 ° C ay bahagyang nawalan ng impeksyon pagkatapos ng 4-12 na oras, ganap - pagkatapos ng ilang minuto sa 85 ° C. Lubos na lumalaban sa murang luntian, dahil sa kung saan ito ay maaaring tumagos sa tubig ng gripo sa pamamagitan ng mga hadlang ng mga halaman sa paggamot ng tubig.

Ang buod ng lahat ng data, maaari naming makilala ang hepatitis A virus bilang mga sumusunod:

• ang natural master ay tao;
• Mga pang-eksperimentong hayop - marmozet, chimpanzee;
• pinagmulan ng impeksyon - feces;
• sakit - epidemya at katutubo;
• ang ruta ng paghahatid ay fecal-oral;
• panahon ng pagpapapisa ng itlog - 14-40 araw;
• paglipat sa talamak hepatitis - hindi nabanggit.

Ang mga immunological properties ng NAV ay ang mga sumusunod:

• Prototype strains - Ms-l, CR-326, GVG. Ang lahat ay pareho o katulad sa immunologically;
• Ang mga antibodies - IgM at IgG, ay ginawa bilang tugon sa pagpapakilala ng protina sa istruktura ng virus at proteksiyon;
• I Ang tropiko pagkilos ng serum ng y-globulin ng tao - pinoprotektahan o inaabot ang sakit sa ilalim ng kondisyon ng pangangasiwa bago ang impeksyon o sa panahon ng pagpapapisa ng itlog.

Ang mga katangiang pisiko-kemikal ng NAU ay ang mga sumusunod:

• Ang morpolohiya ay isang non-shell spherical na butil na may cubic symmetry, ang capsid ay binubuo ng 32 capsomers;
• Ang lapad ay 27-30 nm;
• Ang densidad sa CsCl (g / cm3) ay 1.38-1.46 (bukas na mga particle), 1.33-1.34 (mature virion), 1.29-1.31 (mga walang gulang na virion, walang laman na mga particle);
• Ang koepisyent ng sedimentation ay 156-160 mature virion;
• Nucleic acid - single-stranded, linear RNA;
• Kamag-anak na timbang ng molekular - 2,25 106-2,8 106KD;
• Ang bilang ng nucleotides ay 6,500-8,100.

Ang katatagan ng NAV sa physicochemical effects ay ang mga sumusunod:

• Ang kloroform, eter - ay matatag;
• Chlorine, 0.5-1.5 mg / l, 5 ° C, 15 min - bahagyang inactivation;
• Chloramine, 1 g / l, 20 ° C, 15 min - kumpletong inactivation;
• Formalin, 1: 4000, 35-37 ° C, 72 oras - kumpletong inactivation, 1: 350, 20 ° C, 60 min - bahagyang inactivation.

Temperatura:

• 20-70 ° C - matatag;
• 56 ° C, 30 minuto - matatag;
• 60 ° C, 12 oras - bahagyang pag-activate;
• 85 ° C, 1 min - ganap na inactivation;
• Autoclaving, 120 ° C. 20 minuto - kumpletong inactivation;
• Dry na init, 180 ° C, 1h - kumpletong inactivation;
• UV, 1.1 W, 1 min - kumpletong inactivation.

Ang ipinakita na data ay nagpapakita na ang pisikal na katangian ng hepatitis A virus ay ang pinakamalapit sa enteroviruses. Tulad ng iba pang mga enterovirus, ang HAV ay lumalaban sa maraming mga solusyon sa disimpektante, ganap na inactivated para sa ilang minuto sa 85 ° C at autoclaved.

Pinatunayan nito na ang hepatitis A virus ay maaaring paramihin sa pangunahin at tuloy-tuloy na monolayer kultura ng tao na linya ng cell, at unggoy. Lalo na aktibo pagpaparami ng hepatitis A virus sa sa vitro kultura ay sinusunod kapag gumagamit ng panimulang materyal extracts atay pasyente monkeys. Gayunpaman, dapat ito ay nabanggit na sa lahat ng mga eksperimento ayon sa isang pagpaparami ng hepatitis A virus sa sa vitro kultura kapansin-pansin ang haba incubation period sa pangunahing sipi (-10 sa 4 na linggo), magkakasunod na akumulasyon ng viral genetic pagtaas materyal, ngunit ang ganap na halaga ay masyadong menor de edad na nagbibigay sa pagtaas sa maraming mga mananaliksik nagsasalita ng isang hindi kumpletong pagtitiklop ng hepatitis A virus sa tissue kultura.

Ibinubuod ang data ng panitikan sa pagpaparami ng hepatitis A virus mula sa mga kultura ng hindi-ugat, maaaring masabi na ang katunayan ng isang matagal na karanasan ng HAV sa vitro ay walang alinlangan. Pinakamainam na kondisyon para sa matatag na mataas na antas virus pagtitiklop hindi ganap kinilala, at ito constrains mag-aral nito biological katangian, pagkuha ng source reagents para sa ang produksyon ng mga diagnostic at bakuna hells construction.

Kasabay nito, mas maasahan ang mga hatol tungkol sa problemang ito ay matatagpuan sa literatura. Ang solusyon ng lahat ng mga isyu na may kaugnayan sa paglilinang ng hepatitis A virus ay isang bagay para sa malapit na hinaharap. Kapag pag-aaral ng pinakamainam na kondisyon HAV pagpapalaganap sa cell kultura embryonic bato unggoy na resus monkeys nagsiwalat dalawang phase: ang phase ng mga nakakahawang virus produksyon (hanggang sa 6-8 araw sa ika-5 talata) at ang phase ng intensive akumulasyon ng viral antigen. Ipinakita rin na ang pinaka-makabuluhang akumulasyon ng viral antigen ay nangyayari sa ilalim ng mga kondisyon ng tinatawag na roller cultivation (umiikot na mga bote). Sa paraang ito ay bubukas up ang posibilidad ng pagkuha ng isang kultura ng mga antigen sa mga malalaking dami, at dahil dito ay panimulang materyal para sa paghahanda ng diagnostic systems at produksyon ng paghahanda ng bakuna.

Epidemiology ng hepatitis A

Ang hepatitis A virus ay may mataas na pathogenicity para sa mga tao. Ayon sa pagtatapos ng WHO (1987), para sa pagsisimula ng sakit, ito ay sapat na makahawa lamang ng isang virion. Gayunpaman, ang mga praktikal na nakakahawang dosis ay malamang na mas mataas. Ang pinagmulan ng impeksyon ay isang taong nahawaan lamang. Ang virus ay inilabas sa malaking dami ng feces 12-14 araw bago ang paglitaw ng jaundice at sa loob ng 3 linggo. Panahong icteric. Ang mga makabuluhang pagkakaiba sa paghihiwalay ng pathogen sa mga pasyente na may icteric, jaundice at asymptomatic forms ng hepatitis A ay hindi nakilala. Ang paraan ng impeksyon ay fecal-oral, higit sa lahat may tubig, at din sa pamamagitan ng mga ruta ng sambahayan at pagkain. Ang paraan ng impeksyon ay fecal-oral, higit sa lahat may tubig, at din sa pamamagitan ng mga ruta ng sambahayan at pagkain. Ang pangunahing (pangunahing) ruta ng paghahatid ng virus ay tubig. Posible rin ang impeksiyon ng hangin. Ang pagkamaramdamin ng populasyon ay pandaigdigan. Kadalasan ang mga batang wala pang 14 taong gulang ay may sakit. Ang sakit ay may isang malinaw na tag-season ng taglagas-taglamig.

[8], [9], [10], [11], [12], [13], [14], [15]

Mga sintomas ng hepatitis A

Ang incubation period saklaw 15-50 araw, depende sa laki ng dosis infecting virus, ngunit isang average ng 28-30 araw. Sa sandaling sa katawan, hepatitis A virus replicates sa regional lymph nodes, sa dugo at pagkatapos ay sa mga cell atay at nagiging sanhi ng nagkakalat ng talamak sakit sa atay na ay sinamahan ng mga lesyon ng atay hepatocytes at reticuloendothelial cell at isang pagbaba sa kanyang detoxification at barrier function. Hepatocyte pinsala arises hindi dahil sa ang direktang pagkilos ng virus, bilang isang resulta ng immunopathological mekanismo. Ang pinaka-tipikal na larawan ng hepatitis A ay acute may paninilaw ng balat cyclic form: ang incubation period, ang prodromal (preicteric), paninilaw ng balat at convalescence panahon. Gayunpaman, sa foci ng impeksyon ay nagpapakita ng malaking bilang ng mga pasyente na may asymptomatic at anicteric paraan ng impeksyon, ang bilang ng mga na predominates higit sa may paninilaw ng balat ( "iceberg phenomenon").

Ang post-infectious immunity ay malakas at pangmatagalang, na dulot ng virus-neutralizing antibodies at immune memory cells.

Microbiological diagnosis ng hepatitis A

Diagnosis ng hepatitis A (maliban hayop impeksiyon - chimpanzee marmozet, baboons, na kung saan namin) batay sa iba't-ibang mga immunological pamamaraan: DGC immunofluorescence pamamaraan, hemagglutination immune pagdirikit (complex ng viral antigen + antibody sa presensya ng pampuno adsorbed sa erythrocytes at nagiging sanhi ng kanilang pagdirikit) . Gayunman, ang applicability ng mga pamamaraan na ito ay limitado dahil sa kakulangan ng mga tiyak na viral antigens at immunofluorescence reaksyon ay nangangailangan ng atay biopsies, na kung saan ay hindi kanais-nais. Maaasahan at tiyak na paraan ay immune elektron mikroskopya, ngunit ito ay lubhang oras ubos. Samakatuwid, hanggang sa ang tanging katanggap-tanggap na paraan para sa mga immunological reaksyon ay immunosorbent assay solid phase sa anyo ng IPM, o RIM, lalo na sa pagbabago ng "capture" ng immunoglobulin M. Sa ating bansa para sa layuning iminungkahing system test - "diag-A-GEO". Ang prinsipyo ng operasyon ng sistema ng pagsubok ng sumusunod. Sa mga pader ng polisterin lunochek sorbed unang antibodies sa immunoglobulins ng klase M (antiimmunoglobuliny M) at pagkatapos ay idinagdag sa sinisiyasat pasyente suwero. Kung may antibody klase IgM, sila ay sumailalim sa isang antibody-Ti-M, at pagkatapos ay idinagdag sa isang partikular na viral antigen (hepatitis A virus), na kung saan ay nakuha sa pamamagitan ng lumalagong sa cell kultura. Ang sistema ay anglaw, at dito ay idinagdag antiviral antibodies na may label na may malunggay peroxidase. Kung nagkaroon ng pakikipag-ugnayan ng lahat ng apat na mga bahagi ng sistema, mayroong isang four-layer "sandwich":

• antiimmunoglobulins M,
• immunoglobulins M (laban sa hepatitis A virus - sa serum ng pasyente),
• viral antigen,
• antiviral antibodies na may label na isang enzyme.

Upang makita ang komplikadong ito, isang substrate para sa enzyme ay idinagdag sa mga lunettes. Sa ilalim ng impluwensya ng enzyme, ito ay nawasak, at isang kulay na produkto ay nabuo. Ang intensity ng kulay ay maaaring masukat quantitatively sa isang spectrophotometer o photocolorimeter.

Ang bentahe ng paraan ng "pagkuha" ng IgM ay ang mga antibodies ng klase ng immunoglobulins na ito ay lumilitaw sa pangunahing tugon sa immune at nagpapahiwatig ng isang aktibong yugto ng impeksiyon, nawawala sila pagkatapos ng paglipat na sakit. Sa kabilang banda, ang antiviral antibodies na kabilang sa klase ng IgG, ay nagpapatuloy nang mahabang panahon pagkatapos ng sakit, na nagbibigay ng nakuhang kaligtasan sa sakit. Para sa pagtuklas ng hepatitis A virus, isang pamamaraan ng probe ng DNA ay iminungkahi: ang isang komplimentaryong probe vRNA ay ginagamit bilang probe.

Paggamot ng hepatitis A

Dahil sa katotohanan na ang produksyon ng interferon ay nasisira sa viral hepatitis, ang paggamot ng hepatitis A ay batay sa paggamit ng interferon at inducer ng endogenous synthesis amixin nito.

Ang partikular na pag-iwas sa hepatitis A

Dati malawak na inilalapat seroprevention hepatitis A gamit gammaglobulin ay hindi nabigyang-katarungan, gayunman, ang diin ay inilagay sa mga holding pagbabakuna, dala ng pagbabakuna laban sa hepatitis A. Upang magawa ito, ang iba't ibang mga variant ng mga bakuna ay binuo at ginagamit na. Sa Russia, ang isang epektibong bakuna laban sa hepatitis A ay nakuha noong 1995, at ngayon ay matagumpay itong naipapatupad.